锰过氧化物酶的耦合固定化及其性质研究

分别采用海藻酸钠、明胶和壳聚糖为载体，并以戊二醛为交联剂，通过包埋-交联和吸附-交联两种耦合固定化方法制备固定化锰过氧化物酶。探讨了酶的不同固定化条件和固定化酶的部分性能。与游离酶相比，制备的3种固定化酶最适反应pH分别由7．0降低到5．0、5．0和3．0，最适反应温度分别由35℃升高到75℃、55℃和75℃。3种固定化酶的耐热性都显著提高，其中用壳聚糖制成的固定化酶在pH2．2～11的宽范围内表现出很好的酸碱耐受性。30℃连续测定6～9次酶活力，重复使用的3种固定化酶显示出良好的稳定性。将固定化酶应用在偶氮染料的脱色中，用明胶制成的固定化酶在静置和摇床条件下，以及用海藻酸钠制成的固定化酶在摇床条件下，均表现出与游离酶相近的脱色能力，并且在重复进行的摇床实验中，脱色能力未降低，反应前后的酶活力均没有损失。