白术多糖通过花生四烯酸代谢通路缓解环磷酰胺诱导的小鼠肾损伤

本研究旨在探讨白术多糖(PAMK)对环磷酰胺(CTX)诱导的小鼠肾脏损伤的影响及潜在的作用机制。选用100只42~43日龄雄性C57BL/6小鼠随机分为四组,白术多糖(PAMK)组和白术多糖+环磷酰胺(PAMK+CTX)组灌胃200 mg/kg PAMK,1次/d;对照(Control)组和环磷酰胺(CTX)组给予等量的生理盐水。实验第25~27 d,CTX组和PAMK+CTX组腹腔注射100 mg/kg CTX,1次/d;Control组和PAMK组注射等量生理盐水。实验第35 d采集肾脏进行组织学观察,氧化应激检测和转录组测序。结果显示,与CTX组相比,PAMK+CTX组肾脏损伤有所缓解;肾脏中丙二醛量显著下降(P<0.05)、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性和总抗氧化能力显著升高(P<0.05)。为了进一步探究PAMK缓解CTX诱导肾损伤的调控机制,本实验进行了肾脏转录组测序。结果显示,在Control组vs CTX组和CTX组vs PAMK+CTX组分别鉴定到493个和333个差异表达基因(DEGs)。两组DEGs功能富集分析结果发现DEGs富集在花生四烯酸代谢等信号通路。花生四烯酸通路相关基因检测结果显示,与Control组相比,CTX组Cyp2b9、PTGS1、NF-κB和Mfsd2a mRNA表达量显著升高(P<0.05);与CTX组相比,PAMK+CTX组Cyp2c65、BCL6 mRNA表达量显著升高(P<0.05),Cyp2b9、PTGS1和Mfsd2a mRNA表达量显著降低(P<0.05)。综上所述,PAMK可能通过花生四烯酸代谢通路缓解小鼠肾脏氧化应激,从而降低CTX诱导的小鼠肾脏损伤。

LPS诱导马冈鹅法氏囊损伤相关基因的筛选

【目的】研究脂多糖(LPS)对马冈鹅法氏囊组织损伤和氧化应激的影响,并探究其调控机制。【方法】选择100只1日龄马冈鹅(公母各半),随机分为对照组和LPS组,每组5个重复,每个重复10只。LPS组雏鹅分别于24、26和28日龄时腹腔注射2 mg/kg LPS,对照组注射等量生理盐水。于28日龄注射1 h后,无菌采集法氏囊进行组织学观察、氧化应激指标检测,并构建法氏囊转录组文库。通过差异表达基因鉴定、GO功能和KEGG通路富集及蛋白互作网络分析筛选出与LPS诱导法氏囊损伤有关的候选基因;随机挑选10个差异表达基因,利用实时荧光定量PCR验证其表达情况。【结果】马冈鹅法氏囊组织学观察结果表明,LPS组法氏囊结构完整性明显降低,囊泡内细胞排列紊乱、空泡数量增加。与对照组相比,LPS组法氏囊谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05);LPS组共获得507个差异表达基因,其中277个基因上调,230个基因下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,差异表达基因主要富集在与炎症和免疫反应相关的条目,涉及Cytokine-cytokine受体相互作用、Notch和Hedgehog等信号通路。结合蛋白互作网络分析,共筛选到TNF超家族成员10(TNFSF10)、CREB结合蛋白(CREBBP)、中心粒旁物质1(PCM1)、蛋白酪氨酸磷酸酶非受体6型(PTPN6)等27个差异表达基因。实时荧光定量PCR结果显示,转录组测序结果准确可靠。【结论】本研究探究了LPS诱导马冈鹅法氏囊损伤前后法氏囊组织中的差异表达基因,筛选到了影响法氏囊组织损伤的Cytokine-cytokine受体相互作用、Notch和Hedgehog等信号通路以及TNFSF 10、CREBBP、PTPN 6等相关基因,为了解LPS诱导鹅法氏囊损伤的分子机制提供理论参考。

白术多糖对环磷酰胺诱导的雏鸡法氏囊损伤的影响

该实验旨在探究白术多糖(PAMK)对环磷酰胺(CTX)诱导的雏鸡法氏囊免疫抑制性损伤的影响。120只1日龄岭南黄鸡随机分为对照组、PAMK组、CTX组和CTX+PAMK组,每组30只。组织学观察结果显示,对照组和PAMK组组织结构完整;CTX组内法氏囊小结和小淋巴细胞数量、皮质部厚度显著降低,大量前体B细胞固缩;与CTX组相比,CTX+PAMK组皮质部厚度显著升高,淋巴细胞数量明显增加。Tunel检测结果显示,CTX组法氏囊细胞凋亡率显著上升(P<0.05);与CTX组相比,PAMK处理有效缓解了CTX诱导的细胞凋亡(P<0.05)。上述结果表明,PAMK可以有效缓解CTX诱导的雏鸡法氏囊组织结构损伤和细胞凋亡。

白术多糖对小鼠胸腺与脾脏指数、组织结构及p38/MAPK信号通路的影响

为探究白术多糖的最适作用浓度,试验选用40只4周龄Balb/c小鼠随机分为对照组和不同浓度白术多糖灌胃组(100、200、400、600 mg/kg),灌胃14 d后,采集小鼠胸腺与脾脏,称重并计算器官指数,制作石蜡切片观察组织结构变化,采用real-time PCR检测组织中p38/MAPK信号通路相关的ASK1、p38、MSK1/2 mRNA的相对表达量。结果显示,与对照组相比,200 mg/kg的白术多糖可显著提升小鼠免疫器官指数(P<0.05),使组织结构更为完善,并且上调ASK1、p38、MSK1/2基因的相对表达量,而添加低浓度或高浓度白术多糖组小鼠的无明显变化。表明添加200 mg/kg白术多糖可激活小鼠胸腺组织细胞与脾脏组织细胞的p38/MAPK信号通路,从而促进免疫器官的发育,增强机体的免疫调节作用。

环磷酰胺致小鼠免疫器官损伤的组织学研究

[目的]本研究旨在探索建立环磷酰胺免疫抑制小鼠模型的最佳注射剂量。[方法]选取32只5周龄雌性小鼠,随机分为4组,预饲7 d后,对照组小鼠腹腔注射0.5 mL生理盐水,CTXⅠ组、CTXⅡ组、CTXⅢ组分别腹腔注射40、100、160 mg·kg^(-1)·BW^(-1)的CTX溶液,注射后第7天测定小鼠胸腺、脾脏指数及体重变化,制备石蜡组织切片、透射电镜切片、血涂片及骨髓涂片,观察胸腺、脾脏、骨髓组织损伤程度,计数中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞比例及骨髓多染红细胞(PCE)微核率。[结果]与对照组相比,CTX可导致小鼠体重和胸腺指数显著下降(P<0.05),小鼠体重分别为(28.71±2.02)g、(28.09±2.54)g、(28.08±2.22)g,胸腺指数分别为2.44±0.34、1.92±0.26、1.64±0.31。胸腺结构紊乱,纤维增生,胸腺细胞大量凋亡和死亡。脾脏结构模糊,脾脏动脉周围淋巴鞘变薄,发生髓外造血,各类免疫细胞凋亡和坏死显著增多。与对照组相比,CTX导致小鼠血液中中性粒细胞比例显著升高(P<0.05),分别为52.21%±4.08%、52.00%±7.40%、70.90%±1.92%;小鼠淋巴细胞比例显著下降(P<0.05),分别为44.00%±2.93%、41.67%±6.33%、24.38%±4.31%;白细胞形态发生变异,濒死及死亡白细胞数量增多;小鼠骨髓PCE微核率显著升高(P<0.05),分别为4.38‰±2.83‰、13.75‰±1.91‰、18.25‰±1.98‰,股骨骨髓内髓性造血干细胞显著减少并伴有纤维增生。[结论]CTX浓度在100 mg·kg^(-1)·BW^(-1)时可引起昆明小鼠胸腺、脾脏、骨髓及白细胞出现典型的病理损伤,可用于制备免疫抑制小鼠模型。研究结果为筛选适宜的制备免疫抑制小鼠模型的CTX注射浓度提供了组织学上的参比依据。

不同来源硒对小鼠淋巴结中离子谱的影响

[目的]探究不同来源的硒对小鼠淋巴结中离子谱的影响,进而探讨硒调节淋巴结免疫可能的作用途径。[方法]选择40只BALB/c小鼠,随机分为对照组、亚硒酸钠组、酵母硒组、海藻硒组4组,各组饲料中硒含量分别为0.03、0.23、0.23、0.23 mg/kg。试验第60天无菌采集各组小鼠淋巴结,运用电感耦合等离子体质谱法检测各组小鼠淋巴结中各元素水平。[结果]与对照组相比,亚硒酸钠、酵母硒、海藻硒都能不同程度影响小鼠淋巴结中常量元素、必需微量元素、有毒微量元素的含量,其中酵母硒和海藻硒在降低有毒微量元素沉积方面效果显著优于亚硒酸钠。[结论]有机硒在调节小鼠淋巴结中离子谱方面有着更好的效果。