不同凋亡水平T细胞来源的ALD-DNA对抗双链DNA抗体产生的影响

研究不同凋亡水平T细胞来源的ALD-DNA(activated lymphocyte-derived DNA)对抗双链DNA抗体产生的影响。用尼龙毛柱法分离小鼠脾脏T细胞,分别提取不同凋亡水平T细胞的DNA定义为未凋亡ALD-DNA、低凋亡水平ALD-DNA、中凋亡水平ALD-DNA和高凋亡水平ALD-DNA,并免疫同系BALB/c小鼠;用ELISA方法检测血清中IgG类抗双链DNA抗体的水平及其亚型;用考马斯亮蓝法检测免疫小鼠尿蛋白的含量。结果显示,ALD-DNA的凋亡水平与其诱导产生的抗双链DNA抗体水平成正相关,二者的相关系数r=0.852;不同凋亡水平的ALD-DNA诱导的抗双链DNA抗体均以IgG1为主,但IgG2a和IgG2b的水平在高凋亡ALD-DNA免疫组有明显增高;低凋亡ALD-DNA、中凋亡ALD-DNA和高凋亡ALD-DNA免疫小鼠均有显著蛋白尿形成,并且高凋亡ALD-DNA免疫组的尿蛋白含量有明显增高。该结果表明,高凋亡水平的ALD-DNA免疫同系小鼠更易诱导高水平的致病性IgG类抗双链DNA抗体产生,凋亡DNA可能在系统性红斑狼疮(SLE)发生发展过程中发挥了重要作用,这为我们能更加深入的理解SLE的发生机制提供了有力的实验依据。

一株抗双链DNA单克隆抗体的制备及其特性研究

制备抗双链DNA（dsDNA）单克隆抗体并对其生物学特性进行初步研究.以活化淋巴细胞的DNA为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体;用体内诱生法制备腹水,以间接酶链反应吸附试验（ELISA）法分析抗体的亚类、特异性和亲和力;用免疫荧光法检测抗体的荧光核型;用考马斯亮蓝法检测注入杂交瘤细胞的小鼠的尿蛋白含量.结果显示,成功获得了1株持续稳定分泌抗dsDNA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为6C2;该细胞株所分泌的抗体亚类为小鼠IgG2a,能特异性结合dsDNA,亲和力常数为2.67×10^8 mol/L,免疫荧光核型为均质型;将6C2细胞注入正常BALB/c小鼠腹腔后,小鼠的尿蛋白含量较对照组明显增高.结果表明,抗dsDNA单克隆抗体6C2是致病性抗体,对于进一步研究抗dsDNA抗体的致病机制具有重要的价值.

T细胞在肺上皮细胞损伤与修复中的作用和机制

肺上皮细胞在呼吸系统中起着重要的保护作用。然而,各种病理因素如感染、创伤和炎症等可以导致肺上皮细胞的损伤,进而引发呼吸系统疾病。在肺上皮细胞损伤和修复过程中,T细胞扮演着关键角色,并通过接触或者释放多种免疫介质来参与这一过程。不同亚群的T细胞分别承担着增强抗炎反应、清除感染的致炎作用以及促进血管新生和上皮细胞增殖的修复作用。本综述旨在总结T细胞在肺上皮细胞损伤和修复中的作用,并阐述其参与肺疾病发病和缓解的可能机制。

改良抗原捕获ELISA在血小板抗体检测及配型中的应用

目的探讨改良抗原捕获ELISA(MACE)在血小板抗体检测及配型中的应用。方法采用MACE分别检测青岛地区医院送检48例血小板输注无效(PTR)患者血清中的血小板同种抗体和32例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆中的血小板自身抗体,并为PTR患者进行血小板配型。结果PTR患者血小板同种抗体检出率为50%(24/48),其中同种HPA抗体阳性率为29.2%(14/48),同种HLA抗体阳性率为39.6%(19/48),抗-HLA占所有免疫性抗体的70.4%(19/24)。ITP患者血浆游离抗体检出率62.5%,其中抗体阳性者全部检出自身抗体,而且全部有抗自身HPA抗体。选择配合性血小板52个治疗量输注,输注后24小时CCI值为(11.35±2.78)×109/L,总有效率82.3%。结论MACE法可以常规应用于PTR患者的血小板抗体检测及配型;MACE法检测血浆中游离的血小板自身抗体可做为辅助诊断ITP的一种方法。

机采血小板保存期内活化分析及临床意义

目的通过分析机采血小板在保存期内的活化水平,探讨其对临床血小板输注效果的影响。方法用流式细胞仪三色免疫荧光标记法对30份机采血小板保存前、保存后d1、d3、d5活化指标PAC-1、CD62P进行检测,ELISA法检测同时点Solube CD62P含量及变化。结果随着保存时间延长,流式分析结果显示血小板PAC-1、CD62P表达率水平显著升高(P<0.05),ELISA法检测sCD62P含量也显著增高(P<0.05)。结论随着保存时间延长,血小板活化水平显著增高,可能在影响血小板临床输注效果中具有重要意义。

STR-PCR定量检测嵌合体供者嵌合率准确性探讨

目的探讨用荧光标记复合扩增短串联重复序列(STR-PCR)结合序列分析仪毛细管电泳法检测嵌合体供者细胞嵌合率的准确性。方法采集健康献血者外周血按白细胞比例两两混合制备不同供受者比例的体外嵌合体模型,对15个STR位点进行荧光标记复合扩增,扩增产物进行序列分析仪毛细管电泳,计算嵌合率。结果实验测得嵌合率与扩增前样本嵌合率呈显著直线相关,r=0.999 7,最小检出供者细胞嵌合率<1%。供者嵌合率≥5%的嵌合体模型嵌合率的检测值与理论值差别无统计学意义(P>0.05),<5%的模型嵌合率检测值与理论值差别有统计学意义(P<0.05)。结论荧光标记复合扩增STR基因结合序列分析仪毛细管电泳检测嵌合率方法个体识别力高、特异、敏感,当供者嵌合率≥5%时能准确反映异基因造血干细胞移植后患者的嵌合状态。

少白细胞单采血小板储存期间细胞因子的变化及意义

目的探讨少白细胞单采血小板储存期间细胞因子分泌的变化及其意义。方法采用ELISA法检测少白细胞单采血小板保存期内CCL5、IL-1β、IL-8、PDGF-AB和TNF-α水平变化。结果白细胞源性细胞因子IL-1β、IL-8和TNF-α水平变化无统计学意义,血小板源性细胞因子CCL5和PDGF-AB随保存期延长显著升高。结论少白细胞单采血小板在保存期内CCL5和PDGF-AB显著增高,可能在血小板输注反应中具有重要意义。

C型凝集素受体对固有免疫应答的双向调节作用

C型凝集素受体（CLR）是模式识别受体家族中有别于TLR的新家族，在机体免疫应答中发挥着重要作用。近年来，人们对CLR对固有免疫应答的调节作用进行了较为广泛的研究，越来越多的研究发现CLRs对固有免疫应答具有双向调节作用：不同的CLR在固有免疫应答中既可以发挥正性调节作用，也能够发挥负性调节作用；在针对不同的病原体或在抗原提呈细胞不同的成熟状态等条件下，同-CLR在固有免疫应答中也可以发挥正负调节两方面的作用。深入探讨CLR对固有免疫应答的双向调节作用，对于进一步理解免疫应答的精细调节及疾病发病机制的复杂性等都有重要的理论意义，同时也为许多疾病的预防与治疗提供了一种新的策略。

凋亡DNA对巨噬细胞的活化作用及其意义

为研究活化诱导的凋亡淋巴细胞来源的DNA(凋亡DNA)对小鼠巨噬细胞的体外活化作用,用ConA活化小鼠脾脏淋巴细胞并诱导其凋亡,将AnnexinV+凋亡细胞来源的DNA定义为凋亡DNA,而正常淋巴细胞来源的DNA定义为正常DNA,分别与小鼠巨噬细胞株RAW264.7体外孵育48 h,然后用碘化丙啶(PI)染色方法观察细胞吞噬的DNA平均荧光强度(MFI),流式细胞仪测定细胞表面分子的表达,ELISA检测II型干扰素(IFN-γ)、白细胞介素12(IL-12)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的分泌情况。结果显示:凋亡DNA和正常DNA都能被RAW264.7有效地吞噬;然而,凋亡DNA较正常DNA能显著上调RAW264.7细胞表面MHC II类分子以及协同刺激分子CD40、CD80、CD86的表达,同时能够诱导细胞分泌高水平的IFN-γ、IL-12和TNF-α。表明正常DNA对巨噬细胞无活化作用,而凋亡DNA对巨噬细胞有很强的活化作用,可上调巨噬细胞的APC功能并促使其分泌多种细胞因子。提示凋亡的自身DNA作为免疫原,可有效活化巨噬细胞。

miRNA与淋巴瘤发病机制的研究进展

目的:总结microRNA在淋巴瘤发病机制中的研究进展。方法:应用CNKI期刊全文数据库系统,以"microRNA和淋巴瘤"为关键词,检索2004-2011年文献,共检索到英文文献306篇;纳入标准:1)MicroRNA的一般特性;2)MicroRNA与非霍奇金淋巴瘤发生、发展的关系;3)Mi-croRNA与霍奇金淋巴瘤发生、发展的关系;根据纳入标准符合分析的文献37篇。结果:MicroRNA在淋巴瘤组织和正常组织中存在差异性表达,既具有抑癌基因的作用,亦可发挥癌基因的作用,参与淋巴瘤细胞的分化、增殖和凋亡,并呈现出MicroR-NA介导的网络性调控。结论:MicroRNA在淋巴瘤的发病机制中具有重要作用,有可能为淋巴瘤的诊断和治疗带来新的思路。

海藻糖对液态低温保存机采血小板凋亡的影响

目前供应临床的血小板成分主要是常温（22±2）℃液态连续振荡保存的血小板，但研究表明22℃常温振荡储存易使血小板遭受细菌污染，污染几率是低温储存的50倍，输入体内后可能会造成机体败血症的发生，并且储存时间不足5d。深低温可长期大量储存血小板，

Toll样受体9在慢性乙型肝炎患者外周血中的差异性表达

有研究显示Toll样受体9（TLR9）在临床慢性乙型肝炎患者外周血中的表达水平上调，提示TLR9可能在机体抗HBV应答中具有重要作用，本研究进一步探讨TLR9在慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）中的表达水平及其对炎性细胞因子分泌的影响。