CRISPR/Cas9系统:构建非人灵长类动物疾病模型的新技术

动物疾病模型在研究人类疾病致病机理和药物筛选中起到了关键作用。非人灵长类动物由于与人类更为接近,在探究人类神经退行性疾病、神经精神疾病及人类认知功能、神经环路等方面具有巨大的优势可成为研究和药物筛选的重要疾病模型。然而,由于缺乏大动物的胚胎干细胞系,传统的基因打靶技术难于用来建立灵长类动物疾病模型。最近发展的基因编辑新技术CRISPR/Cas9系统在定向对基因进行修饰上展现出了巨大的潜力。本文将介绍CRISPR/Cas9技术的发展和应用,以及非灵长类动物作为神经退行性疾病模型的优势和意义。

准噶尔雅罗鱼ISSR-PCR反应体系的建立与优化及引物筛选

为研究准噶尔雅罗鱼的遗传多样性,对ISSR-PCR的反应条件进行了优化和适合引物的筛选,采用正交设计方法,选用L9(34)正交表,以准噶尔雅罗鱼的基因组DNA为模板,对影响PCR反应较大的4个因素:Taq酶、Mg2+、dNTPs、引物在3个水平上进行优化试验,得到准噶尔雅罗鱼最优ISSR-PCR反应体系:25μL反应体系中含有1×PCR buffer、0.5 UTaq酶、3.0 mmol/LMgC l2、250μmol/L dNTPs、0.75μmol/L引物、DNA模板30 ng。利用优化体系从32条引物中筛选得到13条适用引物,并确定了各引物最佳退火温度。

神经退行性疾病动物模型的建立与分析

神经退行性疾病是由神经元或其髓鞘的丧失所致,随着年龄老化而恶化,最终导致功能障碍,如肌肉萎缩性侧索硬化症（ALS）、亨廷顿舞蹈症（HD）和帕金森氏病（PD）等。