氟中毒大鼠脑组织中NMDA受体及内质网应激相关通路蛋白的表达

背景:前期研究发现N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDA)受体与氟相关,但其在氟诱导的内质网应激中的作用尚不明确。目的:观察实验性氟中毒大鼠脑组织中兴奋性神经递质NMDA受体及内质网应激IRE1α-ASK1-JNK通路蛋白表达变化,并应用NMDA受体抑制剂干预SH-SY5Y细胞,探讨氟中毒神经系统损伤的发病机制。方法:(1)动物模型:18只1月龄SD大鼠随机分为对照组(饮水含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为10.0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为100.0 mg/L),每组6只,雌雄各半。饮水摄氟饲养6个月后,观察大鼠氟斑牙发生情况,测定24 h尿氟含量;大鼠麻醉处死后取脑组织观察组织病理变化,蛋白印迹法检测脑组织中NMDA受体及IRE1α、ASK1、JNK蛋白表达。(2)细胞模型:体外培养SH-SY5Y细胞,选择终浓度为0.3 mmol/L和3 mmol/L的氟化钠染氟处理,并用10μmol/L的NMDA受体拮抗剂Ifenprodil、MK-801对染氟细胞进行干预,观察相关蛋白改变。结果与结论:(1)高氟组大鼠氟斑牙发生率、尿氟水平显著高于对照组和低氟组(P<0.05);(2)与对照组相比,低氟组大鼠海马CA3区神经细胞胞质嗜碱性略增加,高氟组CA3区神经细胞排列紊乱,嗜碱性增加,部分细胞核固缩;(3)大鼠脑组织内,高氟组NR2A与低氟组NR2B的蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟组NR2B、IRE1、ASK1、p-JNK蛋白表达明显高于对照组和低氟组(P<0.05);(4)SH-SY5Y细胞内,高氟组NR1、NR2A、NR2B蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟+Ifenprodil组、高氟+MK-801组NR1、NR2A蛋白表达均明显低于高氟组(P<0.05),高氟+Ifenprodil组NR2B蛋白表达也明显低于高氟组(P<0.05);(5)SH-SY5Y细胞内,高氟组IRE1、ASK1、p-JNK蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟+Ifenprodil组、高氟+MK-801组ASK1、p-JNK蛋白表达均明显低于高氟组(P<0.05),高氟+Ifenprodil组IRE1蛋白水平也明显低于高氟组(P<0.05);(6)提示:过量氟摄入可激活中枢神经系统NMDA受体,引起内质网应激IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白表达增加,使用NMDA受体抑制剂对氟中毒所致内质网应激具有一定缓解作用。

吻合口注射尿激酶治疗动静脉内瘘急性闭塞的护理

目的观察动静脉内瘘吻合口恒速注射尿激酶溶栓在治疗急性闭塞的疗效方法对11例长期血液透析患者动静脉内瘘急性闭塞应用吻合口恒速注射尿激酶溶栓治疗及尽早进行相应护理干预。使用7#头皮针在动静脉内瘘吻合口端或血栓形成远心端2～3cm处（针尖指向内瘘侧）穿刺后按医嘱恒速缓慢注入尿激酶溶液（生理盐水20ml＋尿激酶10—50万U），持续2～4小时，每天使用1～2次，连续使用2。3天。溶栓时在距动静脉内瘘吻合口或血栓位置上方约10～15cm处扎止血带，止血带松紧适宜，每60min松开5分钟后重新扎上止血带。结果8例自体动静脉内瘘急性闭塞患者及时治疗、护理，内瘘24小时后溶通，可成功完成一次有效透析治疗;3例移植血管内瘘多次溶通后再堵塞。结论尿激酶直接注入动静脉内瘘吻合口溶栓，成功率高，费用低，值得临床推广应用。

内瘘穿刺方向对自体动静脉内瘘功能的影响

目的探讨内瘘穿刺方向对自体动静脉内瘘功能的影响。方法将150例使用自体动静脉内瘘的维持性血液透析患者随机分为三组各50例,分别采用向心穿刺(顺穿)、离心穿刺(反穿)和顺反穿交替的方式进行内瘘穿刺,比较2年后三组透析充分率、内瘘假性动脉瘤及狭窄发生情况。结果最终完成研究143例。三组透析充分性比较,差异无统计学意义(P>0.05);三组内瘘假性动脉瘤和狭窄发生率比较,差异有统计学意义(均P<0.05),反穿组假性动脉瘤发生率最高,顺穿组内瘘狭窄发生率最高。结论顺反穿交替穿刺技术在不影响透析效果的前提下,可有效降低自体动静脉内瘘动脉瘤和狭窄的发生。

实施优质护理服务对血液透析病人营养管理的促进作用

[目的]探讨实施优质护理服务对维持性血液透析病人营养状况的影响。[方法]将401例病人随机分配给责任护士分管,每名护士分管9例或10例病人,观察优质护理服务模式实行1年后病人的实验室检查指标及健康教育得分的变化。[结果]实施优质护理服务后病人的各项实验室检查指标明显改善(P<0.05),健康教育知识掌握较好(P<0.05)。[结论]实施优质护理服务对改善血液透析病人的营养管理具有促进作用。

自制密闭式气管内给药器应用于NRDS患儿气管内给药中的效果分析

目的分析新生儿急性呼吸窘迫综合征(NRDS)患儿使用自制密闭式气管内给药器开展气管内给药的作用。方法选取NRDS患儿60例,随机分成常规组及实验组,各30例。常规组患儿采取常规气管内给药,实验组患儿采取自制密闭式气管内给药器给药。对比两组患儿心率及血氧饱和度最低值;药物反流及面色发绀出现率。结果实验组患儿心率及血氧饱和度最低值均高于常规组(P<0.05);实验组患儿药物反流出现率及面色发绀出现率均低于常规组(P<0.05)。结论NRDS患儿使用自制密闭式气管内给药器开展气管内给药,能够避免在注射药物期间导致心率及血氧饱和度明显波动,同时还可减少药物反流及面色发绀情况,发挥一定干预效果。

加强城市规划管理的几点思考

目前城市规划存在着用地结构不合理、用地效率低,城市建设的短期行为,城市发展目标的盲目性,城市环境不断恶化等问题。加强城市规划和管理应该改革城市规划编制的思路和方法,使城市规划对城市土地利用真正起到引导和控制作用;抓好高标准规划的制定,并严格按照规划分步建设,注重质量;在城市规划的编制和实施中落实生态环保理念,体现城市的文化品位以及提高公众的参与度。

腹股沟疝日间手术患者出院准备度的质性研究

目的探讨腹股沟疝日间手术患者出院准备度现状,分析患者出院准备欠缺的原因,为制订个性化干预措施提供依据,提高患者出院准备度。方法2020年7—12月利用目的抽样法,对该院收治的腹股沟疝日间手术患者12例进行半结构式访谈,采用质性研究中现象学分析法分析资料,提炼主题。结果腹股沟疝日间手术出院患者出院准备度低主要原因为不适的躯体体验感、负性心理状态、相关知识认知不足、自我管理能力低下、可获得的社会支持水平不一。结论腹股沟疝日间手术患者出院准备度低,可在入院开始评估,结合心理、生理、社会各方面情况制订个性化计划,提高患者的出院准备度。

强化风险护理对新生儿黄疸蓝光照射治疗效果及安全性的影响

目的研究强化风险护理用于新生儿黄疸蓝光照射治疗中的价值。方法2019年4月至2020年3月本院接诊且行蓝光照射治疗的黄疸患儿80例,用数字抽签法划分成研究、对照组(n=40)。研究组采取强化风险护理,对照组实行常规护理。对比风险事件发生率等指标。结果研究组风险事件发生率5.0%,比对照组25.0%低,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组总有效率97.5%,比对照组82.5%高,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组家长满意度97.5%,优于对照组80.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论于蓝光照射治疗期间,采取强化风险护理法对黄疸患儿进行干预,利于风险事件的预防,疗效的提升,及家长满意度的改善,建议推广。

学习型城市规划更新的几点思考

作者在阐述学习型城市内涵的基础上,结合学习型城市建设的实践,提出我国学习型城市规划更新的几点建议。

不同剂量氟对大鼠肾皮质IRE1α-ASK1-JNK蛋白表达的影响

目的探讨内质网应激凋亡通路相关蛋白在慢性氟中毒大鼠肾皮质中的表达变化及意义。方法24只健康SD大鼠,根据体质量(100~120 g)采用随机数字表法分为4组(6只/组,雌雄各半);对照组大鼠饮用自来水(含氟量<0.5 mg/L),低、中、高氟组分别饮用含氟量为10、50、100 mg/L(氟化钠)的自来水。各组大鼠饲养180 d后,观察氟斑牙发生情况;收集24 h尿样,氟离子选择电极法检测尿氟含量;大鼠麻醉后处死取肾脏组织,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肾皮质病理学改变;免疫组织化学染色法观察大鼠肾皮质内质网应激凋亡通路相关蛋白[肌醇依赖性激酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)、凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)、C-Jun氨基酸末端激酶(C-Jun N-terminal kinase,JNK)及磷酸化JNK(phosphorylated-JNK,P-JNK)]的表达水平。结果对照组大鼠未检出氟斑牙,低氟组大鼠氟斑牙发生率为2/6,中氟组为5/6,高氟组为6/6。与对照组[(5.707±1.190)mg/L]比较,低、中、高氟组大鼠尿氟[(17.028±3.006)、(34.378±12.045)、(94.759±31.773)mg/L]均较高(P均<0.05),且高氟组明显高于低、中氟组(P均<0.05)。HE染色可见,与对照组比较,中、高氟组大鼠肾皮质区肾小管及肾小球细胞体积增大,细胞排列紧密,细胞质嗜酸性增强。免疫组织化学染色结果显示,对照组和低、中、高氟组大鼠肾皮质JNK蛋白表达水平比较差异无统计学意义(F=0.07,P>0.05);高氟组大鼠肾皮质IRE1α、ASK1、P-JNK蛋白表达水平与对照组和低、中氟组比较均较高(P均<0.05),且中氟组IRE1α、ASK1蛋白表达水平均明显高于对照组及低氟组(P均<0.05)。结论长期过量氟摄入可导致大鼠肾皮质损伤,其损伤机制可能与内质网应激凋亡通路IRE1α-ASK1-JNK的活化有关。

N-甲基-D-天冬氨酸受体介导的学习记忆及神经毒性的研究进展

N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)是一种谷氨酸能兴奋性神经受体,由多种亚基组成强制性异四聚体。NMDAR的兴奋性谷氨酸能神经传递对于神经元的突触可塑性和神经细胞的存活至关重要。海马体和纹状体的突触可塑性与学习记忆的关系密切,其中,海绵体的突触可塑性的原型形式长时程增强(long-term potentiation,LTP)参与学习记忆的维持和巩固,而纹状体的突触可塑性是构成学习和记忆的细胞基础。生理状态下的NMDAR的各个亚基可对学习记忆的产生起促进作用。然而,NMDAR亚基的过度激活,则会引起学习记忆障碍及诱导兴奋性神经毒性并促进神经细胞死亡。此外,突触内NMDAR的正常激活启动突触可塑性并刺激细胞存活。相反,突触外NMDAR的过度激活可诱导Ca2+超载,介导兴奋性神经毒性并促进神经细胞死亡;但是,目前越来越多的研究表明,突触内NMDAR在促进神经元存活的同时,同样可以介导兴奋性神经毒性从而引起神经细胞死亡。主流观点认为兴奋性神经毒性主要由Ca2+超载介导,部分观点则认为NMDAR还可以通过Ca2+超载与非离子通道同时介导兴奋性神经毒性。本文主要就NMDAR对学习记忆促进及抑制作用及其诱导的兴奋性神经毒性的研究进展进行综述。

慢性氟中毒大鼠脑组织P-NMDAR及CaMKⅡ的表达

目的观察慢性氟中毒大鼠脑组织中磷酸化-N-甲基-D-天冬氨酸受体(phosphorylated N-methyl-D-aspartat receptor,P-NMDAR)亚基及钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calmodulin-dependent kinaseⅡ,CaMKⅡ)蛋白表达变化,探讨慢性氟中毒神经损伤的分子发病机制。方法选择1月龄SD大鼠18只(雌雄各半),适应性喂养1周,按体质量[(100±20)g]采用随机数字表法分为对照组(饮用自来水,含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为10.0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为100.0 mg/L),每组6只(雌雄各半);饲养180 d后处死取大鼠脑组织。HE染色观察大鼠脑组织形态学改变;尼氏染色观察神经细胞尼氏体变化;免疫组织化学染色(免疫组化)观察大鼠脑组织中P-NMDAR亚基(P-NMDAR1、P-NMDAR2A)及CaMKⅡ蛋白表达水平。结果光镜下,HE染色可见高氟组大鼠脑组织海马区神经元排列紊乱,细胞核浓染、嗜碱性增强。尼氏染色结果显示,对照组、低氟组、高氟组大鼠脑组织海马区神经细胞尼氏体平均光密度值分别为0.0244±0.0097、0.0240±0.0031、0.0239±0.0138,各组间比较差异无统计学意义(F=0.010,P>0.05)。免疫组化结果显示,高氟组大鼠脑组织P-NMDAR1、P-NMDAR2A、CaMKⅡ蛋白表达水平(0.0263±0.0057、0.0863±0.0090、0.2109±0.0487)与对照组(0.0118±0.0065、0.0656±0.0111、0.1438±0.0299)和低氟组(0.0172±0.0068、0.0626±0.0178、0.1356±0.0296)比较显著升高(P均<0.05),且低氟组P-NMDAR1蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论长期过量氟摄入可导致大鼠神经细胞损伤,其损伤机制可能与NMDAR亚基过度激活所致的钙离子(Ca2+)超载诱导的兴奋性神经毒性有关。

氟对仔鼠生长发育、学习记忆及血清氧化应激水平的影响

目的观察氟中毒仔鼠生长发育、学习记忆及血清氧化应激水平的变化情况,探讨氟对仔鼠神经行为发育的作用机制。方法选择SD大鼠72只(雌雄比例3∶1),适应性喂养1周,按体质量[(80±20)g]采用随机数字表法分为对照组(饮用自来水,含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为10.0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为100.0 mg/L),每组24只(雌鼠18只、雄鼠6只),饲养6个月后自由交配产仔;各组母鼠产仔后持续染氟,仔鼠经母乳途径染氟至出生28 d。记录仔鼠的体、脑质量,生长发育指标(张耳、睁眼、牙齿萌出、长毛)和神经行为发育指标(悬崖回避、听觉惊愕、平面翻正、触须定位)的达标时间;出生28 d,采用Morris水迷宫检测仔鼠学习记忆能力(逃避潜伏期)。取出生28 d的仔鼠眼球血,检测血清一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合成酶(NOS)及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)活性。结果出生21、28 d,对照组、低氟组和高氟组仔鼠体质量[21 d:(54.70±3.02)、(52.30±2.58)、(51.30±2.71)g,28 d:(91.70±5.03)、(90.40±4.76)、(86.00±4.55)g]组间比较差异有统计学意义(F=3.96、3.70,P均<0.05);其中,出生21 d的高氟组仔鼠体质量低于对照组(P<0.05);出生28 d的高氟组仔鼠体质量低于对照组和低氟组(P均<0.05)。出生28 d,对照组、低氟组和高氟组仔鼠脑质量组间比较差异有统计学意义(F=6.19,P<0.05);且低氟组和高氟组显著低于对照组(P均<0.05)。在生长发育指标中,对照组、低氟组和高氟组仔鼠睁眼完成时间组间比较差异有统计学意义(F=3.64,P<0.05);且高氟组高于对照组(P<0.05)。在神经行为发育指标中,对照组、低氟组和高氟组仔鼠悬崖回避、平面翻正达标时间组间比较差异有统计学意义(F=8.29、7.69,P均<0.05);且高氟组悬崖回避达标时间高于对照组和低氟组(P均<0.05),平面翻正达标时间高于对照组(P<0.05)。Morris水迷宫实验第4天,低氟组和高氟组仔鼠逃避潜伏期高于对照组(P均<0.05)。血清氧化应激水平结果显示,对照组、低氟组和高氟组仔鼠血清NO含量,NOS、iNOS活性组间比较差异有统计学意义(F=4.86、66.48、70.95,P均<0.05);且高氟组NO含量高于对照组(P<0.05),NOS、iNOS活性高于对照组和低氟组(P均<0.05);低氟组血清NOS、iNOS活性高于对照组(P均<0.05)。结论过量氟可引起仔鼠血清氧化应激水平升高,可能与仔鼠神经行为发育迟滞、学习记忆能力下降密切相关。