IAA及KCN在黄瓜子叶离体叶绿体氧化还原作用过程中的相互作用

IAA对于不同时期的叶绿体 DCPIP光还原均有促进效应。而对叶绿体的放氧效率的促进则随子叶叶龄的增长而下降至零。 CN- ( 1 0 - 3mol/L)存在时不同程度地抑制叶绿体的DCPIP光还原和氧化放氧。而 IAA( 1 0 - 5、1 0 - 4mol/L)则能消除 CN- 的抑制作用而仅表现IAA原有的促进作用。同时 ,IAA可以释放照光和不照光条件下 KCN对离体叶绿体分解外源 H2 O2 的抑制。叶绿体光系统的光还原和 H2 O的光解放氧在时间上可通过累积特定的中间产物 (可能为 H2 O2 )而分离。这在较为衰老的子叶叶绿体上尤为明显。

枣愈伤组织诱导和再生植株

以民勤小枣幼茎和幼叶为外植体 ,诱导出愈伤组织 ,用茎尖诱导生根获得再生植株。从茎段诱导的愈伤组织属淡绿色致密的 型和白色疏松的 型。它们都是非胚性愈伤组织。研究了渗透压、外植体取材时间等因素对愈伤组织诱导及生长的影响。幼嫩的材料易诱导出愈伤组织 ,在各种基本培养基中 ,以 3/4MS培养基诱导率最高 ,暗培养较光下培养有利 ,3%～ 5%蔗糖浓度最适宜 ,而高渗透压不利。各种激素对继代培养的作用依次是 2 ,4- D>IBA>6- BA、IAA、NAA、ZT、2 i P>KT。愈伤组织可在含有 0 .5～ 1 .0 mg/L的 2 ,4- D或 IBA的 1 /2MS培养基上分化出根 ,茎尖也可在这些培养基上通过愈伤组织分化根而获得再生植株。

大葱提取物对黄瓜枯萎病菌抑菌活性研究

以黄瓜枯萎病菌为供试菌,采用孢子萌发率和菌丝生长速率法研究了大葱总提取物、蛋白成分、多糖成分等各成分及大葱挥发性物质的抑菌作用。结果表明:大葱总提取物和挥发性成分对供试菌孢子萌发及菌丝生长都有很好的抑制效果,大葱总提取物在浓度达500mL·L-1时,对孢子萌发抑制率及菌丝生长抑制率分别为100%和38.6%;大葱挥发性成分在浓度达5g·dm3时,对孢子萌发抑制率为100%,对菌丝生长的抑制率为42%,大葱蛋白及多糖成分对供试菌均无抑制效果。

植物净化塘处理油漆厂废水的试验研究

凤眼莲（ＥｉｃｈｈｏｒｎｉａＣｒａｓｓｉｐｅｓ）和细绿萍（Ａｚｏｌｌａｆｉｌｉｃｕｌｏｉｄｅｓ）对酸、醇、苯系物为主的工业污染水具有生物净化作用，以这两种植物为主体的净化塘工艺流程比较简便，具有工业应用潜力．凤眼莲的去污效果优于细绿萍．凤眼莲对酚（２ｄ）、ＣＯＤ（６ｄ）的去除率分别为９７％、９０％。对氨氮和油类的６ｄ去除率为２７％、４９％，且稳定性比较差．本文还对凤眼莲净化污水的机理作了探讨．

适应拔尖学生培养目标的分子生物学实验教学体系的探索

根据我院当前分子生物学实验课程的开设现状,结合生物萃英班拔尖人才的培养目标,探讨了本实验课程教学体系改革的一系列探索,希望通过教材建设、内容更新、教学体系优化、优秀师资的促进、师生交流加强各方面的措施,有效改善分子生物学实验的教学效果,提高拔尖本科生的实验综合能力和科研素养。

结合叶绿体基因matK/trnK序列和生境分析不同生态型芦苇的系统发育

以甘肃省临泽县境内的4种生态型芦苇(Phragmites communis Trin。)的18个样品为材料,采用PCR扩增技术,以通用引物"matK-FF74",和"matK-trnK-2R"扩增matK/trnK序列,对纯化后的产物进行序列测定和分析。序列比对软件为Clustal W,系统发育软件分析为PAUP4b10并用以构建MP和ML发育树和计算遗传距离,外群为芦竹(Arundo donax)。结果表明:matK/trnK序列长为1745～1753 bp,含有91个简约信息位点和120个可变位点,获得3个严格一致树。MP树和ML树共同说明水生芦苇是最古老的类群,它与沙丘芦苇之间的遗传距离最远,重度盐渍过渡型芦苇和轻度盐渍过渡型芦苇属于中间过渡类群。

转基因玉米中植酸酶蛋白沉淀条件探索

为了对玉米中表达的植酸酶蛋白的酶学性质进行深入研究,以转基因玉米籽粒中提取的植酸酶粗提液为研究材料,探索了植酸酶和总蛋白的溶解度与硫酸铵饱和度之间的关系,结果显示在0～60%硫酸铵饱和度范围沉淀的植酸酶仅占初提液中总植酸酶含量的1.85%,而在此范围内沉淀的总蛋白却占初提液的总蛋白含量的57%,植酸酶比活为0.44 U/mg;在60%～80%硫酸铵饱和度范围沉淀的植酸酶和总蛋白分别占初提液中各自含量的58%和10%,植酸酶比活为84.4 U/mg;在80%～90%硫酸铵饱和度范围沉淀的植酸酶收率占初提液中含量的1.9%。因此选用60%～80%硫酸铵饱和度分级沉淀植酸酶,在此条件得到的植酸酶比活比粗提液的植酸酶比活（13.8 U/mg）高6.1倍。

稀土Nd^（3＋）对植物叶绿体类囊体蛋白复合物影响的研究

Ｎｄ￣（３＋）对植物叶绿体类囊体蛋白复合物的影响，不仅表现在对叶绿体类囊体膜溶液的吸收光谱改变上，而且也表现在对色素蛋白复合物ＳＤＳ－ＰＡＧＡ电泳带扫描图谱吸收峰面积变化上；同时也对ＤＣＩＰ光还原活力表现出抑制作用，对Ｃａ￣（２＋）－ＡＴＰａｓｅ的活力表现出低浓度激活，高浓度抑制的作用。

气相色谱法测定RuBp羧化酶活性的研究

ＲｕＢｐ羧化酶作用后反应体系中能为加入的ＨＣｌ释放出的剩余，作为ＲｕＢｐ羧化酶活性指示。所释放的ＣＯ＿２以气相色谱法检测，用黄瓜叶片中ＲｕＢｐ羧化酶的反应时间曲线和酶量曲线验征，并与现行的分光光度，￣（１４）Ｃ标记测试方法比较分析，认为本方法具有应用简便、快速、准确、重复性好等优点。所以，可被认为是一种有效的测定ＲｕＢｐ羧化酶活性的方法。

优化实验设计 提高学生的实验兴趣——以western blotting检测人血清IgG实验为例

近年高校的发展中,实践教学的加强和综合素质的培养已经成为当前大学教育改革的重点。分子生物学作为一门实践性较强的学科,广泛应用于生命科学的各个领域。通过对实验设计、实验材料、实验报告等各方面的优化改进,将基础实验与科研应用和专业发展前沿紧密结合。在提高学生学习兴趣的同时,培养学生的科研思维,促进学生发挥主观能动性,不断提高实践和创新能力,这也为学生后续的工作和科研打下了扎实的基础。

以“2011计划”为契机加强国家级实验教学示范中心分子生物学实验课程建设

以高校“2011计划”为蓝本，从提高对本科教学重要地位的认识．重审教学理念．制定合理的教学大纲、采用多元化教学手段．增加创新创业训练项目等方面，对国家实验教学示范中心分子生物学课程如何协调发展和建设进行了探讨，并据此为不断提高教学质量提供保证。

黄瓜ZYMV-CH抗性遗传与连锁分子标记研究

小西葫芦黄化花叶病毒中国株系(ZYMV-CH)是危害我国黄瓜的主要病毒之一。本试验以抗病的‘秋棚’和感病的‘欧洲8号’杂交获得的115份重组自交系(RIL)为材料,进行了黄瓜抗ZYMV-CH遗传规律和连锁分子研究。结果表明:病情指数在黄瓜RIL群体呈双峰分布,表明其对ZYMV的抗性是受主基因控制的性状,但也存在微效基因的修饰作用。采用集团分离分析法(BSA)和AFLP技术,获得与ZYMV-CH抗性基因连锁的两条特异性片段(E-ACG/M-CAG-182和E-ACG/M-CAG-180),遗传连锁距离分别为5cM和11cM。将E-ACG/M-CAG-180特异片段转化成共显性的SCAR标记SCAR3-109,与ZYMV-CH的抗性基因遗传连锁距离为11cM。该标记可以作为黄瓜抗ZYMV辅助选择的分子标记。

不同生态型芦苇生境适应性的遗传差异

以甘肃省临泽县内的4种生态型芦苇为材料,采用随机扩增多态DNA技术和等位酶多态性分析技术初步探讨了不同生态型芦苇对各自生境适应性的遗传差异。RAPD-PCR(随机扩增多态DNA聚合酶链式反应)采用10碱基随机引物,筛选出16条重复性高并产生明显多态性产物的引物,共扩增了559条谱带,其中489条谱带具有多态性,多态性百分数为87.5%。等位酶分析选用了12个等位酶系统,其中9个基因位点显示了多态性,多态位点平均百分数为34.1%。试验结果表明,不同生态型芦苇之间具有显著的分子遗传差异和等位酶表达差异,同时属于同一生态型的个体和群体之间的遗传差异很小,这与不同生态型芦苇在适应各自生境的过程中所形成的形态学和生理学方面的差异是一致的,说明各个生态型之间的差异是遗传分化的结果。

1，4－二取代酰氨基硫脲类化合物（DATCDs）的植物生理效应和应用研究──Ⅶ．DATCD－A对黄瓜幼苗叶片中PCR和PCO途径的调控

用０．００１μｇ／ＬＤＡＴＣＤ－Ａ［１－异烟酰基－４＇－氯代苯基）－氨基硫脲］溶液喷施黄瓜幼苗后，发现ＲｕＢｉＳＣＯ的羧化活性增加，加氧活性下降，羧化与加氧比值上升。与光合碳还原（ＰＣＲ）和光合碳氧化（ＰＣＯ）有关的指标如光合速率提高，而乙醇酸氧化酶（ＧＯ）活性、光呼吸相对值、ＣＯ２补偿点均呈下降趋势。因此认为ＤＡＴＣＤ－Ａ具有调节黄瓜叶片中ＰＣＲ和ＰＣＯ途径的作用，这可能是导致黄瓜增产的主要原因。

沙丘芦苇特有内含物与水芦叶绿体及其蛋白质的相互作用特征

以水生芦苇为材料,通过吸附试验、亲和试验和荧光光谱试验探讨了沙丘芦苇(Phragmites communis Trin)的特有内含物PAAC与水芦叶绿体吸附特性及其作用位点,并在固定化的条件下研究其与水芦叶片可溶性蛋白的相互作用特点,以阐明PAAC对叶绿体的保护作用机理。结果显示:(1)水芦叶绿体对PAAC的吸附符合Freundlich吸附模型,吸附量随pH的增加而增大并于pH 7.6时达到最大值(0.86μg/μg),吸附量虽随离子强度的提高而降低,但降幅较小。(2)PAAC可与水芦可溶性蛋白结合,0.26 mol/L的NaCl溶液能够洗脱与PAAC结合的蛋白质,两者间的相互作用以盐键为主,且结合蛋白质的种类特异性不明显。(3)PAAC与水芦蛋白质之间存在着相互结合作用并可能存在变构效应,它对蛋白质的荧光猝灭作用是生成PAAC-蛋白质复合物的静态猝灭,它与蛋白质的结合常数在1.0×105左右及结合位点数为1∶1。

不同生态型芦苇Rubisco免疫学特性差异

以河西走廊荒漠地区不同生态型芦苇为研究材料,提取并纯化得Rubisco蛋白,经SDS-PAGE凝胶电泳将Rubisco大、小亚基分离,用Rubisco全酶蛋白及其大、小亚基分别注射昆明系雄性小白鼠制备抗体,经Western-blotting鉴定结果表明:(1)水芦Rubisco全酶抗体可与水芦、沙芦及菠菜Rubisco大亚基发生反应,而与小亚基均未见显色反应,且水芦显色最深,沙芦略浅,菠菜最浅;(2)水芦、沙芦Rubisco大亚基抗体可与水芦、沙芦、菠菜大亚基发生抗原交叉反应,且均不与小亚基发生反应,并且其与菠菜Rubisco大亚基的反应程度明显低于水芦和沙芦;(3)用与Rubisco大亚基抗体同样的制备方法,均未检测到水芦、沙芦Rubisco小亚基抗体的产生;(4)菠菜Rubisco全酶抗体可与菠菜、水芦、沙芦、水稻Rubisco大亚基均发生抗原交叉反应,但仅与其自身小亚基反应,且与菠菜Rubisco大亚基显色反应最深,水稻略浅,沙芦、水芦稍有反应.由此说明,水芦、沙芦Rubisco全酶蛋白及其大亚基免疫学特性差异较小,而与双子叶植物菠菜相比差异较大;水芦、沙芦Rubisco蛋白免疫化学决定簇的差异主要决定于小亚基上,且其小亚基不具有抗原活性或抗原活性较弱.

禽流感病毒H5N1亚型RNA聚合酶蛋白表达纯化及晶体生长

通过使用原核表达载体大量表达H5N1病毒RNA聚合酶亚基PA_C257,PB1_N25,再经过GST亲和层析和Sephadex G-200层析柱纯化,获得了高纯度的蛋白复合体。采用悬滴气相扩散法筛选蛋白晶体,在1～1.5 mol/L乙酸钠和pH7.9条件下获得了理想的晶体,为解析禽流感病毒RNA聚合酶三维结构并进一步认识其生物功能奠定了基础。

沙芦内含物PAAC对干旱胁迫下玉米幼苗叶片光合及蛋白氧化损伤的保护作用

采用沙培试验,培养期间用沙丘芦苇特有的多氨基芳香族化合物PAAC水溶液对培养的两种不同基因型玉米幼苗叶片进行喷施处理,研究幼苗叶片在正常供水和干旱胁迫下的相对含水量、光合作用、叶绿素荧光等参数的变化趋势。确定这些生理指标在评价作物抗旱性方面的作用,并与甜菜碱溶液喷施处理的作物参比,研究该内含物对植物蛋白氧化损伤的影响。结果表明:PAAC溶液能够明显地降低干旱下植物叶片蛋白质中羰基含量的上升,即该内含物能够有效地减弱干旱胁迫下植物蛋白氧化损伤程度,RWC相对较高,说明PAAC一定程度上降低水分的散失。当植物受到中度干旱胁迫时,PAAC显著地减缓玉米叶片光合速率的下降,同时Fv/Fm、qP、ETR等叶绿素荧光参数数值也明显高于同期的对照,表明PAAC具有保护类囊体膜上PSⅡ的光合学活性的作用,一定程度上增强了植物的抗旱能力。

沙丘芦苇胸腺嘧啶二磷酸葡萄糖脱水酶的序列分析与结构预测

目的:用生物信息学方法对沙丘芦苇胸腺嘧啶二磷酸葡萄糖脱水酶(PcTGD)的序列进行分析与结构预测,为后续研究提供参考。方法:以GOR法预测了PcTGD的二级结构,以ProtScale分析它的疏水性,最终通过现有的序列同源性比较,用MODELLER预测了PcTGD的三维结构。结果:PcTGD具有高度保守的活性中心Tyr***Lys和N末端的Gly*Gly**Gly的高度保守结构。结论:PcTGD属于一个短链脱氢酶/还原酶家族。

外源多氨基芳香族化合物对高温强光下芦苇离体叶绿体叶绿素降解的缓解作用

以甘肃省河西走廊临泽县境内荒漠地区2种生态型芦苇为主要研究材料,研究了在添加多氨基芳香族化合物(Mr856,PAAC)条件下,不同温度、光照强度处理及处理时间对沙芦和水芦离体叶绿体叶绿素相对含量的影响,以探究PAAC对高温强光条件下离体叶绿体可能的保护机理。结果表明:(1)外源PAAC对水芦和沙芦离体叶绿体叶绿素相对含量的影响因环境光照强度、温度和处理时间的不同而异;(2)光照强度对离体叶绿体叶绿素相对含量的影响与温度有关,且随着处理时间的延长而增强,在光照水平为1 000μmol.m-2.s-1下,沙芦叶绿素相对含量在不同温度下均高于水芦;(3)外源PAAC可明显减缓高温强光胁迫下水芦叶绿素相对含量的降低趋势,尤其对强光胁迫下叶绿素相对含量降低的效应更明显。研究结果说明,PAAC可能作为沙芦叶片中具独特分子结构特征的相容性溶质,可减缓高温强光下离体叶绿体叶绿素的降解,对离体叶绿体有一定的保护作用。