白黎芦醇对fMLP诱导中性白细胞与人脐静脉内皮细胞粘附的抑制作用及机制

目的研究白藜芦醇（resveratrol,Res）对趋化肽N-甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰苯丙氨酸（fMLP）诱导中性白细胞与人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）的粘附及HUVECs释放可溶性粘附分子的影响。方法观察不同浓度Res对fMLP（10μmol·L^-1）刺激HU-VECs与中性白细胞粘附的影响。以ELISA法测定可溶性细胞间粘附分子,血管细胞粘附分子和E-选择素。以Fura-3和海萤萤光素诱导剂为荧光指示剂分别测定中性白细胞内[Ca^2＋]i水平和O2^-·浓度。结果Res（1-50μmol·L^-1）明显抑制fMLP诱导的中性白细胞与HUVECs的粘附反应,同时,明显抑制fMLP诱导粘附分子的释放效应。Res抑制中性白细胞中O2^-·生成和[Ca^2＋]i升高,其中Res5μmol·L^-1和50μmol·L^-1与fMLP诱导组相比具有统计学意义（P〈0.01）。结论白藜芦醇通过影响中性白细胞内O2^-·生成和[Ca^2＋]i水平,抑制中性白细胞与内皮细胞的粘附以及细胞间粘附分子表达,在阻断炎性反应的发生与发展过程中发挥着重要作用。

黄连解毒汤对脑缺血动物的促智作用及机制探讨

目的 :研究黄连解毒汤对脑缺血动物的促智作用并初步探讨其作用机制。方法 :采用结扎小鼠双侧颈总动脉合并低血压法制造小鼠脑缺血模型 ,考察了黄连解毒汤对脑缺血小鼠学习记忆行为 (跳台实验、避暗实验 )的影响 ;测定了小鼠脑中丙二醛 (MDA)的含量 ;进一步地测定了大鼠大脑皮质和海马组织中脑血流量。结果 :在跳台、避暗实验中 ,黄连解毒汤能改善脑缺血小鼠学习记忆行为 ,能显著减少脑缺血小鼠脑中 MDA的含量。黄连解毒汤股静脉给药能增加大鼠大脑皮质和海马组织中脑血流量。结论 :黄连解毒汤能促进脑缺血动物学习记忆行为 ,其作用机制与减少脑中自由基终产物 MDA含量。

西洛他唑对磷脂多糖诱导的粘附及粘附分子释放的影响

目的 研究磷酸二酯酶 3型抑制剂西洛他唑对磷脂多糖 (LPS)诱导的粘附及血管内皮细胞 (ECs)释放可溶性细胞粘附分子 (sCAMs)的影响。方法 体外培养第 4～ 6代人脐静脉血管内皮细胞 (HUVECs) ,以LPS(5mg·L- 1)刺激 ,并与西洛他唑 (1～ 10 μmol·L- 1)共培养 2 4h ,观察西洛他唑对由LPS诱导的HUVECs与中性粒细胞之间的粘附的影响 ;另取培养上清 ,以ELISA法测定HUVECs释放可溶性血管细胞粘附分子 1(sVCAM 1)、细胞间粘附分子 1(sICAM 1)以及E 选择素 (sE selectin ,sELAM 1)。结果 西洛他唑抑制由LPS诱导的HUVECs与中性粒细胞之间的粘附以及HUVECs释放sVCAM 1,而对sICAM 1和sE 选择素无影响。并且 ,该药对于sVCAM 1的抑制作用被蛋白激酶A(PKA)抑制剂H 89所阻断。结论 西洛他唑对由细胞因子LPS诱导的粘附反应以及ECs释放sVCAM 1有抑制作用 。

磷酸二酯酶 3型抑制剂西洛他唑对TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞释放可溶性粘附分子的影响(英文)

目的 :研究新型磷酸二酯酶 3型抑制剂西洛他唑 (cilostazol)对TNF α诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放可溶性细胞粘附分子 (sCAMs)的影响 ,并探讨其作用机制。方法 :体外培养第 4～ 6代HUVECs,以TNF α (10 μg·L-1)刺激细胞 ,并与西洛他唑 (1～ 10 μmol·L-1)共培养 2 4h ,取培养上清 ,通过ELISA法测定可溶性血管细胞粘附分子 1(sV CAM 1)、细胞间粘附分子 1(sICAM 1)以及E 选择素(sELAM 1,sE selectin) ,并以四唑蓝 (MTT)法考察细胞生长状态。结果 :1～ 10 μmol·L-1的西洛他唑对TNF α诱导的HUVECs释放sICAM 1和sE selectin无明显影响 ,但显著抑制sVCAM 1的生成 ,并且该作用被一种非选择性一氧化氮合成酶 (NOS)抑制剂Lω NAME(0 .1μmol·L-1)所阻断。MTT法测定结果显示 ,西洛他唑作用于HUVECs 2 4h ,低浓度(1μmol·L-1)可显著改善细胞生长状态 ;高浓度(30 μmol·L-1)表现为抑制 ,而中浓度 (10 μmol·L-1)对细胞生长状态几乎无影响。结论 :西洛他唑显著抑制由TNF α诱导的HUVECs释放sVCAM 1,该作用可能与激活NOS并通过NO依赖性通路介导有关 ,提示该药可在一定程度上对抗由细胞因子所引起的部分粘附反应 。

新型PDE3抑制剂西洛他唑对fMLP诱导的HL-60细胞超氧自由基生成和钙离子浓度升高的影响

目的 研究新型磷酸二酯酶 (PDE) 3抑制剂西洛他唑(cilostazol)对中性粒细胞超氧自由基 (O·2 )和钙离子浓度([Ca2 + ]i)的影响。方法 体外培养急性早幼粒细胞白血病HL 6 0细胞 ,以 1 3%DMSO分化诱导为中性粒细胞样细胞后 ,采用特制新型仪器 ,同时实现化学发光法测定O·2 和荧光法测定 [Ca2 + ]i,观察西洛他唑对趋化肽N 甲酰 甲硫氨酰 亮氨酰苯丙氨酸 (fMLP)刺激引起的中性粒细胞样HL 6 0细胞O·2 生成和 [Ca2 + ]i 升高的影响以及二者变化的时相关系。结果 西洛他唑 (1～ 30 μmol·L-1)明显抑制由fMLP诱导的中性粒细胞O·2 生成和 [Ca2 + ]i 升高 ,其中 10和 30 μmol·L-1浓度的西洛他唑组与对照组相比差异有统计学意义 (P<0 0 1)。在时相关系上 ,fMLP诱导O·2 生成的达峰时间较之 [Ca2 + ]i 的变化略显滞后 ,而 10 μmol·L-1西洛他唑对fMLP诱导O·2 生成和 [Ca2 + ]i 升高的影响表现出一致性 ,几乎同步。结论 西洛他唑对fMLP 诱导的中性粒细胞样细胞内O·2 生成和 [Ca2 + ]i 具有同步的抑制作用 。