高效液相色谱-串联质谱法测定凉茶中8种非法添加药物

文章以临床常用、与感冒咳嗽适应症高度吻合的8种化学药物为研究对象,建立高效液相色谱-串联质谱同时测定多种非法添加化学药物的分析方法。样品经甲醇超声提取,以5 mmol/L甲酸铵溶液(含0.1%甲酸)–0.1%甲酸乙腈为流动相体系进行梯度洗脱,采用Agilent Poreshell EC-C18(100 mm×2.1 mm,2.7μm)色谱柱分离,外标法定量。8种目标化合物在线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9993,方法检出限为0.01~0.3 mg/kg,方法定量限为0.025~1 mg/kg,基质效应系数的绝对值均小于18%。各目标化合物的平均回收率为65.0%~105.7%,重复性相对标准偏差(n=6)范围为1.6%~10.6%,24 h内进样精密度相对标准偏差均小于6%。该方法简单快速,灵敏度高,准确性、重复性和稳定性良好,填补现行标准的技术空白,可满足实际检验工作的需要。

HPLC-MS/MS法同时测定龙胆泻肝丸中高毒成分马兜铃酸Ⅰ与鬼臼毒素

目的建立液相色谱-质谱联用法同时测定龙胆泻肝丸中高毒成分马兜铃酸Ⅰ与鬼臼毒素的研究方法,为龙胆泻肝丸的质量控制提供技术依据。方法采用Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm)分离,以0.1%甲酸溶液(含5 mmol·L^(-1)乙酸铵)-0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,柱温35℃,流速0.3 mL·min-1,进样量为5μL。在电喷雾离子源正离子模式下,采用多反应监测方式测定,外标法定量。结果马兜铃酸Ⅰ与鬼臼毒素线性关系良好,线性范围分别为9.5~94.9 ng·mL^(-1)、10.0~99.7 ng·mL^(-1),r均大于0.9950。马兜铃酸Ⅰ与鬼臼毒素平均回收率大蜜丸分别为81.89%(RSD=8.55%)、84.34%(RSD=8.67%);小蜜丸分别为82.19%(RSD=7.63%)、96.05%(RSD=6.18%);浓缩丸分别为67.99%(RSD=6.70%)、94.98%(RSD=5.01%);水丸分别为75.98%(RSD=11.37%)、93.88%(RSD=6.01%)(n=18)。结论该方法操作简单,结果可行,可快速测定龙胆泻肝丸中高毒成分马兜铃酸Ⅰ与鬼臼毒素含量。

高效液相色谱-串联质谱法测定蜂胶及以其为原料的保健食品中的氯霉素

建立了同时适用于蜂胶及以其为原料的保健食品中氯霉素残留的检测方法。样品中的蜂胶经乙醇溶解,以4%(质量分数)乙酸铅溶液沉淀具有邻二酚羟基结构的黄酮类成分,在碱性条件下进一步去除不含此结构的黄酮类干扰物,并以甲基叔丁基醚为提取溶剂,有效减少样品中极性干扰物和保健食品辅料(如聚乙二醇、甘油等)的共提取。试样溶液经HPLC-MS/MS测定,内标法定量。线性范围为0. 20～50. 0μg/L,相关系数为0. 999 8;方法检出限为0. 03μg/kg,定量限为0. 1μg/kg;不同基质的回收率为86. 0%～114. 4%,相对标准偏差为0. 3%～4. 9%。该方法通用性强,操作简便,灵敏度高,抗干扰能力强,推广应用前景良好。

Captiva EMR固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中41种糖皮质激素的含量

提出了Captiva EMR固相萃取结合高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定化妆品中41种糖皮质激素含量的方法。样品经水分散后,用含1%(体积分数)甲酸的乙腈溶液提取目标化合物,以Captiva EMR固相萃取柱去除化妆品基质中的长链烃类化合物。在用HPLC分析时,采用Thermo Accoure PFP色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm)为固定相,含0.1%(体积分数,下同)乙酸的乙腈溶液-0.1%乙酸溶液的混合溶液作为流动相进行梯度洗脱;在MS/MS分析时,以电喷雾离子源正离子(ESI^(+))模式和多反应监测(MRM)模式进行检测,外标法定量。结果显示:在优化的试验条件下,目标化合物中较难分离的6组同分异构体均能得到有效分离,膏霜、乳液、洗面奶、凝胶、面膜的基质效应对大多数目标化合物的影响较弱;41种目标化合物标准曲线的线性范围均为1.5~100μg·L^(-1),相关系数为0.9934~1.000,检出限(3S/N)为0.015~0.05 mg·kg^(-1);以阴性膏霜、乳液、洗面奶、凝胶、面膜为基质进行加标回收试验,所得回收率为57.8%~121%,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.50%~15%。方法用于60批化妆品的分析,检出2批阳性样品,检出量分别为32.3 mg·kg^(-1)(氯倍他索丙酸酯)和1.8 mg·kg^(-1)(地塞米松)。

利用核-壳亚3微米填料色谱技术快速测定镇痛类健康产品中25种非法添加药物

采用核-壳亚3微米填料色谱柱建立了快速测定镇痛类健康产品中25种非法添加解热镇痛类药物及糖皮质激素类药物的高效液相色谱法。样品经甲醇超声提取,用Phenomenex Kinetex XB-C_(18)色谱柱(100mm×4.6mm,2.6μm)分离,流动相为乙腈-甲醇(2+1)溶液和0.2mol·L^(-1)乙酸铵溶液(pH 4.2),梯度洗脱。采用二极管阵列检测器,外标法定量。25种药物的线性范围为1.0~100mg·L^(-1),检出限(3S/N)为0.02~0.10g·kg^(-1)。加标回收率为90.6%~110%,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.42%~2.5%。方法用于分析66批镇痛类健康产品,发现24批阳性样品,检出8种药物成分。

改良QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定蜜丸中氯霉素和硝基咪唑类药物残留

基于QuEChERS技术,根据蜜丸制剂的基质特点优化了前处理工作流程,建立了一个适用于蜜丸制剂中罗硝唑、甲硝唑、替硝唑、二甲硝咪唑和氯霉素残留的测定方法。样品经水分散,用200 g·L^(-1) 醋酸铅溶液沉淀中药制剂中大量鞣质、木脂素类、皂苷等成分,5种目标化合物再以乙腈进行提取,所得提取液经萃取盐包(6.0 g无水硫酸镁、1.5 g氯化钠)处理分层,乙腈相采用900 mg 无水硫酸镁、300 mg N-丙基乙二胺、15 mg石墨化碳黑吸附剂组合去除蜜丸制剂中的糖类、多酚类、黄酮类等共提取物。试样溶液用Agilent Poreshell EC-C18(150mm×2.1mm,2.7μm)色谱柱分离,以水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子方式扫描,多反应监测模式进行检测,内标法定量。目标化合物在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9998,方法检出限为0.1~0.2 μg·kg^(-1) ,定量限为0.25~0.5 μg·kg^(-1) 。目标化合物的平均回收率为77.5%~116.0%,相对标准偏差范围( n =6)为3.1%~9.6%。该方法具有操作简便,通用性强,灵敏度高,推广应用前景良好的优点,可满足实际检验工作的需要。

降压类中成药及保健食品中21种非法添加化学药物的快速检测与确证方法研究

采用亚3μm色谱柱建立了降压类中成药及保健食品中21种非法添加化学药物的高效液相色谱快速检测及液相色谱-质谱联用确证方法。样品经甲醇-乙腈（体积比5∶5）超声提取,采用Agilent Poroshell 120Phenyl-Hexyl（100 mm×4.6 mm,2.7μm）色谱柱,以甲醇-乙腈（体积比2∶1）-甲酸水溶液（pH 2.5±0.1）为流动相,梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,外标法定量,液质联用法进一步定性确证。结果表明,21种成分在17 min内完成分离,方法检出限为0.03～0.50 mg/g,定量下限为0.09～1.50 mg/g,平均回收率为82.0%～109.0%。采用上述方法对107批从互联网收集的样品进行检测,阳性检出率为42.1%。该方法快速、准确,适用于降压类中成药及保健食品中非法添加药物的快速检测。

液相色谱-串联质谱法检测火锅底料中罂粟壳

研究建立火锅底料中非法添加罂粟壳的液相色谱-串联质谱测定法。采用水提取,乙腈和无水醋酸钠萃取罂粟壳中的生物碱分,液质联用进行检测,采用色谱柱SHISEIDO CAPCELL PAK CR1∶4(5μm,2.0×150 mm)色谱分离,流动相为乙酸铵:乙腈(50∶50),0.5%甲酸为A相,乙腈为流动相B相。该方法的检出限为1 ng/mL,方法定量下限吗啡为37μg/kg,可待因、罂粟碱、蒂巴因和那可丁为1μg/kg,线性范围为1 ng/m～40 ng/mL,加标回收率64.2%～101.1%。该方法测定火锅底料罂粟碱中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁、蒂巴因5种生物碱的含量快速、准确,适合于火锅调味料食品中罂粟壳的检测。

HPLC结合LC-MS/MS法快速检测穿山甲中掺加的12种黄色色素

目的通过HPLC结合LC-MS/MS法快速检测穿山甲Manis Squama中掺加的12种黄色色素(柠檬黄、日落黄、酸性橙10、栀子黄、碱性嫩黄O、碱性橙21、碱性橙2、酸性橙2、皂黄、碱性橙22、酸性嫩黄G、奶油黄)。方法穿山甲70%甲醇提取液的HPLC分析采用Agilent Poroshell 120 EC C_(18)色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm,亚3μm核壳填料);以甲醇-乙酸铵为流动相,梯度洗脱;柱温40℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长450 nm。再通过LCMS/MS法进行验证。结果各色素在各自范围内均呈良好的线性关系(r≥0.999 0),平均加样回收率76.9%~103.7%,RSD 2.0%~9.5%。60批样品中有1批掺加了栀子黄。结论该方法准确灵敏,可用于快速检测穿山甲中掺加的黄色色素。

改良QuEChERS技术结合液相色谱-串联质谱联用法同时快速检测辣椒制品中14种非法添加工业染料

采用改良Qu ECh ERS技术作为前处理方法,建立了辣椒制品中14种非法添加工业染料的液相色谱-串联质谱联用快速检测方法。样品采用乙腈-丙酮(7∶3,V/V)提取,经EMR-Lipid净化,以Agilent Poroshell 120 EC C18(50 mm×2.1 mm,2.7μm)色谱柱分离,采用多反应监测模式检测,外标法定量分析。14种成分在11 min内完成分离,检出限为0.4~7.1μg/kg,不同加标水平的平均回收率为70.5%~102.1%,相对标准偏差为0.3%~9.3%。本方法准确、快速、重复性好,可为辣椒制品中非法添加工业染料的检测提供一种更加快速、简便的技术支持。

超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱快速筛查和确证凉茶中167种非法添加药物

基于质谱数据库,建立了超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Orbitrap HRMS)快速筛查和确证凉茶中167种非法添加药物的方法。通过调研,选定了解热镇痛药、糖皮质激素、抗菌药、抗组胺药等167种药物,并利用Orbitrap HRMS和TraceFinder软件采集和记录每种药物的信息,建立高分辨质谱数据库。样品以50%(v/v)甲醇水溶液超声提取。样品溶液采用Waters XBrigde BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.5μm)分离,0.1%(v/v)甲酸水溶液-0.1%(v/v)甲酸乙腈溶液梯度洗脱。Orbitrap HRMS以全扫描/数据依赖二级质谱扫描(Full MS/dd-MS^(2))模式,正、负离子同时切换采集数据。将样品数据导入TraceFinder软件,以母离子精确质量数、保留时间、碎片离子精确质量数等进行数据库自动筛查。若某成分的母离子精确质量数实测值与理论值偏差小于5×10^(-6),保留时间偏差小于20 s,至少一个碎片离子精确质量数实测值与理论值偏差小于5×10^(-6),且二级质谱与数据库收录谱图相似,可判定该成分检出。结果表明,方法特异性好,各成分线性关系良好,相关系数(r)大于0.99。培氟沙星等5种成分存在本底干扰,不宜采用该法进行定量,其余162种成分回收率为66.4%~118.1%,精密度RSD(n=6)为0.1%~16.1%。方法在0.2 mg/kg下可筛查83种成分,1.0 mg/kg下可筛查167种成分。方法应用于245批样品,检出12批问题样品,阳性成分有对乙酰氨基酚、双氯芬酸钠、氯苯那敏等,并检出标准方法外成分金刚烷胺、右美沙芬、溴苯那敏和环丙沙星。方法检测速度快,分析成分多,筛查结果准确,为凉茶非法添加药物高通量筛查提供了新的技术支撑。

高效液相色谱-串联质谱法测定酵素食品中的匹可硫酸钠

建立了高效液相色谱-串联质谱法测定酵素食品中新型减肥类非法添加物匹可硫酸钠的分析方法。针对现有方法不适用的果冻、软糖型样品,开发了新的前处理方法。样品经水提取、聚酰胺净化,使用Thermo Accucore RP-MS色谱柱(100 mm×2.1 mm, 2.6μm),以乙腈-10 mmol/L乙酸铵(15∶85, v/v)等度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温35℃,多反应监测(MRM)模式下质谱检测,外标法定量。结果表明,匹可硫酸钠在5~500μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)为0.999 9,方法检出限为0.05 mg/kg。匹可硫酸钠在各基质样品中的加标回收率为89.2%~111.8%,相对标准偏差为2.5%~10.4%。按上述方法检测152批次酵素食品,检出阳性样品58批次,检出率为38.2%。该法准确、灵敏,可用于酵素食品中匹可硫酸钠的测定。

高效液相色谱快速测定草本植物饮料中28种外源性药物和内源性成分

建立了高效液相色谱快速测定草本植物饮料中28种外源性药物和内源性成分的分析方法。样品经甲醇-水(70∶30,v/v)超声提取后,使用Thermo Accucore C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.6μm),以甲醇、乙腈和20m m o l/L乙酸铵溶液(p H 4.2)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.2 m L/m in,柱温为35℃,采用二极管阵列检测器,检测波长为254和220 nm,外标法定量。结果表明,28种成分在1~100 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)均不小于0.999。液体样品和固体样品的检出限(LODs)分别为1~10和20~200 mg/kg。28种成分在液体和固体样品中的加标回收率分别为88.8%~118.6%和92.7%~112.3%,相对标准偏差(RSDs)分别为0.1%~6.7%和0.1%~6.4%。按上述方法检测草本植物饮料456批,检出阳性样品55批次,检出率为12.1%。该法简便快速、准确可靠,适用于草本植物饮料中28种成分的测定。

亲水作用色谱法同时测定食品添加剂中D-异抗坏血酸、L-抗坏血酸和二氧化硫脲

食品添加剂样品用含1%(体积分数,下同)甲酸的100mmol·L^-1甲酸铵溶液溶解,经乙腈稀释后,用0.22μm微孔滤膜过滤,采用亲水作用色谱法同时测定滤液中D-异抗坏血酸、L-抗坏血酸和二氧化硫脲的含量。以InfinityLab Poroshell 120HILIC-Z色谱柱(3.0mm×100mm,2.7μm)为固定相,以含1%甲酸的100mmol·L^-1甲酸铵溶液和乙腈以体积比15∶85组成的混合液为流动相,用二极管阵列检测器测定。D-异抗坏血酸、L-抗坏血酸和二氧化硫脲的质量浓度均在1.0~100mg·L^-1内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)均为1.0%。以空白样品为基体进行加标回收试验,所得回收率为94.7%~108%,测定值的相对标准偏差(n=6)小于8.0%。

高效液相色谱法同时快速检测腌腊肉制品中20种非法添加合成色素

采用亚3μm色谱柱建立了同时快速检测腌腊肉制品中20种非法添加合成色素的高效液相色谱法。样品经石油醚脱脂、乙醇-氨水-水（7∶2∶1）提取、钨酸钠溶液沉淀蛋白,采用Agilent Poroshell 120 EC C18（50 mm×4.6 mm,2.7μm）色谱柱以甲醇-0.02 mol/L乙酸铵（p H 5.5）为流动相梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果表明,待测物可在17 min内实现完全分离。20种成分的质量浓度在0.15~20.0 mg/L范围内与峰面积呈线性关系,相关系数（r）大于0.998,方法的回收率为70.3%~107.9%,相对标准偏差（RSD）为0.5%~3.1%,检出限为0.1~0.2 mg/kg。与传统5μm色谱柱ACE C18（250 mm×4.6 mm,5μm）相比,本方法节约了62%的分析时间,并能在常规HPLC系统内使用,具有广阔的应用前景。

高效液相色谱法同时快速测定凉茶中11种非法添加化学药物

采用核-壳亚3μm色谱柱建立了高效液相色谱同时测定凉茶中11种非法添加药物（对乙酰氨基酚、阿司匹林及其降解物水杨酸、磺胺甲唑、磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、氧氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、土霉素、强力霉素）的方法。样品经甲醇-乙腈（1∶1）超声提取,安捷伦Poroshell 120 EC C18（100 mm×4.6mm,2.7μm）色谱柱分离,以0.1%三氟乙酸三乙胺溶液（pH 3.0）-甲醇-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.2 mL/min,柱温35℃,采用二极管阵列检测器检测,外标法定量。11种成分的线性范围为0.5-25 mg/L,相关系数均不小于0.998 2,检出限为1-5 mg/L,平均回收率为86.9%-108.0%,相对标准偏差（RSD）为0.5%-1.4%。按上述方法对286批凉茶样品进行检测,发现9批阳性样品,检出成分为对乙酰氨基酚、阿司匹林及其水解物水杨酸、磺胺甲唑。阳性样品进一步采用液质联用法定性确证。该方法操作简便、灵敏、准确,适用于凉茶中11种化学成分的测定。

超声萃取—液相色谱—质谱法测定人体血液中8种邻苯二甲酸单酯化合物

目的 建立人血清中8种邻苯二甲酸单酯(MPEs)的超声辅助-液液萃取-液相色谱-串联质谱联用测定方法,并用于广州市普通人群血液中MPEs的调查分析。方法 血清样品经乙腈沉淀蛋白后,采用不同极性混合溶剂超声辅助液液萃取,基质匹配内标法定量。实验比较了不同提取溶剂及其比例、色谱条件和质谱条件对8种MPEs测定的影响。结果 8种MPEs在0.2 ng/ml~100 ng/ml浓度内线性关系良好,相关系数(r)>0.99;检出限为0.002 ng/ml~0.10 ng/ml;定量限为0.007 ng/ml~0.30 ng/ml。8种MPEs在4个加标水平下的回收率为85.7%~114.5%,日内、日间RSD均<10%。采用本方法测定了广州市普通人群血清中的8种MPEs,∑8MPEs暴露水平为(114.3±222.8)ng/ml。MEHP、MiBP和MnBP为主要MPEs。结论 本方法准确、快速、简便,可准确测定人体血液中8种MPEs。广州市普通人群血清中MPEs测定结果表明,广州市居民存在广泛的邻苯二甲酸酯暴露,需引起一定的关注。

高效液相色谱-串联质谱法测定蜂胶中洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星残留量

建立了一种适用于蜂胶中洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星残留检测的Qu ECh ERS-高效液相色谱串联质谱方法。样品中的蜂胶经叔丁基甲醚溶解,以5%甲酸水溶液提取喹诺酮类药物,并以乙腈、无水Mg SO4、Na Cl为复提取溶剂和盐析剂;通过正交实验,优选了150 mg无水硫酸镁、50 mg N-丙基乙二胺、50 mg封端十八烷基键合硅胶的组合为吸附剂,有效减少复杂基体的干扰。试样溶液经HPLC-MS/MS测定,内标法定量。4种喹诺酮类药物线性范围为2.0~100 ng/m L,相关系数均大于0.9997;方法检出限和定量限分别为0.75μg/kg和2.0μg/kg,平均回收率为67.4%~96.2%,相对标准偏差RSD(n=6)为1.6%~8.6%。方法可用于蜂胶中4种禁用喹诺酮类药物残留的风险监测。

高效液相色谱-串联质谱法测定膏方中药制剂中多种兽药残留

建立了膏方中药制剂中甲硝唑、地美硝唑、洛硝哒唑、替硝唑、洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、氨苯砜和氯霉素等10种兽药残留的HPLC-MS/MS测定方法。样品经Mcllvaine缓冲溶液(pH4.0)稀释,以乙腈作为提取溶剂,选择900 mg无水MgSO4、50 mg N-丙基乙二胺、50 mg十八烷基键合硅胶的组合为吸附剂去除膏方中药制剂中的糖类、多酚类、黄酮类等干扰物。试样溶液经HPLC-MS/MS测定,内标法定量。目标化合物在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9996,方法检出限为0.04~0.32μg/kg,定量限为0.1~0.8μg/kg。目标化合物的平均回收率为60.4%~114.0%,相对标准偏差范围为1.9%~9.9%。