OsSAUR55通过GA途径调控水稻株型

以Francis背景下通过CRISPR/Cas9技术获得的敲除突变体ossaur55-1、ossaur55-2为对象,研究其是否影响水稻株型、叶色、单株穗质量、结实率等农艺性状的变化,探究基因OsSAUR55是否通过参与GA途径调控水稻株型,为相关激素途径调控水稻株型提供理论依据。调查野生型(WT)与敲除突变体成株期的主要农艺性状,包括株高、穗长、单株穗质量、十粒长、十粒宽、剑叶长、剑叶宽等;利用叶绿素计和光合速率测定仪测定野生型和突变体齐穗期剑叶的叶绿素含量和净光合速率;通过实时荧光定量PCR技术(qPCR)测定基因OsSAUR55在水稻种子萌发的不同时间点和不同组织中的表达情况;通过原核表达法观察蛋白OsSAUR55的亚细胞定位情况;采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定野生型和突变体的内源激素(GA和IAA)含量;进一步分析GA途径相关基因的表达情况。结果显示,在成株期,突变体ossaur55-1和ossaur55-2都有显著的表型变化,其中突变体的株高比野生型明显变矮、叶色更绿、叶绿素含量增加、光合作用效率降低、结实率降低、千粒质量降低、单株穗质量降低;定量结果显示,OsSAUR55在胚芽中表达量最高,在剑叶中基本不表达;共聚焦结果显示,OsSAUR55可能定位于细胞膜和细胞核;激素检测结果表明,突变体内源激素GA4的含量显著降低;基因的表达量分析发现,突变体中GA合成途径中基因KAO、GA13ox1、GA20ox1、KO1的表达量显著高于野生型,GA代谢途径中GA2ox5、GA2ox8、GA2ox9的表达量也显著高于野生型。初步推测,敲除基因OsSAUR55导致内源GA4含量降低,可能通过GA途径调控水稻株型,进而影响水稻产量。

水稻lncRNASVR及邻近SAUR基因在种子低温萌发中的表达

【目的】长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)长度大于200 nt,一般不具有编码蛋白质功能。探究低温下lncRNA对邻近SAUR基因表达的影响,以期为研究水稻种子低温萌发的能力提供理论依据。【方法】lncRNA SVR由华南农业大学国家植物航天育种工程技术研究中心前期研究筛选,可以响应低温胁迫,通过生物信息学方法分析lncRNA SVR的二级结构并寻找lncRNA SVR内部的冷胁迫基序,通过qRT-PCR分析lncRNA SVR和SAUR基因的表达特性。【结果】lncRNA SVR序列中存在高度相似的冷胁迫响应基序,且在茎环连接处。表达特性分析表明,在种子萌发过程中低温胁迫会持续降低lncRNA SVR的表达,邻近的多个SAUR基因在低温胁迫下的表达量明显高于在常温下的表达量,表明lncRNA SVR的邻近SAUR基因一定程度上能够和lncRNA SVR一样响应低温胁迫。表达相关性分析表明,在低温萌发中lncRNA SVR与这些SAUR基因的表达均呈负相关关系,lncRNA SVR与OsSAUR55的表达呈显著负相关关系。进一步分析种子低温萌发中SAUR基因在lncRNA SVR敲除系中的表达情况,结果表明,在敲除系中,lncRNA SVR的下降幅度低于其在野生型中的下降幅度,OsSAUR41、OsSAUR53、OsSAUR54、OsSAUR55表达量的上升幅度均显著低于其在野生型中的上升幅度。【结论】lncRNA SVR可能负调控OsSAUR55的表达,进而响应低温胁迫。

乡村振兴背景下欠发达地区旅游服务现状分析——以野玉海为例

乡村振兴是中国实现“两个一百年”伟大奋斗目标的重要内容,也是中国全面建成小康社会的重要环节。通过对六盘水市野玉海山地旅游度假区的旅游业服务现状进行调研,从景区从业人员、景区建设以及游客景区互动方面找出景区现存问题,并提出健全员工福利制度,留住专业人才、发展校企合作,扩大专业队伍、创新旅游模式,塑造特色形象以及重视游客建议,促进持续发展等措施。

氯化钠和光照处理对辣椒愈伤形成及辣椒素含量的影响

为了解辣椒愈伤组织形成及影响辣椒素积累的条件,本研究以‘杭椒五号’和‘文昌小米椒’为实验材料,探究了愈伤组织形成的影响因素,并对不同光照和氯化钠浓度处理下愈伤组织中辣椒素类化合物的含量进行了测定和比较。结果表明:以下胚轴为外植体,在MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA激素配比下,愈伤组织诱导效果最佳;相较于黑暗条件,16 h光照8 h黑暗条件下,‘文昌小米椒’和‘杭椒五号’辣椒素含量分别提升183.5%和1268.7%,生长指数分别提升36.0%和38.5%;3.0 g/L氯化钠处理下,‘文昌小米椒’和‘杭椒五号’辣椒素积累达到最大,分别提升299.9%和477.2%,氯化钠对‘文昌小米椒’生长指数无显著影响,但1.0 g/L氯化钠可以使‘杭椒五号’愈伤组织生长指数提升2.54倍;光照和氯化钠同时处理,辣椒素含量较单独光照处理要低,但促进了愈伤组织的生长。氯化钠和光照均是促进辣椒愈伤组织产生辣椒素的关键影响因素,本研究将对相关研究人员探究辣椒素代谢调控和体外辣椒素高效生产提供借鉴。