糙皮侧耳原生质体制备与再生条件的研究

以糙皮侧耳为材料,研究酶的组成、酶解时间、酶解温度、菌龄和渗透压稳定剂对糙皮侧耳原生质体制备率和再生率的影响。结果表明:静置培养7 d的糙皮侧耳菌丝体,以0.6 mol/L甘露醇溶液为渗稳剂,2%溶壁酶+2%纤维素酶+1%蜗牛酶酶体系30℃酶解3 h,原生质体制备率为415万个/mL;培养9 d的菌丝体以0.6 mol/L硫酸镁溶液作为渗稳剂,2%溶壁酶+2%纤维素酶+2%蜗牛酶,28℃酶解4 h,原生质体最佳再生率为2.86%。

降解饲料中单宁方法的研究进展

单宁是植物次生代谢产物,为多元酚类化合物,存在于高粱等植物性饲料原料中。饲料中存在较高质量浓度的单宁具有抗营养作用,在动物消化道中能与蛋白质和酶类形成难溶复合物,降低饲料的消化率。

糙皮侧耳原生质体与酿酒酵母原生质体最佳融合条件的研究

以糙皮侧耳和酿酒酵母为材料,采用正交设计和双灭活标记方法研究融合时间、融合温度、p H、Ca2+浓度和聚乙二醇质量浓度对糙皮侧耳原生质体与酿酒酵母原生质体融合率的影响。结果表明:糙皮侧耳原生质体和酿酒酵母原生质体的最佳融合条件为质量浓度35%聚乙二醇(PEG 4 000)与0.06 mol/L Ca2+的混合溶液(p H11)作为促融剂,在30℃条件下融合20 min,融合率达到2.609‰。

糙皮侧耳与酿酒酵母原生质体电融合条件的研究

为构建兼取木质素降解能力强和生长速度快的新型菌株,以糙皮侧耳和酿酒酵母原生质体为亲本,采用双亲灭活标记方法,通过L16(45)正交试验研究交变电压、交变电场频率、脉冲场强、脉冲个数和脉冲间隔对两亲本电融合率的影响,利用拮抗试验和菌丝形态学比较方法对再生菌株进行筛选,RAPD分子标记方法对疑似融合株进行鉴定。结果表明:糙皮侧耳和酿酒酵母原生质体的最佳融合条件为交变电压30 V,交变电场频率1100 k Hz,脉冲场强6 k V/cm,脉冲次数4个,脉冲间隔10μs,融合率达到4.396×10-5。筛选出的3株疑似融合株均为亲本原生质体融合产物。