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国产乌司他丁对丝氨酸蛋白酶抑制效果的体外研究
被引量:
1
1
作者
陈健文
张仁伟
+4 位作者
温炜杰
黎思彤
刘翠
刘培庆
李民
《中国生化药物杂志》
CAS
2015年第8期15-18,共4页
目的系统比较国产乌司他丁对凝血和抗凝血系统中的凝血因子10、纤溶酶、凝血酶、激肽原酶以及多形核粒细胞弹性蛋白酶活性的抑制效果,为临床研究的剂量选择提供依据。方法设计合成生色底物,分别采用灵敏的荧光检测方法,优化反应过程酶...
目的系统比较国产乌司他丁对凝血和抗凝血系统中的凝血因子10、纤溶酶、凝血酶、激肽原酶以及多形核粒细胞弹性蛋白酶活性的抑制效果,为临床研究的剂量选择提供依据。方法设计合成生色底物,分别采用灵敏的荧光检测方法,优化反应过程酶和底物的浓度。采用多点法测定并计算乌司他丁对各种丝氨酸蛋白酶的半数抑制率。结果乌司他丁可以明显抑制多型核粒细胞弹性蛋白酶(polymorphonuclear leukocyte elastase,PMNE)和纤溶酶,IC50均低于100 U/m L。对凝血因子Xa以及激肽原酶抑制均高于1000U/m L,但对凝血酶无抑制作用。结论国产乌司他丁对PMNE的抑制效果最强,与日本同类产品对这几种丝氨酸蛋白酶的抑制效果相似,为其在抗炎、抗凝、促凝及抗休克效果中选择合适的剂量区间提供了可靠数据。
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关键词
乌司他丁
抗凝血
丝氨酸蛋白酶
荧光检测
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职称材料
NSUN2通过靶基因PRPS2调控核苷酸代谢从而介导肝癌细胞的增殖
被引量:
6
2
作者
黄奕芝
杨紫青
+3 位作者
温炜杰
唐勤
方乐堃
李孟鸿
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期640-645,共6页
目的:探讨NOP2/Sun RNA甲基转移酶家族成员2(NOP2/Sun RNA methyltransferase 2,NSUN2)在肝癌发展中的功能和机制。方法:比较肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)肝癌数据集中肝癌组织与正常组织NSUN2的mRNA表达水平;Western ...
目的:探讨NOP2/Sun RNA甲基转移酶家族成员2(NOP2/Sun RNA methyltransferase 2,NSUN2)在肝癌发展中的功能和机制。方法:比较肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)肝癌数据集中肝癌组织与正常组织NSUN2的mRNA表达水平;Western blot检测9对肝癌患者肝癌组织与癌旁组织中NSUN2的蛋白表达水平;Kaplan-Meier法分析肝癌TCGA数据集中NSUN2对肝癌生存预后的影响;活细胞动态成像与分析系统记录经shNSUN2慢病毒感染的Huh7和SNU182细胞的实时生长情况及集落形成实验检测细胞增殖能力;基因富集分析(GSEA)肝癌TCGA数据库中高表达NSUN2组富集的信号通路,探索NSUN2可能甲基化的关键基因和参与的信号通路;Pearson法分析TCGA数据集中NSUN2与预测基因的相关性;在SNU182细胞中敲低NSUN2后,用RT-qPCR和Western blot验证预测基因表达的变化。结果:TCGA数据集分析结果及Western blot实验结果显示NSUN2在肝癌组织中高表达。敲低NSUN2后Huh7细胞和SNU182细胞的增殖能力降低。基因富集分析结果显示嘌呤和嘧啶代谢通路在高表达NSUN2组富集。重亚硫酸盐甲基化测序(Bisulfite-Seq)结果与基因富集分析结果存在共同变化基因有PRPS2、ADSL、POLR2D、CANT1、ENTPD4、TXNRD1和CAD。Pearson相关分析结果显示TCGA数据集中NSUN2与PRPS2的mRNA表达呈正相关(r=0.3283,P<0.05)。RT-qPCR和Western blot结果验证了敲低NSUN2后抑制了SNU182细胞中PRPS2的mRNA和蛋白表达。RT-qPCR结果显示敲低NSUN2后嘌呤从头合成相关基因的表达降低。结论:NSUN2可能通过调控PRPS2的表达参与核苷酸代谢,从而影响肝癌细胞增殖。
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关键词
NSUN2
肝癌
细胞增殖
PRPS2
核苷酸代谢
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职称材料
题名
国产乌司他丁对丝氨酸蛋白酶抑制效果的体外研究
被引量:
1
1
作者
陈健文
张仁伟
温炜杰
黎思彤
刘翠
刘培庆
李民
机构
中山大学药学院新药筛选中心
出处
《中国生化药物杂志》
CAS
2015年第8期15-18,共4页
文摘
目的系统比较国产乌司他丁对凝血和抗凝血系统中的凝血因子10、纤溶酶、凝血酶、激肽原酶以及多形核粒细胞弹性蛋白酶活性的抑制效果,为临床研究的剂量选择提供依据。方法设计合成生色底物,分别采用灵敏的荧光检测方法,优化反应过程酶和底物的浓度。采用多点法测定并计算乌司他丁对各种丝氨酸蛋白酶的半数抑制率。结果乌司他丁可以明显抑制多型核粒细胞弹性蛋白酶(polymorphonuclear leukocyte elastase,PMNE)和纤溶酶,IC50均低于100 U/m L。对凝血因子Xa以及激肽原酶抑制均高于1000U/m L,但对凝血酶无抑制作用。结论国产乌司他丁对PMNE的抑制效果最强,与日本同类产品对这几种丝氨酸蛋白酶的抑制效果相似,为其在抗炎、抗凝、促凝及抗休克效果中选择合适的剂量区间提供了可靠数据。
关键词
乌司他丁
抗凝血
丝氨酸蛋白酶
荧光检测
Keywords
Ulinastatin
anti-coagulant
serine protease
fluorescence detection
分类号
R96 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
NSUN2通过靶基因PRPS2调控核苷酸代谢从而介导肝癌细胞的增殖
被引量:
6
2
作者
黄奕芝
杨紫青
温炜杰
唐勤
方乐堃
李孟鸿
机构
中山大学附属第六医院胃肠病学研究所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期640-645,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81630072)。
文摘
目的:探讨NOP2/Sun RNA甲基转移酶家族成员2(NOP2/Sun RNA methyltransferase 2,NSUN2)在肝癌发展中的功能和机制。方法:比较肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)肝癌数据集中肝癌组织与正常组织NSUN2的mRNA表达水平;Western blot检测9对肝癌患者肝癌组织与癌旁组织中NSUN2的蛋白表达水平;Kaplan-Meier法分析肝癌TCGA数据集中NSUN2对肝癌生存预后的影响;活细胞动态成像与分析系统记录经shNSUN2慢病毒感染的Huh7和SNU182细胞的实时生长情况及集落形成实验检测细胞增殖能力;基因富集分析(GSEA)肝癌TCGA数据库中高表达NSUN2组富集的信号通路,探索NSUN2可能甲基化的关键基因和参与的信号通路;Pearson法分析TCGA数据集中NSUN2与预测基因的相关性;在SNU182细胞中敲低NSUN2后,用RT-qPCR和Western blot验证预测基因表达的变化。结果:TCGA数据集分析结果及Western blot实验结果显示NSUN2在肝癌组织中高表达。敲低NSUN2后Huh7细胞和SNU182细胞的增殖能力降低。基因富集分析结果显示嘌呤和嘧啶代谢通路在高表达NSUN2组富集。重亚硫酸盐甲基化测序(Bisulfite-Seq)结果与基因富集分析结果存在共同变化基因有PRPS2、ADSL、POLR2D、CANT1、ENTPD4、TXNRD1和CAD。Pearson相关分析结果显示TCGA数据集中NSUN2与PRPS2的mRNA表达呈正相关(r=0.3283,P<0.05)。RT-qPCR和Western blot结果验证了敲低NSUN2后抑制了SNU182细胞中PRPS2的mRNA和蛋白表达。RT-qPCR结果显示敲低NSUN2后嘌呤从头合成相关基因的表达降低。结论:NSUN2可能通过调控PRPS2的表达参与核苷酸代谢,从而影响肝癌细胞增殖。
关键词
NSUN2
肝癌
细胞增殖
PRPS2
核苷酸代谢
Keywords
NSUN2
Liver cancer
Proliferation
PRPS2
Nucleotide metabolism
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
R730.23 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
国产乌司他丁对丝氨酸蛋白酶抑制效果的体外研究
陈健文
张仁伟
温炜杰
黎思彤
刘翠
刘培庆
李民
《中国生化药物杂志》
CAS
2015
1
下载PDF
职称材料
2
NSUN2通过靶基因PRPS2调控核苷酸代谢从而介导肝癌细胞的增殖
黄奕芝
杨紫青
温炜杰
唐勤
方乐堃
李孟鸿
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
6
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职称材料
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