TCT查验子宫颈涂片中HPV感染的研究

目的评价液基薄层细胞检测技术(TCT)检测宫颈涂片中人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染的敏感性与准确性。方法对1030例外阴尖锐湿疣患者的子宫颈涂片,采用TCT检测技术进行细胞病理学诊断,其诊断标准依据The Bethesda System(TBS)分类法。同期行阴道镜指引下的子宫颈活组织检查和聚合酶链反应(PCR)技术检测宫颈拭子中的HPVDNA。结果应用PCR检测1030例宫颈拭子HPVDNA,阳性者37例(35.92%)。宫颈活组织学检查结果为ASCUS57例(5.53%);上皮内病变CIN11例,占总数的1%;占HPV(+)百分率为29.73;占57例为非典型麟状细胞阳性的19.3。结论TCT作为一种细胞病理学检测技术,用于诊断宫颈HPV感染或亚临床感染,有临床应用价值。

三种大肠杆菌高效感受态的制备及转化

描述了一种改良的高效细菌感受态的制备和感受态细胞的保藏及细菌的转化方法.三种不同的大肠杆菌分别是DH5α,TG1和XL1blue,其中最有效的是XL1blue.每种菌株的感受态细胞制备的最佳光密度(OD600值)不同.对感受态细胞的存储时间及其与转化效率之间的关系也进行了研究,结果显示感受态细胞可以在-20℃存储7d,在-70℃存储15d.将常见的方法做了三种改进:首先是将CaCl2溶液改为TB溶液;其次是将培养基由LB换成S.O.C;再就是在质粒对感受态细胞的转化过程中加入DMSO或PEG8000.改良的细菌转化系统比常见的方法能提高转化效率约1000倍,是一种高效的细菌转化系统.

六倍体大小麦tritordeum花药组织特异性启动子的鉴定与分离

启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要元件。一个无启动子的带有UidA基因的质粒pPLGUS通过基因枪转化进tritordeum材料中,对转基因材料的多种不同组织进行了X-gluc显色来检测不同组织中的GUS活性,有一个株系的花药组织特异性启动子已被证明成功捕获,并通过PCR方法将其分离。提取叶片的总DNA作模板,上游使用水稻花药启动子分离的引物P1,以UidA基因的部分序列为下游引物P2,PCR扩增UidA基因的上游旁侧序列。已经获得一条长667 bp的目的片断,含有部分UidA基因的序列和一段UidA基因的上游旁侧序列,该序列中具有植物启动子的一些必备元件,初步断定它是一段花药组织特异性启动子序列。

酶标探针在转基因植物检测中的应用

采用碱性磷酸酶标记DNA制备分子探针,并首次在植物中应用。酶在苯醌作用下与单链DNA联结,形成DNA和酶的共价复合物即酶标探针。此探针通过分子杂交与待测DNA结合,再与酶的底物作用显色,3～6h内可观察结果。用此探针检测转基因植物中的UidA基因,点杂交和Southern杂交结果表明,所合成的酶标探针具有快速、准确、安全而经济的优点。点杂交证明外源UidA基因被成功转化到受体植物中,Southern杂交对转基因的材料检测的结果证明,该材料包含多个外源UidA基因拷贝,初步确定其外源UidA基因拷贝数在5个以上。

RNA干扰技术(RNAi)在医学上的应用研究

RNA干涉是指短的dsRNA可以降解内源的同源RNA,而使相应基因沉默的现象,简称RNAi。RNAi的研究有着非常重要的意义,它可能被应用在功能基因组研究、作物的品种改良、基因治疗及其他的很多领域里。RNAi,作为一种调控特定基因表达的手段,被称为基因组的免疫现象,已成为当前生物医学领域的研究热点之一。本文就RNAi技术在生物医学领域的研究情况作一个简要综述。

染色体数目异常儿顶臀长的早期发育研究

对染色体数目异常的胎儿，主要是常染色体三体型，在怀孕第７０９１天，通过Ｂ超作顶臀长（座高）的测量，研究胎儿的早期发育情况。对９６例异常儿与４００例正常胎儿对比研究，发现１８三体型胎儿顶臀长明显减小，结合其它指标可作为临床诊断参考，而１３三体型和２１三体型减小不明显，临床意义不大。

大学全英文教授《动物学》探索

为配合教学改革的需要 ,首次在本科生中试行《动物学》全英文教学。针对一年级学生的英语水平和特点 ,结合《动物学》课程的特性 ,在课堂教学中合理运用多媒体技术 ,调动学生学习积极性 ,激发学生兴趣 。

皮纹遗传的定量研究

通过对湖北医科大学学生的皮纹统计分析,与国内外有关资料进行比较研究,引入数学中的定量方法,在计算机上进行各类相关分析线性回归分析,根据数学分析的结果推断指纹的遗传规律,我们认为,指纹类型和嵴纹数都是可遗传的,但不同人种,不同个体之间。甚至同一个体不同手指之间存在着明显差异,因此皮纹的遗传不是单基因控制的,而是一种多基因遗传。

前列腺癌的分子生物学研究进展

前列腺癌是男性中的发病率最高的癌症,死亡率仅次于肺癌居第2位,严重影响男性的生殖健康。前列腺特异性抗原(PSA)是一种常见的前列腺癌筛查指标。近来研究表明前列腺癌的发生可能与钙离子有关,TRPM8是Ca2+离子通道家族的一员,是一种在前列腺癌和其他癌细胞中的调节蛋白,在前列腺癌细胞中的表达较正常的前列腺上皮细胞高。虽然前列腺癌患者血清中PSA含量明显升高,但处于灰色区域(4～10ng/ml)的患者,TRPM8是一种潜在的早期诊断指标,也将是药物或基因治疗的潜在靶标。

肺肿瘤形成中的癌基因和抗癌基因

人类肿瘤的形成与很多因素有关，随着科学技术的发展和实验手段的提高，人们对肿瘤病因的认识逐渐深入，目前已达分子水平。分子遗传学的研究显示，肿瘤的形成是一个多步骤的过程，经历了支气管粘膜上皮增生、过度增生、鳞状化增生、不典型增生、原位癌、早期浸润癌、浸润癌等阶段。在这些阶段中，发生了一系列遗传学改变，包括细胞水平的染色体片段的缺失和重排，分子水平的基因突变和表达的改变，这些遗传学改变常引起原癌基因的激活和抑癌基因的失活，最终导致肺癌的发生。国内外很多研究表明，肺癌形成中有其特异性的染色体变异和癌基因及抑癌基因的突变。如肺癌中常见１３ｑ和１７ｐ缺失，这两个区域又恰好是抑癌基因Ｒｂ的ｐ５３的定位区。肺癌中还有３ｐ、５ｑ、１３ｑ、１０ｑ、４ｑ等染色体畸变。与之相关的癌基因目前发现的有ｒａｓ、ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－１、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｃ－ｍｙｂ、ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｒａｆ－１等。抑癌基因主要有ｐ５３、Ｒｂ、ｎｍ２３、ＡＰＨ、ＭＣＣ、ＡＰＣ等。最近又发现两种与肿瘤浸润转移有关的基因Ｔｉａｍ－１和ＫＡＩ－１，还有位于９ｑ２１上的一种抑癌基因ｐ１６。

染色体脆性位点的研究进展

1965年,Dekaban首次报道了人类染色体上的第一个脆性位点,但脆性位点一词(fragile site)直到1970年才提出,如今已有114种脆性位点被发现。在这些研究中,有两个重大发现起了促进作用,第一是在人类的X染色体上发现了一个脆性位点q27.3,它和X连锁的智力低下有关;第二是摸清了制备染色体标本过程中培养细胞的特殊条件,经过各种处理能得到不同的脆性位点。80年代,有大量的关于脆性位点的文章出现,绝大多数是关于人类染色体的。但目前只对一个脆性位点的分子本质有所认识。

多重PCR法快速鉴定转基因小麦植株及后代

根据转基因植物中常用的报告基因uidA、选择基因bar的序列 ,设计合成两对不同的引物 ,建立了在转基因小麦材料分子确证中 ,应用一次PCR反应同时扩增检测两种或多种外源基因的多重PCR方法 .通过对质粒 pAHC2 5以及 30个转基因小麦样品进行PCR扩增分析 ,比较多重PCR的检测结果与单基因的PCR扩增结果 。

转基因tritordeum的遗传分析

从一批使用无启动子uidA转化策略转化的tritordeum中,分离出标定有花药组织特异性启动子的单株并考察其外源基因的遗传稳定性,为即将开展的启动子分离工作奠定基础;对转基因材料不同生长时期的不同组织进行Gus组织化学检测,分析Gus表达的特异性,应用RT-PCR从转录水平进一步确证启动子的特异性;所筛选出的植株中,Gus的表达特异性和T0代的表现完全一样,只有花药原基和花粉粒,整合位点在各代之间传递的频率较低,明显不符合显性:隐性(3∶1)规律,但Gus的表达特异性在各代之间传递时有着极强的稳定性;成功地分离出了被标定有花药组织特异性启动子的tritordeum,对其遗传特性作了进一步的分析.

tritordeum花粉特异性表达的遗传分析

为明确转基因tritordeum中被外源uidA基因标记的启动子的调控特异性,对筛选到的一株标记材料进行了两代uidA基因的遗传表达分析,结果表明,后代材料基因组中都含有uidA基因,没有发生分离,且都只在花粉中检测到GUS活性,在其他组织没有检测到GUS活性.进一步RT-PCR分析显示uidA基因在根和叶中没有发生转录,说明该株材料为花粉特异性启动子被uidA基因标记的阳性纯合体,实验证明该特异性能稳定遗传.

水稻花粉组织特异性启动子捕获实验

组织特异性启动子是细胞分化、基因特异性表达、基因工程研究及实际应用中的重要工具。一个由带有UidA基因而无启动子的pPLGUS改造成的质粒通过基因枪转化进水稻材料中,对转基因材料的多种不同组织进行了X-gluc显色检测GUS活性。对获得的15个独立转化株后代进行筛选,初步观察到其中多株GUS阳性。通过连续三代遗传分析,证明至少3株水稻花粉组织特异性启动子被成功捕获,为进一步研究应用奠定了基础。

小麦TaPSG719基因启动子的分离及序列分析

TaPSG719基因是从小麦中分离的花粉特异性表达基因,其功能未知。克隆和分析该基因的启动子有助于研究该基因的功能,解析小麦花器官的发育调控机制。本研究根据已报道的TaPSG719基因cDNA序列为基础设计引物,经过两次反向PCR获得了该基因起始密码子上游1776bp的调控序列。应用PLACE和PlantCARE数据库系统对该序列进行分析研究,发现其具有启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box、两种花粉特异性调控元件AGAAA和GTGA及光反应和激素响应元件。

核糖核酸干扰技术研究进展

核糖核酸干扰技术(RNAi)是遗传工程领域近几年来取得的重大技术进展之一,其理论体系及技术规范已基本形成。RNAi是一种高效、特异性强的基因阻断技术,被誉为将在功能基因组学及遗传工程领域掀起一场真正的革命。介绍了RNAi的发现、发展历程,阐述了RNAi的作用机理及技术特点,探讨了小分子干扰RNA导入细胞的技术策略以及对RNAi进行深入研究的重大意义。

孕妇贫血对妊娠并发症及新生儿的影响调查

目的探讨孕妇贫血对妊娠并发症及新生儿的影响。方法对973例孕妇的贫血状况进行回顾性调查,采用病例对照研究方法分析。结果非正常孕周分娩、妊娠高血压综合征、产后出血、低出生体重儿、新生儿窒息的发生率,随着孕妇贫血程度加重,都呈上升的趋势(P<0.05);轻度贫血可增加非正常孕周分娩(OR=3.09)、新生儿窒息(OR=1.75)的发生率;中重度贫血显著增加非正常孕周分娩(OR=5.31)、妊娠高血压综合征(OR=3.10)、产后出血(OR=2.80)、低出生体重儿(OR=9.19)、新生儿窒息(OR=3.93)发生的危险性。结论孕期贫血,尤其是中重度贫血,对孕妇妊娠并发症及新生儿健康都存在着一定的影响。

325例遗传咨询者的核型及临床分析

检测325例遗传咨询者的染色体中发现异常核型31例,发生率为9.54％,男女性比为1.581:1。病例低下占29.03％,不育,性发育异常及原发闭经占41.94％,妊娠胎儿丢失及其死婴占29.03％。提示开展遗传咨询及产前诊断,可防止或降低染色体病患及平衡易位携带者的出生率,是进行计划生育及提高整个民族遗传素质的重要措施。