肺、肾组织透明化及其深度成像的探索

传统获取生物组织样本内部信息都需要借助机械切片来实现,耗时耗力且容易造成样品损坏丢失信息.组织透明化技术和显微成像技术的发展实现了无需机械切片就可以观察到组织乃至整个生命体内部结构.利用CUBIC(clear,unobstructed brain imaging cocktails and computational analysis)方法实现了小鼠肺和肾组织透明化,并比较了其在Olympus转盘共聚焦显微镜和Luxendo光片显微镜的成像效果,为肺和肾组织样品透明化条件和成像设备选择及使用提供了参考.此外,结合水凝胶型膨胀试剂对较为质密的肾组织膨胀透明化进行了探索,为透明化组织的高分辨成像提供了参考.

高压冷冻及冷冻替代技术在不同生物样品超微结构中的应用

高压冷冻仪在固定样品时,高压和冷冻基本是同步发生的,使得生物样品在数毫秒的时间内被瞬时固定,保证其内部结构接近于生理状态,有效减少了化学固定法中的化学试剂对细胞结构的破坏,极大程度保存了细胞在近似自然状态下的超微结构。本文分别采用化学固定法(CF)和高压冷冻固定法(HPF)对小鼠的睾丸组织、Hela细胞和酵母进行了样品制备,旨在比较这两种方法对不同生物样品超微结构的影响,促进高压冷冻-冷冻替代(HPF-FS)技术在生物学中的应用。透射电镜(TEM)观察结果显示:与传统的化学固定相比,高压冷冻固定可以清晰、完整地保存生物样品的膜结构和亚细胞器结构,细胞形态更加接近自然。