Genistein后处理通过激活eNOS保护缺血后海马CA1区神经元

目的研究Genistein后处理(GPC)对脑缺血再灌注后大鼠海马CA1区神经元的神经保护作用,及其对eNOS磷酸化水平的影响。方法建立大鼠4动脉结扎全脑缺血模型,实验动物随机分为假手术组、缺血再灌注(I/R)组、GPC组(尾静脉注射)、抑制剂L-NAME组(脑室注射)、溶剂对照组。采用Western blot法检测大鼠海马CA1区eNOS、p-eNOS的表达;NeuN染色和TUNEL法分别观察海马CA1区神经元的存活和凋亡样损伤。结果与I/R组相比,GPC后再灌注30 min和3 d p-eNOS水平显著升高(P<0.001),而eNOS蛋白表达在各个时间点没有明显变化。激光扫描共聚焦结果显示,GPC组与I/R组相比较,海马CA1区存活的神经元明显增加(213.0±21.0 vs 45.0±15.0,P<0.05),而凋亡样损伤的神经元显著减少(29.0±6.0 vs 192.0±31.0,P<0.05);NOS抑制剂L-NAME不但可显著减弱GPC诱导的神经保护作用(P<0.05),而且有效降低p-eNOS水平(1.149±0.218 vs 1.583±0.155,P<0.001)。结论 Genistein后处理可抑制大鼠海马CA1区神经元凋亡,其机制可能与p-eNOS表达上调有关。

亚健康及其预防

亚健康是处于健康(第一状态)和疾病(第二状态)之间的一种过渡状态,是从健康到疾病的一个量变到质变的准备阶段,世界卫生组织(WHO)称其为第三状态,国内常称之为亚健康状态.据中国国际亚健康学术成果研讨会公布的数据,目前中国人15%是健康者,15%是病人,而多达70%属于亚健康者.在当今社会出现如此高比例的亚健康人群,应引起人们的关注.……

浅谈提高病理学课堂教学质量

病理学是沟通基础医学与临床医学的一门"桥梁"学科,在医学课程中起着承前启后的重要作用,是学好临床课程的基石,其教学质量的好坏直接影响到学生临床课程的学习。在教学过程中,教师要采取多种教学方式,充分合理利用多媒体课件及病例教学,激发学生的学习兴趣,加深学生对病理知识的理解、掌握、巩固和运用,以提高教学效果。本文就如何提高病理学课堂教学质量这个问题进行初步探讨,旨在交流共勉,提高教学质量。

亚健康及其预防

亚健康是从健康到疾病的一个量变到质变的准备阶段,目前中国人多达70%属于亚健康者。探讨亚健康发生的原因及表现形式,从而积极预防亚健康,避免亚健康的危害,使患者从亚健康状态转变成健康状态。

Keap1-tat小肽降低缺血后大鼠海马CA1区神经元氧化应激损伤和空间学习记忆缺陷

目的:设计Keap1-tat小肽,并探讨其对全脑缺血后大鼠海马CA1区神经元的保护作用及空间学习记忆功能的影响。方法:制作大鼠四动脉结扎全脑缺血模型,随机分为假手术sham组、sham+Keap1-tat组、缺血再灌注组(ischemia/reperfusion,I/R)、Keap1-tat处理组和溶剂对照组(vehicle)。Keap1-tat处理组大鼠于缺血前30 min于侧脑室微量注射30、50、100μg Keap1-tat,溶剂对照组侧脑室注射等体积(5μL)0.9%(质量分数)Na Cl溶液(生理盐水),焦油紫染色观察海马CA1区神经元的损伤;4-羟基壬烯醛(4-hydroxy-2-noneal,4-HNE)、8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHd G)共聚焦技术观察海马CA1区神经元氧化应激损伤;Morris水迷宫观察大鼠的空间学习和记忆功能。结果:与sham组相比,vehicle和I/R组大鼠海马CA1区存活神经元数量显著减少,而Keap1-tat处理组可显著降低海马CA1区神经元损伤,且50μg剂量组存活的神经元最多;Keap1-tat处理组与vehicle组相比,4-HNE和8-OHd G阳性反应显著降低,且找到水下平台需要的时间显著减少,移走水下平台后,该组大鼠在原平台所在象限探索的时间较vehicle组显著延长。结论:Keap1-tat小肽可能通过降低缺血再灌注诱导的氧化应激而降低CA1区神经元损伤,并改善缺血后大鼠的学习记忆功能。

硫酸镁对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡及相关蛋白的表达的影响

探讨硫酸镁对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用。方法：将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组及硫酸镁干预组，采用线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型，观察硫酸镁对大鼠脑组织Bax、Bcl-2的表达情况及对凋亡细胞数的影响。结果：缺血再灌注组脑组织中Bcl-2的表达及凋亡细胞数明显高于干预组（P〈0．05）；Bax的表达低于干预组（P〈0．05）。结论：硫酸镁可能通过抑制细胞凋亡而起到脑保护作用。

低剂量木黄酮降低缺血后神经元损伤并改善学习记忆功能

目的探讨染料木黄酮(GEN)对全脑缺血(GCI)大鼠海马CA1区神经元的神经保护作用及其可能的机制。方法建立大鼠4动脉结扎全脑缺血模型,实验动物随机分为假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)、GEN处理组、ICI 182,780组和溶剂对照组。采用Fluoro-Jade B和神经元特异性核蛋白(NeuN)染色观察海马CA1区神经元存活情况,TUNEL技术观察海马CA1区神经元的凋亡。Morris水迷宫观察大鼠的空间学习和记忆功能。结果 GEN发挥神经保护作用的最佳剂量为1.0 mg/kg;与sham组相比,I/R组和溶剂对照组海马CA1区TUNEL阳性神经元数量显著增多(P<0.01),而1.0 mg/kg GEN可显著降低缺血后TUNEL阳性神经元数量(P<0.01);与I/R组相比,GEN能明显改善缺血后大鼠的空间学习和记忆能力。缺血前侧脑室给予ICI 182,780可显著降低GEN的神经保护作用(P<0.01)。结论低剂量(1.0mg/kg)GEN可显著降低缺血后大鼠海马CA1区神经元损伤,改善认知功能,其分子机制可能与雌激素受体活性密切相关。

基于混合式教学模式的病理学在线开放课程的建设与应用

利用云课堂智慧职教慕课学院平台,根据省级精品资源共享课程建设标准,以病理学课程为研究对象,结合混合式教学模式,开展病理学在线开放课程的建设及应用,实现资源共享,推动互联网技术与教育教学深度融合,推进教学信息化与教育教学改革,实现学习者个性化发展及多样化终身学习的需求,全面提高教育教学质量。

不同修复方法对免疫组化染色结果的影响

目的:探讨不同抗原修复方法对免疫组化染色结果的影响。方法:选取常用需要修复的抗体16种,对每种抗体采用多种修复方法,比较免疫组织化学染色结果。结果:16种抗体经修复后,均有较好的阳性表达,其中热修复的高压锅方法背景清晰,阳性颗粒明确,效果最好;微波法次之;胃酶及胰酶修复法结果稍差。结论:本文通过对临床几种常用抗体在不同抗原修复方法下的表达进行研究表明,抗原热修复法可替代酶消化法,热修复方法中以高压锅抗原修复法效果最好。

NSC23766改善大鼠脑缺血后认知功能缺陷

目的：探讨Rac1在大鼠海马CA1区缺血性神经元损伤中的作用.方法：健康成年雄性SD大鼠制作四动脉闭塞全脑缺血模型,实验动物随机分为Sham、缺血再灌组（ischemia/reperfusion,I/R）、溶剂对照（Vehicle）组（I/R＋生理盐水）、NSC23766组（I/R＋NSC23766）.采用激光共聚焦显微镜技术观察海马CA1区生存神经元.利用Morris水迷宫观察脑缺血再灌注后大鼠的空间学习记忆功能的变化情况.结果：与缺血再灌注组相比,Rac1抑制剂NSC23766组海马CA1区神经元生存数量增加;大鼠缺血后的空间学习记忆缺陷明显得到改善.结论：Rac1的激活可能是导致大鼠缺血再灌注后神经元损伤的重要因素,其抑制剂NSC23766可有效减轻这种损伤,为临床治疗缺血性脑中风提供理论依据.

的士宁与MK801共同作用改善大鼠脑缺血再灌注后学习记忆能力缺陷

①目的探讨NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂的士宁(strychnine)及其与MK801共同作用在大鼠海马CA1区缺血性神经元损伤中的作用。②方法健康成年雄性SD大鼠制作4动脉闭塞全脑缺血模型,实验动物随机分为Sham、溶剂对照(Vehicle)组(I/R+Sa-line)、MK801组(I/R+MK801)及strychnine和MK801共同作用组(I/R+Glycine+strychnine+MK801)。观察海马CA1区生存神经元。利用Morris水迷宫观察脑缺血再灌注后大鼠的空间学习记忆功能的变化情况。③结果与缺血再灌注组相比,strychnine和MK801共同作用组海马CA1区神经元生存数量明显增加;大鼠缺血后的空间学习记忆缺陷明显得到改善。④结论 NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂strychnine和MK801共同作用可有效减轻大鼠缺血再灌注后神经元损伤,为临床治疗缺血性脑中风提供理论依据。

丹毒中医证型和施治规律的临床研究

目的:探讨以清热解毒、凉血化瘀为原则结合辨证用药治疗丹毒的临床疗效。方法:选取120例丹毒病例,风热火炽型30例,肝经郁火型30例,湿热火盛型30例,毒热入营型30例,辨证分析,给予以清热解毒、凉血化瘀法为主的治疗原则,观察临床疗效、痊愈时间。结果:四型治疗后,总有效率为97.50%;平均痊愈时间为(15.5±5.30)d。结论:清热解毒、凉血化瘀的原则对治疗丹毒有一定疗效。

缺血后处理通过上调磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B阻断细胞色素C释放防护缺血性神经元损伤

目的通过观察脑缺血再灌注大鼠海马CA1区神经元内丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)及细胞色素C的表达及定位情况,探讨延迟性脑缺血后处理神经保护作用及其可能的分子机制。方法制作SPF级成年雄性SD大鼠(40只)四动脉结扎全脑缺血模型。实验动物随机分为假手术组,缺血再灌注组,后处理组,抑制剂组及溶剂对照组。采用焦油紫染色技术观察大鼠海马CA1区神经元存活情况;Western blotting法检测磷酸化Akt及细胞色素C的表达及定位。结果延迟性的脑缺血后处理能够促进缺血再灌注大鼠海马CA1区神经元生存;促进磷酸化Akt水平升高;阻止线粒体内细胞色素C向胞质释放;脑室注射LY294002后,细胞色素C的释放减少,抑制延迟性后处理的神经元保护作用。结论延迟性脑缺血后处理通过诱导胞质内Akt的磷酸化,抑制线粒体内细胞色素C释放到胞质,阻止全脑缺血再灌注后大鼠海马CA1区神经元损伤。

NMDA受体NR2A亚基在脑缺血后处理中的保护作用

①目的研究NMDA受体NR2A亚基在脑缺血后处理中的保护作用。②方法采用四动脉阻塞模型((four-vessel occlusion,4-VO)大鼠全脑缺血(global cerebral ischemia,GCI)模型,动物随机分为假手术组(sham),Sh+NVP-A组,缺血再灌注组(I/R),缺血后处理组(Postc,Postc+Veh),NR2A抑制剂组(Postc+NVP),溶剂对照组。采用Western blot法检测大鼠海马CA1区NR2A的表达,采用焦油紫染色观察大鼠海马CA1区神经元的存活情况。③结果焦油紫染色显示:与I/R组相比,Postc组再灌注5d海马CA1区存活的神经元显著增加(P<0.05),而NR2A抑制剂NVPAAM077可显著废除Postc的神经保护作用,海马CA1区存活的神经元显著减少(P<0.05)。与I/R组相同时间点相比,Postc组海马CA1区神经元细胞膜NR2A的蛋白表达于缺血后处理后的3h,6h,24h和72h显著增加,而NR2A抑制剂可显著抑制缺血后处理后24h NR2A的蛋白水平的升高(P<0.05)。④结论 NR2A亚基在脑缺血后处理中具有神经保护作用。

综合疗法治疗下肢丹毒临床观察

目的:观察以中药内服外敷,结合抗生素的综合疗法治疗丹毒的临床疗效。方法:观察近期收治的丹毒患者80例,予抗生素抗感染,口服加味凉血利湿汤,并配合草药外敷。治疗1月后评定疗效。结果:80例中临床治愈68例,占85.00%;有效12例,占15.00%;无效0例。总有效率100%。随访1年,复发3例,复发率3.75%。结论:采用中药内服外敷配合西药的综合疗法治疗下肢丹毒,既能使药物直达病所,又能治病求本,疗效显著,安全易行。

中药内外兼治下肢丹毒疗效观察

目的:观察中药内外兼治下肢丹毒的临床疗效。方法:60例丹毒患者均以加味清热解毒汤内服,并用新鲜草药捣烂外敷。观察临床疗效。结果:60例患者,显效49例,有效8例,无效3例,总有效率95.00%。结论:中药内治与外治相互配合治疗下肢丹毒,具有较好的疗效。

光生物调节促进慢性低灌注大鼠海马神经元再生改善认知功能及其抗炎症作用

目的探讨光生物调节(photobiomodulation,PBM)对脑慢性低灌注大鼠海马神经元再生及认知功能和炎症损伤的影响。方法将雌性SD大鼠去双侧卵巢,1周后随机分为假手术组(Sham)、BCCAO组、PBM干预组(BCCAO+PBM),每组8只。BCCAO组永久性结扎大鼠双侧颈总动脉(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)建立脑慢性低灌注模型,但不予光照;Sham组只钝性分离左、右侧颈总动脉,但不结扎,不予光照。BCCAO+PBM组在永久性结扎BCCAO的基础上,采用808 nm激光隔日照射大脑额叶皮层1个月,每次5 min,光剂量为20 mW/cm^(2)。造模完成后第86~90天行Morris水迷宫测试观察大鼠的空间学习记忆功能,第90天处死大鼠进行免疫荧光染色和Western blot分析。免疫荧光染色检测海马齿状回(dentate gyrus,DG)区细胞增殖标记物5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、新生神经元前体细胞的特异性标志蛋白DCX、成熟神经元标志蛋白NeuN以及小胶质细胞标志蛋白Iba1的表达情况。Western blot分析海马区Iba1,炎症小体组成NLRP3、ASC、cleaved caspase-1的蛋白水平。结果水迷宫潜伏实验中,与BCCAO组相比,PBM干预组大鼠找到水下平台的时长缩短;在探索实验中,移除平台后大鼠在原平台象限探索的时间增加(P<0.05)。与BCCAO组相比,PBM干预组GFAP、Iba1的免疫荧光强度减弱(P<0.01);与Sham组和BCCAO组相比,PBM干预组可增加海马DG区BrdU阳性细胞的数量(P<0.05);3组间NeuN阳性细胞数差异无统计学意义,而PBM干预组DCX阳性细胞数增加(P<0.001),且DCX~+/NeuN~+共定位的细胞数较BCCAO组增多(P<0.001)。Western blot结果显示,与BCCAO组相比,PBM干预组Iba1、NLRP3、cleaved caspase-1蛋白的表达量均降低(P<0.05),ASC蛋白的表达量差异无统计学意义。结论PBM能有效改善慢性低灌注大鼠的空间学习记忆功能,抑制胶质细胞的激活、降低NLRP3炎症小体介导的炎症损伤,促进大鼠海马DG区内源性神经干细胞的再生。