抗奶牛乳房炎主要病原菌的乳酸菌细菌素理化特性研究

该研究旨在对一株产抗奶牛乳房炎主要病原菌抗菌活性物质的菌株LQY-4进行菌种鉴定,并对其所分泌抗菌活性物质的生物学特性进行初步研究,为治疗奶牛乳房炎研发新型替抗产品奠定良好基础。采用形态学、生化试验以及16S rRNA基因序列测定等方法对菌株进行鉴定。以大肠杆菌为指示菌,采用琼脂扩散法确定其发酵上清液的抗菌活性,并对抗菌物质进行蛋白酶敏感性试验、热处理以及酸碱处理试验确定其抗菌活性物质生物学特性,最后进行抑菌谱的测定。结果表明:所分离菌株LQY-4为植物乳杆菌,其发酵上清液对奶牛乳房炎主要病原菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓隐秘杆菌)具有良好抗菌活性,且对蛋白酶具有高度敏感性,推测其初提物中具有抗菌活性的物质为一种细菌素。研究结果说明植物乳杆菌LQY-4所产细菌素具有较好的热稳定性及酸稳定性,在代替抗生素治疗奶牛乳房炎方面具有良好的应用前景。

抗奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌-细菌素的筛选及特性研究

奶牛乳房炎时常危害奶牛群,给奶牛养殖业造成严重的经济损失。在所有细菌性乳房炎中,金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎占比极高。本研究以金黄色葡萄球菌为指示菌,采用琼脂扩散法进行抑菌试验,从内蒙古手工奶酪中筛选到一株产细菌素的乳酸菌作为研究对象。根据形态特征,结合16S rRNA序列结果分析,鉴定菌株为Lacticaseibacillus saniviri,命名为LS-1。通过酶稳定性试验、酸碱稳定性试验、热稳定性试验,确定菌株LS-1的细菌素生物学特性。LS-1细菌素对木瓜蛋白酶、胃蛋白酶较敏感,经100℃水浴处理具有良好抑菌活性。LS-1细菌素经p H处理,p H为11.0时抑菌活性丧失。本研究所筛选的LS-1,丰富了产细菌素的菌种资源,其所产细菌素具有作为治疗奶牛乳房炎替抗产品的潜力。

产细菌素乳酸菌LS-1的全基因组测序分析

前期研究从内蒙古手工奶酪中筛选出1株可拮抗金黄色葡萄球菌的乳酸菌Lacticaseibacillus saniviri(LS-1)。为探究LS-1的全基因组信息,挖掘其潜在细菌素编码基因簇,本试验对LS-1进行全基因组测序,对编码基因进行预测,并采用非冗余蛋白质(Nr)和基因本体(GO)数据库进行功能注释;利用BAGEL4数据库预测分析细菌素合成基因簇。结果显示,LS-1的基因组大小为2356714 bp,GC含量为47.87%。共预测到2316个编码基因,其编码基因总长度为2058534 bp,平均长度为888 bp。LS-1所分泌细菌素属于Ⅲ类细菌素中的Enterolysin A(EnlA),推测EnlA可能通过裂解细胞壁来实现抑菌作用。本试验通过全基因组测序对LS-1基因组进行全面分析,从基因水平阐明其细菌素编码基因簇,进一步明确了菌株LS-1所产细菌素具有作为新型替抗产品的潜力。

产细菌素粪肠球菌EF-3的分离鉴定及其细菌素理化特性

为有效治疗临床上由金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎,本试验从平菇中分离出1株产抗菌物质的菌株,对抗菌物质进行初步确证后,通过16S rRNA基因测序方法对分离菌株进行鉴定,并采用琼脂扩散法对该菌株所产抗菌活性物质的理化特性和抑菌谱进行测定。结果显示,经分析抗菌物质为一种细菌素;经鉴定该产细菌素菌株为粪肠球菌,命名为EF-3;EF-3所产细菌素可被蛋白酶K和胰蛋白酶水解,具有一定热稳定性,在pH=4.0~6.0的条件下抗菌活性较强,且对奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌具有良好抗菌活性。因此,本试验分离获得的产细菌素粪肠球菌EF-3有望作为一种替抗产品用于治疗金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎。

抗多杀性巴氏杆菌植物乳杆菌细菌素的生物学特性研究

目的 针对多杀性巴氏杆菌耐药性不断增强的情况,寻找替抗产品。方法 使用MRS培养基分离酸菜中的乳酸菌菌株,采用16S rRNA基因测序鉴定分离菌株。对分离菌株进行发酵培养,研究其无菌发酵上清液对酶的敏感性、热稳定性、酸碱稳定性和其抑菌谱。结果 分离得到了1株优势乳酸菌YWH-4,经过16S rRNA基因测序鉴定该菌株为植物乳杆菌。植物乳杆菌YWH-4发酵上清液对胃蛋白酶具有高敏感性,推测其发酵上清液中具有抗菌活性物质细菌素。该细菌素具有良好的热稳定性,经100℃处理2 h后仍有较强抑菌活性;具有酸碱稳定性,在pH值3.0~5.0之间保持良好抑菌活性。结论 植物乳杆菌YWH-4所产细菌素对多杀性巴氏杆菌具有良好的抗菌活性。