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miR-508-3p靶向AFF4/TGFβ1信号通路调控人牙髓细胞分化的机制研究
被引量:
1
1
作者
杨正涛
林方梁
温利梅
《广西医科大学学报》
CAS
2021年第9期1671-1677,共7页
目的:探讨miR-508-3p对缺氧牙髓细胞分化的影响及其机制。方法:用氯化钴(CoCl2)诱导缺氧模型,记为实验组。用等量生理盐水处理的牙髓细胞为对照组。脂质体法将miR-NC、miR-508-3p、si-NC、si-AFF4、miR-508-3p+pcDNA、miR-508-3p+pcDNA-...
目的:探讨miR-508-3p对缺氧牙髓细胞分化的影响及其机制。方法:用氯化钴(CoCl2)诱导缺氧模型,记为实验组。用等量生理盐水处理的牙髓细胞为对照组。脂质体法将miR-NC、miR-508-3p、si-NC、si-AFF4、miR-508-3p+pcDNA、miR-508-3p+pcDNA-AFF4转染缺氧牙髓细胞。RT-qPCR法检测miR-508-3p、AFF4的表达及分化相关基因牙本质基质蛋白(DMP1)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)的表达。Western blotting法检测细胞中AFF4、DMP1、DSPP、OCN、ALP、转化生长因子β1(TGFβ1)、Smad、骨形态发生蛋白(BMP)的表达。双荧光素酶报告实验检测miR-508-3p与AFF4的靶向关系。结果:与对照组相比,实验组牙髓细胞miR-508-3p表达显著升高,AFF4、DMP1、DSPP、OCN、ALP的表达均显著降低(均P<0.01)。过表达miR-508-3p可显著抑制DMP1、DSPP、OCN、ALP的表达,敲减AFF4具有相似的作用(均P<0.01)。双荧光素酶报告实验显示,miR-508-3p与AFF4存在互补的结合位点,且过表达AFF4逆转了过表达miR-508-3p对缺氧牙髓细胞的分化抑制作用(P<0.01)。上调miR-508-3p表达或下调AFF4表达能显著降低TGFβ1、Smad、BMP蛋白表达(P<0.01)。结论:miR-508-3p通过靶向AFF4抑制下游TGFβ1信号通路的活性发挥抑制缺氧牙髓细胞分化作用。
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关键词
牙髓细胞
成牙分化
miR-508-3p
AFF4
TGFβ1信号通路
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职称材料
题名
miR-508-3p靶向AFF4/TGFβ1信号通路调控人牙髓细胞分化的机制研究
被引量:
1
1
作者
杨正涛
林方梁
温利梅
机构
四川省自贡市第一人民医院
出处
《广西医科大学学报》
CAS
2021年第9期1671-1677,共7页
基金
四川省卫生和计划生育科研课题资助项目(No.18PJ024)。
文摘
目的:探讨miR-508-3p对缺氧牙髓细胞分化的影响及其机制。方法:用氯化钴(CoCl2)诱导缺氧模型,记为实验组。用等量生理盐水处理的牙髓细胞为对照组。脂质体法将miR-NC、miR-508-3p、si-NC、si-AFF4、miR-508-3p+pcDNA、miR-508-3p+pcDNA-AFF4转染缺氧牙髓细胞。RT-qPCR法检测miR-508-3p、AFF4的表达及分化相关基因牙本质基质蛋白(DMP1)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)的表达。Western blotting法检测细胞中AFF4、DMP1、DSPP、OCN、ALP、转化生长因子β1(TGFβ1)、Smad、骨形态发生蛋白(BMP)的表达。双荧光素酶报告实验检测miR-508-3p与AFF4的靶向关系。结果:与对照组相比,实验组牙髓细胞miR-508-3p表达显著升高,AFF4、DMP1、DSPP、OCN、ALP的表达均显著降低(均P<0.01)。过表达miR-508-3p可显著抑制DMP1、DSPP、OCN、ALP的表达,敲减AFF4具有相似的作用(均P<0.01)。双荧光素酶报告实验显示,miR-508-3p与AFF4存在互补的结合位点,且过表达AFF4逆转了过表达miR-508-3p对缺氧牙髓细胞的分化抑制作用(P<0.01)。上调miR-508-3p表达或下调AFF4表达能显著降低TGFβ1、Smad、BMP蛋白表达(P<0.01)。结论:miR-508-3p通过靶向AFF4抑制下游TGFβ1信号通路的活性发挥抑制缺氧牙髓细胞分化作用。
关键词
牙髓细胞
成牙分化
miR-508-3p
AFF4
TGFβ1信号通路
Keywords
dental pulp cells
differentiation into odontogenesis
miR-508-3p
AFF4
TGFβ1 signaling pathway
分类号
R78 [医药卫生—口腔医学]
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题名
作者
出处
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被引量
操作
1
miR-508-3p靶向AFF4/TGFβ1信号通路调控人牙髓细胞分化的机制研究
杨正涛
林方梁
温利梅
《广西医科大学学报》
CAS
2021
1
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