麦鱼线粒体基因组序列测定与结构特征分析

通过PCR扩增和一代测序技术获得麦鱼(Rhinogobius sp.)线粒体基因组全序列,并对其序列结构进行了分析。结果表明:1)麦鱼线粒体基因组全长16511 bp,其碱基G+C的含量为47.7%,A+T的含量为52.3%,呈现AT偏好性;2)共含有蛋白质编码基因13个,rRNA基因2个,tRNA基因22个和D-loop区,除ND 6、tRNA-Gln、tRNA-Tyr、tRNA-Ala、tRNA-Asn、tRNA-Cys、tRNA-Ser、tRNA-Glu、tRNA-Pro基因在L链上编码之外,其他基因均在H链上进行编码;3)基于线粒体基因组全序列和Cytb基因,分别构建了鰕虎鱼类中部分属的进化树,其表明麦鱼与波氏吻鰕虎鱼、褐吻鰕虎鱼、子陵吻鰕虎鱼聚在一个分支上,均属于吻鰕虎鱼属,并且其与波氏吻鰕虎鱼的亲缘关系最近。

线粒体调控在玉米赤霉烯酮与脱氧雪腐镰刀菌烯醇联合染毒诱导仔猪睾丸支持细胞内质网途径凋亡中的作用

本试验旨在研究线粒体在玉米赤霉烯酮(ZEA)与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)联合染毒诱导仔猪睾丸支持细胞(SCs)内质网途径凋亡中的调控作用机制。将对数生长期仔猪SCs分为对照、ZEA+DON、线粒体分裂抑制因子-1(Mdivi-1)和ZEA+DON+Mdivi-14个处理,处理24 h后,采用荧光显微镜观察细胞存活率,采用透射电镜检测细胞超微结构、线粒体及内质网形态变化,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞内质网途径凋亡相关基因蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、活化转录因子4(ATF4)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和真核生物翻译起始因子2α(eIF2α)mRNA相对表达量,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测内质网途径凋亡相关蛋白PERK、ATP4、CHOP和eIF2α蛋白相对表达量。结果表明:1)与ZEA+DON处理相比,添加Mdivi-1可极显著提高细胞存活率(P<0.01),缓解细胞、线粒体及内质网结构损伤。2)与对照处理相比,Mdivi-1处理细胞凋亡率无显著差异(P>0.05),而ZEA+DON处理和ZEA+DON+Mdivi-1处理细胞凋亡率极显著提高(P<0.01);但与ZEA+DON处理相比,ZEA+DON+Mdivi-1处理细胞凋亡率极显著降低(P<0.01)。3)与对照处理相比,ZEA+DON处理和ZEA+DON+Mdivi-1处理PERK、ATF4、CHOP及eIF2αmRNA相对表达量和蛋白相对表达量极显著提高(P<0.01);但与ZEA+DON处理相比,ZEA+DON+Mdivi-1处理PERK、ATF4、CHOP、eIF2αmRNA相对表达量和蛋白相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。由此可知,线粒体通过内质网途径在ZEA与DON联合染毒仔猪SCs凋亡中发挥重要作用,干预该过程可为霉菌毒素的生殖毒性危害解除提供新思路。

复方中草药制剂对天府麻鸭生长、免疫及肠道微生物区系的影响

为了研究复方中药制剂对天府麻鸭的生长性能、免疫机能、抗氧化能力和肠道微生物区系的影响,选取120只1日龄天府麻鸭随机分成4组,每组5个重复,每个重复6只,预饲7 d。试验Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮,在对照组基础上分别加入0.5%(Ⅱ组)、1%(Ⅲ组)和1.5%(Ⅳ组)的复方中药制剂,试验期20 d。各试验组分别于0、10和20 d取样,分别测定天府麻鸭的生长性能、免疫性能力、血清氧化与抗氧化指数及其肠道菌群的变化。结果表明,与对照组相比,Ⅲ、Ⅳ组的平均体增重和平均日增重极显著增加(P<0.01),料重比极显著降低(P<0.01),各组间平均日采食量差异不显著(P>0.05);Ⅲ、Ⅳ组胸腺指数,Ⅳ组脾脏指数,Ⅲ组C3含量,Ⅱ组Ig A浓度和Ⅳ组IFN-γ浓度均有改善(P<0.05),Ⅳ组C3、C4含量,Ⅲ、Ⅳ组Ig A、Ig M含量,Ⅳ组Ig G含量和Ⅲ、Ⅳ组IL-4含量极显著增加(P<0.01);试验Ⅲ组SOD活性与Ⅳ组T-AOC活性均明显增加(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ组GSH-Px活性极显著升高(P<0.01),Ⅲ组MDA含量显著降低(P<0.05),Ⅳ组MDA含量极显著降低(P<0.01);Ⅱ组盲肠内细菌丰富度下降(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ组微生物多样性极显著降低(P<0.01),其中包括了变形菌门、厚壁菌门和放线菌门的相对丰度逐渐下降,拟杆菌门的相对丰度上升,拟杆菌属、丁醋丝膜菌属和巴恩斯氏菌属的相对丰度逐渐上升,另枝菌属和嗜胆菌属的相对丰度则逐渐减少。试验表明,复方中草药制剂能够促进天府麻鸭的生长,提高免疫机能和抗氧化性能,并改善肠道菌群结构。

赤链华游蛇形态和血液学参数及各型白细胞百分比的增龄变化

为阐明卵胎生的赤链华游蛇(Sinonatrix annularis)出生、第一次蜕皮和开口等关键生活史过程与血液学参数和免疫功能建立的关系,测定了出生后3、7—10(第一次蜕皮)、20、30、40和50 d其身体大小、脾脏湿重指数、血液学参数和各型白细胞的百分比的变化。结果表明:(1)赤链华游蛇的重长比3和7—10日龄组显著高于30、40和50日龄组(P<0.05),脾脏湿重指数7—10日龄组显著高于40和50日龄组(P<0.05)。(2)血红蛋白含量30日龄组最高,3日龄组最低(P<0.05)。(3)红细胞总数无组间差异(P>0.05),白细胞总数20日龄组与30日龄组接近,但显著高于其他日龄组(P<0.05)。(4)淋巴细胞的百分比和嗜碱性粒细胞的百分比占比居于前两位。淋巴细胞的百分比7—10日龄组最高,40和50日龄组最低(P<0.05),嗜碱性粒细胞的百分比40日龄组显著高于7—10和20日龄组(P<0.05);嗜中性粒细胞的百分比7—10和20日龄组显著高于50日龄组(P<0.05),嗜酸性粒细胞的百分比50日龄组与40日龄组接近,但显著高于其他日龄组(P<0.05),单核细胞的百分比50日龄组显著高于其他日龄组(P<0.05)。嗜中性粒细胞与淋巴细胞的比值未见组间差异(P>0.05)。赤链华游蛇在胚后发育早期已建立起较为完善的免疫系统,在首次蜕皮和开口摄食等关键生活史阶段,能通过调配身体和脾脏大小、血红蛋白含量、白细胞总数、各型白细胞的比例来满足特定阶段的营养和能量需求,这种发育可塑性有助于幼蛇的存活。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导IPEC-J2细胞焦亡的内质网应激通路机制

[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯(DON)诱导仔猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)焦亡的分子机制。[方法]以500 ng·mL^(-1)DON和1μmol·mL^(-1)4-苯基丁酸(4-PBA,内质网应激抑制剂)单一及联合染毒IPEC-J2细胞24 h。采用CCK-8测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞生长状况;透射电镜观察细胞超微结构;Western blot和RT-qPCR测内质网应激通路和细胞焦亡关键分子的基因相对表达水平和蛋白相对表达水平;流式细胞仪测定活性氧(ROS)含量。[结果]与对照组相比,DON组细胞缝隙变宽、细胞密度降低、超微结构被破坏,ROS、丙二醛(MDA)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)含量极显著升高(P<0.01),葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、内质网核信号转导蛋白1(IRE1)、转录激活因子6(ATF6)、诱导消皮素D(GSDMD)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)mRNA相对表达水平极显著升高(P<0.01),GRP78、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、ATF6、IRE1、GSDMD和Caspase-1蛋白相对表达水平极显著升高(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性极显著下降(P<0.01)。与DON组相比,DON和4-PBA联合处理组的细胞数量增多,细胞缝隙变小,细胞器形态正常,ROS、MDA、IL-1β、IL-18含量以及ATF6、Caspase-1的mRNA相对表达水平极显著下降(P<0.01),GSDMD、GRP78和IRE1的mRNA相对表达水平显著下降(P<0.05),GRP78、CHOP、ATF6、IRE1、GSDMD和Caspase-1的蛋白相对表达水平极显著降低(P<0.01),SOD、GSH-Px活性极显著上升(P<0.01)。[结论]DON可通过激活内质网应激通路诱导IPEC-J2细胞焦亡。

王锦蛇心的位置及其组织学参数和胶原纤维含量的增龄变化

为阐明王锦蛇(Elaphe carinata)心的位置、组织学参数和胶原纤维含量的发育可塑性,采用形态测量、苏木精-伊红染色和Masson染色方法,测定了1龄、2龄以及50日龄内王锦蛇个体身体大小和心位置,同时测定并分析了50日龄内个体心内膜、心肌层和心外膜的厚度,以及胶原纤维含量的增龄变化。王锦蛇的体重、体全长和体重与体全长的比值都在2龄组最高,1龄组其次,2和1龄组均显著高于50日龄内各组(P<0.05)。肥满度3日龄组和7~10日龄组都显著高于1和2龄组(P<0.05)。心与吻端的距离,1和2龄组都显著高于其他日龄组(P<0.05),但心与吻端的距离与体全长的比值未见组间差异(P>0.05)。心肌层厚度50日龄组显著高于3日龄组、20日龄组和30日龄组(P<0.05),心外膜和心内膜厚度未见日龄差异(P>0.05)。心肌层和心壁胶原纤维含量50日龄组都显著高于3日龄组和20日龄组(P<0.05)。王锦蛇心与吻端的距离与体全长的比值随发育进程无明显变化,在首次蜕皮和主动摄食后,心肌层厚度增厚、胶原纤维含量增多,提示心肌功能逐渐增强。