厦门地区病毒性腹泻诺如病毒感染状况

目的了解本地区病毒性腹泻患者诺如病毒感染情况,为进一步探索诺如病毒流行规律和防控对策提供依据。方法收集2007年4月至2008年7月3个监测哨点医院病毒性腹泻患者粪便标本共323份,应用ELISA方法检测粪便标本中病毒抗原,实时荧光逆转录聚合酶链反应法(Real-Time RT-PCR)分组别检测病毒核酸,部分病毒核酸阳性的标本扩增RdRp基因片段后测序验证病毒组别。结果323例患者粪便标本中,ELISA检测抗原阳性68例,阳性率21.05%;Real-Time RT-PCR检测核酸阳性107例,阳性率33.13%;诺如病毒检出率为38.08%。诺如病毒GGⅡ组占74.77%,少数为GGⅠ组(1.87%),尚有25份(23.36%)未定型。结论厦门地区存在诺如病毒流行,以GGⅡ组毒株流行为主,而且是病毒性腹泻的主要病原。

探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药突变

目的评价探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药突变的应用价值,为临床应用提供依据。方法首先用中国药品生物制品检定所提供的含37份标准非结核分枝杆菌的标准盘进行特异性评价,然后将野生型结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA梯度稀释进行灵敏度考察,最后对906株结核分枝杆菌临床分离株(其中37份有药物敏感性试验结果)的链霉素耐药相关基因进行检测,并对突变菌株、有药敏结果的菌株以及疑似杂合的菌株进行测序分析。结果标准盘评价结果证实该体系特异检测H37Rv结核分枝杆菌。分析灵敏度为5～50拷贝每反应。在所有的906份结核分枝杆菌培养标本中,103份标本发生突变且与测序结果一致,18份标本存在杂合信号,17份标本无信号。37份有药敏结果的标本中,敏感的标本用探针熔解分析法所得结果均为野生型,耐药的16份标本仅检测到7份突变,另有9份耐药的标本实时检测为野生型,与测序结果相符。结论探针熔解分析技术特异性好,可以快速、准确地检测结核分枝杆菌链霉素耐药常见突变,有望直接用于临床标本链霉素耐药性检测。

荧光置换探针多重实时PCR检测结核杆菌3种耐药突变

[目的]建立单管检测结核分枝杆菌3种耐药突变的多重实时PCR检测方法,考察其敏感性并应用于痰标本的检测。[方法]将荧光双链置换探针、实时PCR和多重PCR相结合,针对3种一线药物链霉素、异烟肼和乙胺丁醇中最常见的且都是由于点突变而导致的耐药突变位点进行检测。[结果]该检测体系可以检测到5个菌/test。用该体系检测9份已知基因型的结核分枝杆菌培养标本和118份痰标本,所有检测结果均通过ARMS体系验证。[结论]该检测体系具有很高的敏感性和特异性,检测快速,测定突变位点范围较其它技术有较大提高,且操作简便,有利于结核病菌的早期耐药检测和指导医生用药。

厦门市2008年至2010年HIV抗体筛查阳性标本复检及确证情况分析

目的分析厦门市HIV抗体筛查实验室检测情况,为指导监测检测工作提供依据,以促进实验室网络检测能力提高。方法采用一种ELISA试剂和一种快速法试剂对2008年至2010年厦门市各HIV抗体筛查实验室初筛阳性送检的799份样本进行复检,采用WB试剂对复检阳性标本进行确证,并对其检测结果分析比较。结果经复检,有402份HIV抗体2种方法均为阴性(402/799,50.3%),血站送检样本复检阴性率(199/236,84.3%)显著高于医疗和疾控系统;医疗和疾控系统3年来送检样本复检阴性呈现逐年降低的趋势。ELISA和快速法双阳性与WB的阳性符合率为97.8%。HIV抗体不确定的WB带型中p24出现几率最高。结论 3年来厦门市HIV抗体筛查实验室检测质量在逐步提高,但仍需进一步加强实验室规范化管理;应加强对HIV抗体不确定受检者的随防检测。

特质细纤度桑蚕丝缫制工艺技术探讨

介绍了三眠茧的茧层特征，提出了缫制特质细纤度桑蚕丝的工艺技术措施。

制丝废水处理及回用探讨

分析了制丝废水的处理方法、处理效果及回用情况，通过生产试验证明，制丝废水处理后可以重新用于缫丝，对保护环境、节约水资源有着重要的指导意义。

应用探针熔解分析法检测结核分枝杆菌rpoB基因突变

摘要：目的研究结核分枝杆菌利福平耐药突变实时PCR检测试剂盒（探针熔解分析）的临床应用价值。方法用37株非结核分枝杆菌考察该方法的特异性，用菌株H37Rv考察其检测限，并检测962份结核分枝杆菌培养标本的rpoB基因利福平耐药决定区突变，检测结果经测序验证。结果37株非结核分枝杆菌中仅有3株出现耐药突变峰，检测限考察结果表明该方法每反应可重复检出30个菌。

牛蛙和养殖池霍乱弧菌污染状况及与产肠毒素霍乱弧菌的差异

1996年笔者从牛蛙体内检出O1群霍乱弧菌（V.cholerae.VCc），从而引起了对牛蛙养殖池污染霍乱弧菌的重视。此后10多年来，在霍乱监测工作中屡从牛蛙及养殖池检出O1VC,检出率高于水与其他水产品，但一直未明确其与人间霍乱疫情的关系；由于处理霍乱疫情耗费大量的人力物力，

厦门市实施“14+7隔离”与“核酸+总抗体筛查”策略对发现境外输入性新型冠状病毒感染者的作用分析

目的评估厦门市实施入境人员“14+7隔离”与“核酸+总抗体筛查”策略(联合筛查策略)对发现境外输入性新型冠状病毒(新冠病毒)感染者的作用。方法研究对象为2020年3月17日至12月31日厦门市入境人员、7月18日至12月31日外地隔离不足21 d的入境人员。收集和分析实施联合筛查策略后的境外输入性新型冠状病毒感染者的发现时间、路径和检测情况。结果在174628名入境人员和943名外地入境人员中,共发现304例境外输入性新冠病毒感染者,其中163例(53.6%)为总抗体阳性后经多次及多部位核酸检测确诊,27例(8.9%)在入境14 d后首次核酸阳性,136例入境“14 d”隔离期间首次核酸检测阳性,仅8例在总抗体阳性后首次核酸检测阳性,128例在平均2.3次(最高6次)核酸检测阴性后转为阳性。联合筛查策略比“14 d隔离+核酸筛查”策略估算多检出155例,占入境感染者总数的51.0%,提高检出率约1倍。截至2021年2月26日尚未发现厦门市入境人员引起的续发感染。结论厦门市对入境人员实施联合筛查策略,可有效筛查入境14 d后转为核酸阳性的新冠病毒感染者,与“14 d隔离+核酸筛查”策略相比,有效提高检出率,降低境外输入引起续发传播的风险。

多色组合探针实时PCR技术在检测食源性病原菌中的应用

目的探讨多色组合探针编码技术实时PCR（MCPC—PCR）检测食品标本中的沙门菌和金黄色葡萄球菌等病原细菌的检测限，并应用于食物中毒标本的检测。方法配制系列浓度（10^1～10^9CFU／ml）的菌悬液，以鲜肉样品和蛋糕制备模拟样本各11份，应用MCPC—PCR方法检测22份模拟标本中沙门菌和金黄色葡萄球菌；101份冻存的食物中毒标本营养肉汤增菌液，以及某次食物中毒事件的5例首批患者肛拭营养肉汤增菌液提取DNA后进行MCPC—PCR检测。结果MCPC—PCR技术在食品标本中沙门菌和金黄色葡萄球菌检测的检测限为10^2copies／test（每个PCR测试管含有的拷贝数）；101份冻存的食物中毒标本营养肉汤增菌液以MCPC—PCR检测，结果阳性23份，其中18份经细菌学方法分离菌株证实，MCPC—PCR和细菌学方法检测结果均相同的为96份，结果符合率达95．05％；采自某次食物中毒事件的5个首批患者肛拭标本MCPC-PCR检测结果提示为副溶血性弧菌，与细菌学分离结果完全符合。结论MCPC—PCR技术灵敏度高、特异度好，可应用于多种食源性病原菌的快速筛查和快速检测。

探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变

目的 评价探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变的应用价值，为临床检测提供指导依据。方法 613份痰标本于2009年9月至2010年4月收集自厦门市疾病预防控制中心、厦门市第一医院和漳州市疾病预防控制中心。结核分枝杆菌H37Rv标准株来源于国家结核病参比实验室。37株包含结核与非结核分枝杆菌的标准盘由中国药品生物制品检定所提供。首先采用梯度稀释的野生型标准株H37RvDNA考察探针熔解曲线分析法的分析灵敏度，然后用标准盘验证其检测特异性，最后以测序法为对照方法，采用613份结核分枝杆菌的标本评价该方法的临床应用价值。结果 探针熔解分析法可检测到3拷贝／反应，且能特异检测结核分枝杆菌。613份结核分枝杆菌的检测结果显示，符合要求的583份标本的试剂盒检测结果与测序结果完全一致，其中embB306突变菌株数为34株，embB378—380突变菌株数为23株，embB406突变菌株数为3株，embB497突变菌株数为3株。结论 探针熔解分析法检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变特异性好，灵敏度高，能有效地检测临床标本常见乙胺丁醇耐药突变位点，是值得推广的快速检测方法。

2011年厦门市某医院十例无菌性脑炎暴发病例病原学分析

目的对2011年5月11-17日厦门某医院收治的10例无菌性脑炎患者进行病原学鉴定。方法采集10例患者的咽拭子、肛拭子及部分患者的脑脊液，进行总肠道病毒核酸检测。总肠道病毒核酸阳性的样本，分别用肠道病毒A、B、C基因型各自的VP1通用引物扩增，VP1区扩增阳性的标本测序后进行序列分析。同时，用Vero细胞进行病毒分离培养，对培养成功的病毒与原始临床标本进行VP1序列同源性分析，从而对引发本次脑炎的病原进行鉴定。结果10例脑炎患者中，有7例患者的临床标本总肠道病毒核酸检测阳性。这7例患者的咽拭子和（或）肛拭子标本肠道病毒B基因型VP1通用引物扩增阳性，测序后分析表明均为肠道病毒B基因型埃可病毒30（Echo30），且与浙江2004年流行毒株的同源性达95．3％～97．1％。其中编号为XM2、XM3、XM4、XM8的咽拭子和XM3、XM6的肛拭子相互间序列同源性为99．4％-100．0％，但与XM1的咽拭子序列存在差异，同源性为92．8％-93．4％。此外，XM1、XM2、XM3、xM4、XM8咽拭子标本Vero细胞分离培养病毒成功，其VP1区部分序列与相应的原始标本同源性大于99．9％。结论导致这次无菌性脑炎的病原体为肠道病毒B基因型Echo30，并提示可能存在多种不同遗传背景的Echo30在流行。

厦门市2008～2010年HIV抗体筛查阳性标本复检及确证情况分析

目的:分析厦门市HIV抗体筛查实验室检测情况,为指导监测检测工作提供依据,以促进实验室网络检测能力提高。方法:采用一种ELISA试剂和一种快速法试剂对2008～2010年厦门市各HIV抗体筛查实验室初筛阳性送检的799份样本进行复检,采用WB试剂对复检阳性标本进行确证,并对其检测结果分析比较。结果:经复检,有402份HIV抗体两种方法均为阴性(402/799,50.3%),血站送检样本复检阴性率(199/236,84.3%)显著高于医疗和疾控系统;医疗和疾控系统3年来送检样本复检阴性呈现逐年降低的趋势。ELISA和快速法双阳性与WB的阳性符合率为97.8%。HIV抗体不确定的WB带型中p24出现几率最高。结论:三年来厦门市HIV抗体筛查实验室检测质量在逐步提高,但仍需进一步加强实验室规范化管理;应加强对HIV抗体不确定受检者的随防检测。

基于多位点探针熔解曲线的霍乱弧菌快速分型方法研究

目的研究基于探针熔解曲线分析的多位点熔解分型技术（McMLMT）的霍乱弧菌快速分型方法。方法选取厦门市CDC于1998-2010年霍乱病原监测中从各种水体和水产品等监测样品中分离的霍乱弧菌分离株（ctx-）作为试验菌株，共108株。筛选霍乱弧菌7个管家基因，针对每个基因设计特异引物和覆盖多态性位点的4条荧光探针，建立各基因的双管双色PCR熔解曲线分析（PCR—MCA）检测体系，检测108株试验菌株，获取28个熔点值（Tm值），转化为等位基因编码并确定型别。同时对7个管家基因的多态性区域序列参照多位点序列分型方法（MLST法）进行分型。两种方法的分型数据以BioNumerics软件进行聚类分析比较，并与其中部分菌株PFGE分型数据比较，评估McMLMT的分辨能力和可靠性。结果构建并优化了霍乱弧菌McMLMT分型体系。应用McMLMT分型体系检测霍乱弧菌，108株霍乱弧菌的28个Tm值按管家基因分组并依顺序编码后，可分为18型（D=0．7233）；同时参照MLST方法直接以7个基因的多态性区域序列进行分型，分型结果与McMLMT一致；其中46株PFGE型别不同的菌株，McMLMT法可分为13个熔解类型（D=0．6145），PFGE法可分为A～K的11群（相似度为85％，D=0．8589）。结论采用McMLMT分型方法可以对批量菌株进行快速分型，分辨力与MLST法相同，与PFGE法在相似度为85％分群的分辨力相似。

4重荧光PCR技术在霍乱监测与菌株鉴定的应用研究

目的应用4重荧光PCR技术检测霍乱弧菌并对菌株进行鉴定。方法用PCR法对2008—2010年监测的水样、水产品标本及食物中毒疑似菌株以进行检测,同时用细菌学方法分离菌株,再进行PCR检测。结果 1 606份标本中,PCR法检出O1群霍乱弧菌阳性标本188份,从中分离到菌株150份(79.8%),O139群霍乱弧菌的PCR检测结果和分离结果均为阴性,其符合率为97.6%(1 568/1 606);用PCR法发现大量水产品带有非O1非O139群霍乱弧菌而ctxA阴性,但从中分离到1株ctxA阳性的菌株。结论 4重荧光PCR技术检测效果良好,灵敏度高于常规细菌学方法,可在霍乱弧菌检验中作为筛检和菌株鉴定的快速方法。

应用探针熔解分析法检测结核分枝杆菌rpoB基因突变

目的 研究结核分枝杆菌利福平耐药突变实时PCR检测试剂盒（探针熔解分析）的临床应用价值.方法 用37株非结核分枝杆菌考察该方法的特异性,用菌株H37Rv考察其检测限,并检测962份结核分枝杆菌培养标本的rpoB基因利福平耐药决定区突变,检测结果经测序验证.结果 37株非结核分枝杆菌中仅有3株出现耐药突变峰,检测限考察结果表明该方法每反应可重复检出30个菌.用该试剂盒检测962份标本,检出突变株186份,野生株751份,扩增失败标本25份.选取2009年11月以后的标本中试剂盒检出为突变的标本112份,并数字表法随机选取200份试剂盒检出为阴性的标本,进行测序验证,除5份测序失败其余107份标本的DNA序列分析结果与试剂盒检测结果一致.结论 该试剂盒准确快速,方便易行,是检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的有力工具.