科研项目研究在医学生双创培养中的作用

随着创新型国家建设战略的实施,培养创新型人才已经成为大学教育的重要目标。针对科研创新人才的培养,本文以内蒙古医科大学PSBH项目为例,探讨科研项目在医学生创新能力的激发和科研实践能力的培养方面所发挥的积极作用。

HPLC-UV法测定黄芪干燥根中黄芪甲苷的含量

[目的]建立黄芪干根中HPLC-UV法测定黄芪甲苷的方法,同时比较蒙古黄芪、野生黄芪和膜荚黄芪3种不同来源样本的黄芪甲苷含量.[方法]采用HPLC-UV法,色谱柱为Kromasil C18柱（250 mm×4.6mm）,流动相为乙腈∶水（32∶68）,流速1.0 ml/min,检测波长203 nm.[结果]黄芪甲苷在0.05 ～0.50 mg/ml范围内线性关系良好（r=0.999）,平均回收率为98.216％（RSD=2.85％）;不同来源黄芪甲苷含量比较结果为野生＞膜荚≈蒙古.[结论]建立的HPLC-UV法测定黄芪甲苷含量相对稳定,方法简便,为今后黄芪干根中黄芪甲苷含量的测定提供了方法参考.

实时荧光定量PCR检测结直肠癌与癌旁正常组织中miR-145的表达

目的:比较结直肠癌组织与正常癌旁组织中microRNA-145(miR-145)的表达变化。方法:收集30例手术切除的结直肠癌组织和远离癌组织的正常结直肠黏膜组织。提取总RNA,microRNA的引物反转录后,用miR-145特异性引物做荧光定量PCR反应。结果:荧光定量PCR显示结直肠癌组织miR-145的表达量明显降低,癌组织中的表达量为正常癌旁组织的0.353倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:结直肠癌组织中miR-145的表达低于正常组织,在结直肠癌中发挥抑癌基因的作用。

牛和小鼠胎儿成纤维细胞混合制成的饲养层对牛胚胎干细胞的体外培养

【目的】建立适合的牛胚胎干细胞培养环境,保持其未分化状态,保证细胞的全能性。【方法】分别培养小鼠胎儿成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)和牛胎儿成纤维细胞(bovine embryonic fibroblast,BEF),用丝裂霉素C处理两种成纤维细胞分别计数后按1﹕0、1﹕1、2﹕1、1﹕2和0﹕1的比例制成混合饲养层,观察牛胚胎干细胞的生长状态,并对生长在混合饲养层上的牛胚胎干细胞进行碱性磷酸酶,OCT4和SSEA-1免疫组化检测,OCT4、SOX2、NANOG mRNA表达RT-PCR检测、体外分化形成拟胚体等试验。【结果】①生长在混合饲养层上的牛胚胎干细胞比单独生长在小鼠或牛胎儿成纤维细胞饲养层的结构致密、与滋养层界限明显;②小鼠胎儿成纤维细胞和牛胎儿成纤维细胞在1﹕1比例混合下牛胚胎干细胞克隆结构致密、显著堆积且边缘轮廓清晰优于其它比例组合;③获得的牛胚胎干细胞AKP染色及OCT4、SSEA-1抗原表达均成阳性,分别在体外分化培养形成了拟胚体。【结论】小鼠和牛胎儿成纤维细胞在以1﹕1的比例混合下制成的饲养层可更好地支持牛胚胎干细胞的体外培养,获得的克隆形态最好。

血液基因组DNA提取试剂盒提取条件的优化

目的针对两种实验室常用全血基因组提取DNA试剂盒(天根血液基因组DNA提取试剂盒、康为世纪血液基因组提取试剂盒)提取方法和DNA产量进行比较,建立方便、快捷、有效的外周血液基因组DNA的提取方法。方法采用500ul、800ul全血、裂解液1.5倍、2倍提取基因组DNA,利用分光光度计和凝胶电泳检测提取效果。结果两种试剂盒采用800ul全血与2倍裂解液时提取血液基因组DNA浓度最高,其中天根试剂盒提取的基因组DNA纯度和质量更优。结论利用商品化试剂盒提取血液基因组DNA时,针对实验目的,可采取增加全血用量和提高裂解液体积的方法提高基因组DNA的产量和纯度。

电穿孔法高效转染脑胶质瘤细胞U251的条件优化研究

目的探讨不同电穿孔条件对脑胶质瘤细胞U251电转染率的影响,旨在优化脑胶质瘤细胞U251的电穿孔转染条件以获得较高转染效率。方法以脑胶质瘤细胞系U251为研究对象,在300μl电转体系中,选择不同的电压、脉冲时间、细胞浓度、DNA剂量,将pEGFP-C1质粒导入U251,计算转染效率。结果在110V、脉冲250μs、细胞浓度1×106/ml、质粒2μg,转染效果最佳,转染后48 h阳性率约为69%。结论优化条件后的电穿孔法操作简单,经济省时,可用于脂质体等方法较难转染细胞(如脑胶质瘤细胞)的外源基因导入。该实验也为进一步研究其他基因转移到胶质瘤细胞的应用提供可靠的试验参数基础。

视网膜色素变性Rd1小鼠眼球中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达

目的探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在Rd1小鼠视网膜上的表达情况。方法取出生后14d、21d、28d的Rd1小鼠和C57BL/6J小鼠各5只,摘出眼球进行HE染色,观察视网膜形态学结构变化;免疫组织化学染色与实时荧光定量PCR检测PCNA蛋白和基因在不同鼠龄小鼠中的表达。结果 HE染色结果显示:PCNA蛋白均在两种小鼠视网膜神经节细胞中表达; C57BL/6J小鼠视网膜结构完整;与C57BL/6J小鼠相比,Rd1小鼠视网膜发育随着鼠龄的增加,发生进行性退化。免疫组织化学染色结果显示:PCNA蛋白表达仅局限于视网膜神经节细胞,免疫阳性信号出现在第14天和第21天,而在第28天未检测到。PCR实验结果显示:与C57BL/6J小鼠相比较,鼠龄21d时Rd1小鼠PCNA基因表达水平增高,是C57BL/6J小鼠的2. 23倍;鼠龄14 d和28 d时Rd1小鼠PCNA基因表达均低于C57BL/6J小鼠(均为P <0. 05)。结论 PCNA基因参与了Rd1小鼠视网膜发育退化过程。

SNAPIN基因对受体酪氨酸激酶c-MET在HEK 293T细胞中表达的影响

目的探讨HEK 293T细胞中受体酪氨酸激酶c-MET的表达是否受SNAPIN基因表达的影响。方法构建pEGFPSNAPIN荧光蛋白表达载体,并将pEGFP-SNAPIN荧光蛋白表达载体和siRNA干扰片段通过脂质体转染的方法分别转染到HEK 293T细胞中,利用实时定量PCR的方法在转录水平上观察SNAPIN表达改变对其相互作用蛋白c-MET的影响。结果成功构建pEGFP-SNAPIN荧光蛋白表达载体;实时定量PCR实验结果显示SNAPIN被沉默后其表达量降低,c-MET的表达也相应下降;转染pEGFP-SNAPIN荧光蛋白表达载体后,SNAPIN的表达量增加,c-MET的表达也相应增加。结论转录水平上SNAPIN相互作用蛋白c-MET的表达可能受到SNAPIN的调控。

肌源性干细胞研究进展

近年来,具有巨大临床应用潜能的成体干细胞已经成为生命科学研究的热点之一。肌源性干细胞具有强大的自我更新和多项分化潜能,能分化为神经细胞、胰岛细胞、成骨细胞等不同胚层的细胞,并能参与多种组织的损伤修复过程,在脊髓损伤修复及治疗压力性尿失禁中发挥巨大作用,因此,在基因治疗和组织工程领域具有广泛应用前景。

浅谈医学院校实验室队伍建设中存在的问题及对策

实验技术队伍是高等学校教师队伍的重要组成部分。建设一支具有较高科研素质、较强动手能力,既熟悉实验设备性能,又能熟练操作实验设备,并能较好指导学生实验的实验队伍是搞好实验室建设和充分发挥仪器设备效益的重要保证。在对内蒙古自治区3所医学院校实验技术队伍建设情况调查的基础上,分析了该自治区医学院校实验技术队伍建设面临的主要问题,提出了加强实验技术队伍建设的对策。

高职旅游管理专业实践教学创新研究——以贵阳职业技术学院为例

我国旅游业的蓬勃发展为高职院校旅游类专业发展提供了契机,而在专业教学中,实践教学已成为旅游职业教育改革与发展的关键。改变教育理念,调整办学思路,开展深层次的校企合作,强化实践教育基地建设,制定和加强实践教育管理制度和评价体系,拟定切合实际的人才培养方案和实践教学方案,调整课时结构,增加实践教学比例,增强旅游教育的实践性、针对性和地方性,是高职旅游类专业内涵式发展的关键。

虚拟仿真技术在大型仪器共享平台中的应用及教学改革探索

大型仪器设备教学培训效果不仅影响医学院校大型仪器设备的使用率,还关系到医学院校的科学研究、人才培养、学科建设、实验教学质量。文章重点分析了医学类院校大型仪器教学培训存在的问题,以及虚拟仿技术在大型仪器培训中发挥的作用。在大型仪器预约使用流程中加入大型仪器培训考核环节,通过调查问卷制定个性化培训方案,建立大型仪器三级培训模式(线上自主学习、线下实物操作和线下理论学习),培训合格即可申请自主预约检测。笔者对融入虚拟仿真实验的大型仪器培训教学改革模型进行了探索,认为融入虚拟仿真实验的三级培训模式使大型仪器培训目标更为明确,更具有层次化和规范性,有效提升了大型仪器的共享率、开放度和利用率。

试论实验动物福利在医学教学中的人文教育意义

随着医学伦理的提倡和普及,实验动物福利越来越多地引起医学界的关注。动物实验作为医学教育、医学科研不可或缺的基本手段,具有超越技术层面的人文属性和伦理性特点。动物福利教育对于医学院校的学生而言,除了一般意义上的动物伦理,还对其医学价值观、医学人文观的培育和树立具有独特的原点意义,是医学教育“育人”目标的具体体现。

科研实验室在专业型医学研究生科研能力培养中作用的探索

针对专业型医学研究生科研能力培养中存在的问题,内蒙古自治区分子病理学重点实验室结合实际情况进行了探索,主要措施有实验室完全开放、分层指导和实验室学术例会制度。

建筑工程桩基施工业主方管理要点分析——以红炭山安置小区为例

文中以红炭山安置小区桩基施工为例,就业主方的管理分别从前期工作、过程质量控制、安全管理、进度和成本控制等方面进行了阐述与探讨,并提出了个人观点,希望为业主方在桩基施工过程中的管理提供参考。

蒙药巴特尔-7抑制口腔上皮癌KB细胞增殖及诱导细胞周期阻滞作用研究

目的:研究蒙药巴特尔-7对口腔上皮癌KB细胞增殖、细胞周期作用影响。方法:利用2.5mg/mL的蒙药巴特尔-7作用于口腔上皮癌KB细胞,经体外培养,研究对口腔上皮癌KB细胞增殖影响,利用流式细胞技术检测口腔上皮癌KB细胞周期的改变。结果:蒙药巴特尔-7可明显抑制口腔上皮癌KB细胞增殖,并诱导口腔上皮癌KB细胞于G2/M期阻滞。结论:蒙药巴特尔-7可抑制口腔上皮癌KB细胞细胞增殖速率,诱导KB细胞周期阻滞,研究蒙药巴特尔-7对口腔上皮癌KB细胞抑制作用,为临床治疗提拱了理论依据。

压力机气垫在进、排气时冲击问题的研究

压力机气垫在进、排气时冲击问题的研究２５００２２济南二机床集团有限公司温行宾李初晔烟台宇龙汽车有限公司温建勋１概述目前，国内设计、生产的机械压力机，其气垫（带快速放气阀）在快速进气、排气时均存在着冲击问题。气垫开始进气时，由于设置在气垫进气管路上的放...

胃癌患者肠道菌群的分布特点分析

目的应用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)基因指纹图谱技术,检测胃癌患者肠道菌群的变化情况,探讨肠道菌群与胃癌发生发展的关系。方法选取7例符合临床诊断标准的胃癌患者和相同年龄段的3例健康者的粪便标本,提取粪便总DNA。通过PCR-DGGE技术获得菌群指纹图谱,进行相似性、多样性分析。结果胃癌患者肠道菌群与健康对照组相比,其肠道菌群构成发生显著性变化。其中,条件致病菌唾液乳杆菌、唾液链球菌、大肠埃希菌数量均增加。益生菌直肠真杆菌、Dorea longicatena、柔嫩梭菌群数量均较少。结论胃癌患者肠道菌群的多样性和构成与健康对照相比发生了显著变化,该特点对于胃癌的预测提供了实验依据。

内蒙古道地黄芪种质资源遗传多样性分析

目的建立黄芪ISSR分析最佳反应体系,并分析内蒙古地区黄芪遗传多样性。方法采用单因素梯度浓度实验和正交试验相结合的优化方法建立稳定、可靠的ISSR反应体系;对内蒙古9个盟市30个不同居群的黄芪样本进行遗传多样性分析,用NTSYS2.1软件进行数据统计。结果 ISSR-PCR最佳反应体系（20μL）：10×PCR缓冲液2.0μL、Mg Cl2 1.5mmol/L、d NTP 0.4 mmol/L、引物0.5μmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U、模板DNA 40 ng;15条ISSR引物共检测到169个扩增位点,多态性位点157个,多态位点百分率为75%-100%,遗传距离变幅范围0.242 7-0.730 8,聚类分析可知,30个居群黄芪样本可分为2大类,大多数呈现地域分布规律。结论建立的黄芪ISSR-PCR反应体系稳定可靠;内蒙古地区黄芪具有较高的遗传多样性,种质间的亲缘关系与地理位置具有一定的关系。

不同代次大鼠骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞成骨分化比较

本研究旨在观察不同代次骨髓间充质干细胞(BMSCs)和脂肪间充质干细胞(ADSCs)体外培养的生长特点和体外诱导成骨能力。通过密度梯度离心和贴壁培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞,用含地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的培养液定向诱导传代细胞向成骨细胞分化,并利用茜素红染色、碱性磷酸酶染色及PCR方法检测成骨细胞。结果表明骨髓及脂肪间充质干细胞呈成纤维细胞样生长,增殖能力强,生长迅速。第5、10、15、20代BMSCs及ADSCs经诱导培养后茜素红染色呈阳性并且出现"矿化"、碱性磷酸酶活性强,随着细胞代次的递增,诱导后细胞碱性磷酸酶活性呈递减趋势;诱导后的两类细胞传代后细胞仍能继续分化,并形成正常的"矿化"结节,且碱性磷酸酶染色均弱于初次诱导。结果提示,BMSCs及ADSCs易于分离培养及体外扩增,诱导条件下成骨能力强且成骨细胞传代培养仍具有成骨能力,适合作为再生医学骨组织工程的种子细胞。