肿瘤转移与细胞粘附

肿瘤转移与细胞粘附涂立宇，查锡良（上海医科大学生化教研室，上海２０００３２）关键词肿瘤转移，细胞粘附分子，胞外基质细胞粘附分子（ＣＡＭ）是指由细胞合成组装于细胞膜或分泌至胞外基质（ＥＣＭ）可促进细胞粘附的一大类分子。它们所介导的细胞－细胞和细胞－基质...

佛波酯促进NIH3T3细胞的铺展和聚焦粘附激酶的酪氨酸磷酸化

100nmol/L佛波酯(12-O-tetradecanoylphobol-13-acetate,TPA)能明显促进NIH3T3细胞在纤连蛋白(Fn)上的铺展,该作用能分别被酪氨酸激酶(tyrosinekinase,TK)抑制剂4′,5,7-三羟基异黄酮(genistein)和蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)抑制剂calphostinC和神经鞘氨醇(sphingosine)所抑制.TPA作用于结合到Fn上的NIH3T3细胞,使其聚焦粘附激酶(focaladhe-sionkinase,FAK)的酪氨酸磷酸化程度较未处理细胞升高,于30min时达对照的204.0%,并存在浓度依赖性;该变化分别被上述抑制剂所拮抗;未经TPA处理的NIH3T3细胞和纤连蛋白结合诱导的FAK酪氨酸磷酸化亦分别被上述抑制剂所抑制.细胞松弛素D则无论TPA作用与否,都能完全阻断NIH3T3细胞的铺展和FAK的酪氨酸磷酸化.以上结果提示,TPA促进NIH3T3细胞在Fn上铺展的信号转导机制,与PKC的激活有关,进一步则可能通过影响FAK的酪氨酸磷酸化来实现,同时需要细胞骨架的参与;NIH3T3细胞和Fn结合并诱导FAK酪氨酸磷酸化的过程亦依赖于PKC和完整的细胞骨架.

佛波酯对NIH3T3细胞整合蛋白α_5亚基表达的影响

１００ｎｍｏｌ／Ｌ佛波酯（１２－Ｏ－ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｂｏｌ１３－ａｃｅｔａｔｅ，ＴＰＡ）作用于ＮＩＨ３Ｔ３细胞２４ｈ，流式细胞仪检测到细胞表面整合蛋白α５亚基含量增加５２．３％．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法测定结果亦表明整合蛋白α５亚基ｍＲＮＡ量增加，于２ｈ时达到高峰，为对照的４．１４倍．蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）的活性增加趋势与之基本一致．运用ＰＫＣ的抑制剂鞘氨醇（ｓｐｈｉｎｇｏ－ｓｉｎｅ）和酷氨酸激酶（ｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅ，ＴＫ）抑制剂４，５，７－三羟基异黄酮（ｇｅｎｅｓｔｅｉｎ）进一步研究，发现两者均可抑制佛波酯对整合蛋白α５亚基表达的上调作用．提示佛波酯对ＮＩＨ３Ｔ３细胞整合蛋白α５亚基表达的调控与ＰＫＣ和ＴＫ均有关．

黏着斑激酶对肝癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨降低黏着斑激酶 (FAK)的表达对FAK高表达的人肝癌细胞株SMMC 772 1恶性生物学行为影响。方法 用Western杂交法比较不同肝癌细胞株FAK含量的差别 ,构建FAK反义质粒 ,转染至FAK高表达的细胞株 ,研究其多种细胞生物学行为的变化。结果 SMMC 772 1FAK含量比正常人肝细胞L0 2明显增高 ,转染FAK反义质粒后 ,SMMC 772 1细胞生长受到抑制 ,软琼脂培养克隆形成率下降 ;细胞周期分析 ,S期细胞下降 15 % ;黏附能力下降 ;细胞表面整连蛋白含量不变。结论 在SMMC 772 1中存在FAK过表达 ,降低FAK表达能部分逆转该肝癌细胞株的恶性表型。