人脑胶质瘤组织全长cDNA文库的快速构建与鉴定

目的采用SMART(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)技术,快速构建高质量的人脑胶质瘤组织全长cDNA文库。方法提取多份人脑胶质瘤组织标本的总RNA,混合后处理得到纯化的mRNA,利用CDSⅢ/3'PCR引物(含SfiⅠB酶切位点)反转录,用SMARTⅣOligo(dT)(含SfiⅠA酶切位点)作为mRNA5'端延伸出去的模板,合成多出一段SMARTⅣOligo(dT)互补序列的cDNA第一链,进而以此序列为引物合成全长的双链cDNA。双链cDNA经SfiⅠ(A&B)酶切后克隆入经SfiⅠ酶切的λTriplEx2载体,再经噬菌体包装蛋白包装成为cDNA文库。结果获得2.4×106个重组子,重组率达100%,文库扩增后,滴度达4.5×109 pfu/ml,插入cDNA平均长度为1.2kb。结论成功构建高质量的人脑胶质瘤组织全长cDNA文库,为进一步筛选、克隆人脑胶质瘤抑癌基因及特异性表达基因奠定基础。

急性大量口服金属汞中毒1例

患者,女,37岁,因自服金属汞液500 ml 1小时于2010年11月22日23时就诊。患者与别人生气后,自服汞液500ml,1小时后送入我院急诊科。主要表现为腹痛,坠胀感。患者意识清楚,无头痛、头晕、恶心、呕吐、大小便失禁的症状,四肢活动良好。既往否认其他慢性病。系统查体：血压110/70mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）,脉搏94次/min,

特色性PBL教学模式在外科手术学基础教学中的应用

手术学基础是一门重要的医学桥梁课程,是医学基础理论向临床课程学习转变的重要学习过程。全面加强能力和素质培养是手术学基础教学改革的努力方向。长期以来,PBL（problem-based learning）模式教学已经成为医学教育改革的重要内容和研究课题,开展以问题为基础的教学得到了广泛的应用和发展并取得了良好的教学效果（[1]）。但就目前PBL教学模式开展和应用情况来看,对PBL教学的认识理解和改革方式等方面仍有很多不足。

TNF-α和TGF-β1在急性有机磷中毒中的临床意义

目的:探讨TNF-α和TGF-β1在急性有机磷农药中毒(AOPP)中的临床意义。方法:选取既往健康的急性中毒患者42例,分别于来院即刻抽静脉血,保存至采用放免分析法同批测定血清中TNF-α、TGF-β1含量,与20例健康献血者对照,比较不同病情患者血清中TNF-α、TGF-β1含量,不同预后患者血清中TNF-α、TGF-β1含量及TGF-β1/TNF-α比值。结果:急性药物中毒患者血清TNF-α、TGF-β1明显升高,随病情加重增加更明显,死亡组患者TGF-β1/TNF-α失衡患者比例高于存活组。结论:在AOPP时,机体同时存在促炎反应和抗炎反应,炎症介质和抗炎介质的过度释放及二者平衡失调是AOPP引发多器官功能障碍综合征(MODS)的重要发病机制之一。

PBL教学法在外科手术基本操作教学中的应用研究

目的:探讨PBL教学法在外科手术基本操作教学中的应用。方法:选取笔者所在学校2009级临床专业208名学生作为研究对象,随机将其均分两组:传统教学组(对照组)和PBL教学组(观察组)。观察并比较两组学生在教学前后的综合成绩,以及学生对两种教学方法的满意程度。结果:观察组的综合成绩明显较对照组高,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组的满意率高于对照组(P<0.05)。结论:PBL教学法用于外科手术基本操作教学中,能够激发学生的积极性和创造性,并提高其综合能力,值得推广。

ABCD^2评分预测短暂性脑缺血发作脑卒中风险的回顾分析

目的 回顾性探讨分析ABCD^2评分预测短暂性脑缺血发作（TIA）脑卒中的风险.方法 选择2003-06～2007-06我院门（急）诊和住院的TIA连续病例362例,于随访1个月末将TIA患者分为脑卒中组和非脑卒中组,分别分析TIA的类型、年龄、临床表现、持续时间、发作次数和相关病史与脑梗死的关系.结果 TIA的发病类型、年龄、临床表现、持续时间、血压、糖尿病、发作次数和脑卒中史均与脑梗死有关.颈内动脉和椎基底动脉两个系统梗死发生率比较差异有统计学意义（P＜0.01）;年龄≥60岁患者的脑卒中发生率显著大于年龄＜60岁者（P＜0.05）;单侧肢体无力患者与言语不清但无肢体无力和其他比较差异有统计学意义（P＜0.01）;TIA持续时间＞10 min患者发生脑卒中的概率与＜10 min患者比较差异有统计学意义（P＜0.01）;TIA发作次数1次、2～3次、＞3次三组之间脑卒中发生率比较差异有统计学意义（P＜0.01）;高血压、糖尿病、有脑卒中史的TIA患者脑卒中发生率显著增高（P＜0.01或P＜0.05）.按照ABCD2模型,分别在TIA后第2、7、30天评分6分以上的患者（高危组）发生脑卒中的风险与6分以下的患者（中危组和低危组）比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 在门（急）诊工作中可以根据ABCD^2评分系统对TIA患者进行早期病情评估,及时发现高危患者,为临床决策提供依据.

急性有机磷中毒患者TNF-α和IL-18的变化

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-18(IL-18)在急性有机磷中毒中的临床意义.方法:选取我院收治既往健康的急性中毒患者42例,来院即刻抽取肘静脉血保存至同批测定,与20例健康对照组一同采用放射免疫方法测定血清中TNF-α,IL-18含量,并对TNF-α,IL-18分别与其白细胞总数做相关性分析.结果:急性药物中毒患者血清中TNF-α,IL-18含量均较正常对照组显著升高(P<0.01),病情愈重,TNF-α,IL-8含量愈高;死亡组患者血清中TNF-α,IL-18含量明显高于存活组,具有统计学差异(P<0.01);中毒患者TNF-α与其白细胞总数呈显著正相关,IL-18与其白细胞总数呈显著正相关.结论:TNF-α,IL-18可能参与了急性有机磷中毒的病理过程,并可作为反映病情、评估预后的血清学参考指标.

尖吻蝮蛇小分子多肽对U251荷瘤鼠体内抑制实验研究

目的:研究尖吻蝮蛇小分子多肽对U251荷瘤鼠的体内抑制作用及瘤细胞增殖活性变化,并初步探讨其作用机制。方法:取生长状态良好的U251胶质瘤细胞悬液按1×106个细胞/50μl接种于荷瘤鼠腹腔皮下,待其成瘤后将肿瘤组织块接种于只实验鼠,造模成功的60只大鼠随机分为实验组、顺铂组及空白对照组,于治疗7d后计算瘤体变化,通过光镜、电镜等方法,观察小分子多肽对胶质瘤作用的形态学变化,并应用免疫组织化学方法,检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,观察瘤细胞增殖变化情况。结果:实验组蛇毒小分子多肽在30μg/kg剂量时对U251胶质瘤细胞有显著抑制作用,60μg/kg剂量抑瘤率可达53.37%。实验组肿瘤内PCNA阳性细胞数量较对照组显著下降。结论:蛇毒小分子多肽能够抑制体内U251胶质瘤细胞的生长;其作用机制可能与诱导脑胶质瘤细胞发生凋亡及抑制肿瘤细胞增殖有关。

溶瘤病毒的肿瘤免疫治疗研究进展

溶瘤病毒作为一种新的肿瘤治疗制剂,通过病毒对肿瘤细胞的杀伤作用和诱导全身性抗肿瘤免疫反应两种作用机制引发抗肿瘤免疫反应.其具体的分子机制尚不明确,但可能由病毒在肿瘤细胞中的复制增殖而诱导细胞死亡、与肿瘤细胞抗病毒元件的相互作用、促进内在自发的或适应性抗肿瘤免疫反应等多种作用因素参与.本文综述了溶瘤病毒作为抗肿瘤治疗剂的免疫治疗原理、基因编辑提高溶瘤病毒的治疗效力及其临床应用.

IRX1在肿瘤发生发展中的作用研究

易洛魁族同源盒(IRX)基因组成的含有转录因子家族的同源基因和蛋白在无脊椎动物和脊椎动物的胚胎组织中均有表达,它们参与动物各个器官的发育及生命活动的各个环节,是影响人和动物体生命活动的重要基因.其中IRX1基因属易洛魁家族同源盒基因,是一种与胚胎发育密切相关的基因,编码参与神经系统发育的具有转录因子组合活性的家族蛋白,并在多种肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用,可能是肿瘤形成的癌基因或者抑癌基因.本文概述了IRX的基因组结构及其在不同种属中的分型分类,并着重阐明了IRX1在肿瘤发生发展过程中的作用以及对后生动物发育过程的影响.

己糖激酶2在胶质瘤中的作用

胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,具有强复发性及侵袭性,治愈率极低且预后差.Warburg效应是恶性胶质瘤极为重要的生物学特征之一,而HK2是促进Warburg效应的关键酶,在多种肿瘤组织中高表达并能促使肿瘤发展,但其在恶性胶质瘤中的活性及功能却鲜有报道.本文将从胶质瘤的能量代谢改变介绍,综述糖酵解的限速酶——己糖激酶2在恶性胶质瘤中发挥的功能和可能作用机制,总结并展望其在胶质瘤诊断和治疗中的现状及应用前景.

心肺复苏术的临床教学方法探讨

目的探讨现场示范讲解的教学方法与多媒体演示的教学方法的效果比较。方法选择我院急诊专业2008级和2009级的学生100例,随机分为实验组和对照组,各50例,实验组采用现场示范讲解的教学方法,对照组采用多媒体演示的教学方法;2组学生的教学均由同一名教师担任,使用相同的教材。教学结束时,对2组学生进行相同试卷的理论知识和操作技能考核,考核项目、考核方法相同。考核标准根据学生设计的病案内容制订综合试题,包括名词解释、填空、选择、病案讨论,使学生在考核中增强分析能力。结果实验组50名学生的学习态度评分明显高于对照组,经统计学分析,有显著性差异（P〈0.01）。实验组50名学生在理论知识、操作技能的掌握程度上的评分明显高于对照组,经统计学分析,有显著性差异（P〈0.01）。结论采取现场示范讲解的教学方法,可以提高心肺复苏术的教学效果,进一步提高学生的实际操作能力和临床思维能力,值得推广和应用。

浅析任务教学法在手术学基础教学中的运用

随着手术学基础课程的普遍开设,任务教学法得到广泛的关注与应用。任务教学法被认为是代表未来教育方向的一种较成功的教学方法,它不仅能激发学生的学习兴趣,还能使学生比较牢固地掌握医学知识。本文针对如何在手术学基础教学中应用任务教学法及任务设计、实施过程中需注意的事项和其自身优点进行详细分析。

胶质瘤中分子标记物的应用进展

胶质瘤是一种常见的成人中枢神经系统肿瘤.恶性胶质细胞瘤的预后相对较差,是所有胶质瘤中最致命的.恶性胶质瘤患者确诊后的总生存期仅为12-14个月.随着个人用药精度的不断提高,肿瘤治疗方案逐渐依赖于患者的分子谱.恶性胶质瘤的治疗响应很大程度上依赖于肿瘤的分子特征.因此,对于每个患者遗传背景的认识将有助于选择最佳的治疗策略.在本文中介绍了一种基于最新发现的遗传特性的新型胶质瘤分子分型.对代表性的分子标记,如IDH1突变、1p19q共缺失、MGMT启动子甲基化以及EGFRv III扩增等进行说明.此外,还针对恶性胶质瘤组学研究的发展进行简要讨论.无创检测这一新的概念可以促进现有的诊断和治疗监控.利用生物标记物的使用分子分析确实会提高恶性胶质瘤患者的整体存活率和生活质量.

MicroRNA．218通过靶向多梳家族Bmil基因抑制胶质瘤的侵袭、迁移、增殖和肿瘤干细胞样细胞的自我更新

目的：探讨microRNA-218抑制胶质瘤侵袭、迁移、增殖和抑制肿瘤干细胞样细胞自我更新的分子机制．方法：在胶质瘤细胞中过表达miR-218，利用定量逆转录PCR（qRT-PCR）和免疫印迹法（Westernblotting）检测Bmil的表达水平，并利用创伤修复和体外迁移实验检测胶质瘤细胞的迁移和增殖能力；通过裸鼠移植瘤实验，检测体内过表达miR-218对胶质瘤生长的影响；利用生物信息学手段预测miR-218的直接靶标，并通过qRT—PCR、蛋白质印记技术、荧光素酶报告系统和免疫荧光实验对预测的靶标基因进行验证；以胶质瘤细胞球形成实验和极限稀释法验证miR-218对胶质瘤干细胞样细胞自我更新能力的影响；构建Broil干扰载体下调胶质瘤细胞中Bmil的表达，检测对胶质瘤迁移和增殖的影响；利用基因表达芯片分析胶质瘤细胞中miR-218对基因表达的影响．结果：Bmil是miR-218的一个直接靶标，miR-218通过下调Broil的表达来削弱胶质瘤细胞的迁移和增殖能力，并抑制胶质瘤干细胞样细胞的自我更新．另外，miR-218还参与调控一系列与胶质瘤细胞发育相关的基因．结论：作为一种肿瘤抑制因子，miR-218能阻止胶质瘤细胞的迁移、侵袭、增殖，并削弱其干细胞样特征．

美国军医大学医学研究生培养概况

目的:美国军医大学是美国军事医学人才培养基地,它通过完备的军事医学人才培养体系培养出不同领域的人才为美国联邦政府和军队的重要后勤力量.其下设的医学院培养各类军事医学人才,包括医学博士、生物医学与公共卫生领域硕士和博士,以及医学博士/研究型博士,共有22个硕士和博士学位.本文分别介绍了美国军医大学医学研究生22项硕士和博士学位的基本情况,着重阐述了各项硕博士项目的培养模式,旨在了解和探讨美国军事医学人才的培养方法,为军事医学人才培养的发展提供借鉴依据.

美国军医大学医学博士培养概况

美国军医大学是美国最重要的军事医学人才培养中心,位于马里兰州贝塞斯达军事基地,为美国联邦和军队培养优秀的军事医学人才.美国军医大学培养军事医学领域相关人才,而军队医生的培养是其使命中最重要的一部分.本文通过研究美国军医大学医学博士的培养模式,剖析其人才的培养方法、过程与课程设置,为了解美国培养军事医学博士提供途径,为我国军事医学人才的培养提供比较与借鉴.

肿瘤干细胞的分子机制和调控通路

恶性肿瘤是人类健康和生命最严重的威胁之一,肿瘤治疗仍然是今天人类面临的一个大问题.传统的肿瘤治疗方法包括手术、化疗、放疗等方法,但是很多肿瘤仍然会复发,无法做到根治,最根本的原因是肿瘤转移和复发的机制不清楚.近年来,肿瘤细胞表面标记、肿瘤细胞增殖和肿瘤发生能力的研究让人们提出肿瘤干细胞(CSC)的理论.肿瘤干细胞属于肿瘤细胞中一类具有无限自我更新能力和异质免疫缺陷动物致瘤能力的干细胞.肿瘤干细胞在肿瘤的发生、发展和转移过程中扮演重要角色.肿瘤干细胞理论的提出为肿瘤治疗提供了新思路.本文中,我们将总结肿瘤干细胞理论形成和发展的过程,讨论肿瘤干细胞的生成,表面标志物,自我更新和调控途径.这些肿瘤干细胞的理论机制可能为未来恶性肿瘤靶向治疗提供帮助.