微生物验证试验中枯草芽孢杆菌菌悬液制备的探讨

目的探讨采用培养7d芽孢量达到85%以上的枯草芽孢杆菌菌悬液代替培养18～24h的菌悬液作为微生物菌落计数方法验证用菌液的可行性。方法选取对枯草芽孢杆菌有抑制作用的6种药品,按《中国药典》2005年版附录微生物限度检查法的要求,采用2种菌悬液分别进行微生物验证试验,对验证结果进行比较。结果2种菌悬液对同一供试品的验证结果保持一致。结论采用培养7d的枯草芽孢杆菌菌悬液作为微生物验证用菌液是可行的且更为合理。

复方鱼腥草片微生物限度检查方法的探讨

目的:建立适合复方鱼腥草片的微生物限度检查方法,促进以品种确定方法工作的开展。方法:对由6个生产企业提供的涉及常规法、培养基稀释法、离心沉淀集菌法的复方鱼腥草片细菌计数检查方法,按《中国药典》2005年版一部附录的要求进行再验证。结果:验证数据分析结果表明,6个生产企业的样品采用培养基稀释法进行细菌计数方法检查,试验菌回收率均达到要求。结论:可将复方鱼腥草片的微生物限度细菌计数检查方法统一为培养基稀释法。

注射用头孢菌素类抗生素有关物质检查的稳定性研究

目的通过考察7个临床常用的注射用头孢菌素类抗生素品种的有关物质检查供试品溶液的稳定性,分析实验过程中环境温度及放置的时间对有关物质的影响,为该类药品的规范检验提供参考数据。方法将临床常用的7个注射用头孢菌素类抗生素品种共19批次分别按法定标准配制成有关物质检查的供试溶液,分别在4、25、35℃的条件下放置,依法测定24h内有关物质的量的变化。结果供试溶液的放置时间及实验环境温度直接影响检测结果的准确性,温度越高,放置时间越长,稳定性越差。在4℃中7个品种稳定性均好,可达24h。有些对热敏感的品种,35℃的条件下稳定时间不足2h。结论检查注射用头孢菌素类抗生素有关物质时,应注意供试溶液的稳定性,控制试验温度及放置时间,做到现配现用。

薄层色谱法检测化妆品中的氯霉素

目的:参照2000版中国药典中的薄层色谱方法检测化妆品中氯霉素。方法:用乙醇进行提取,以硅胶GF254预制板为载体、三氯甲烷-甲醇(85:15)为展开剂的薄层条件鉴别化妆品中的氯霉素。结果:样品最小检测限度为1.0 mg/g,对市售12个品种的化妆品进行检测,其中3个品种检出氯霉素。结论:该方法准确、简便、快速,重现性好,适用于化妆品中氯霉素的快速检测。

2种含硫磺制剂的微生物限度检查方法验证

目的建立硫软膏和复方硫磺洗剂2种含硫磺的医院制剂的微生物限度检查方法。方法采用常规法、培养基稀释法、离心沉淀结合培养基稀释法及薄膜过滤法对样品进行微生物限度检查,根据对5种标准试验菌株的回收率进行数理统计。结果硫软膏细菌计数采用一次离心沉淀方法结合培养基稀释法,霉菌、酵母菌计数及控制菌检查采用一次离心沉淀方法;复方硫磺洗剂为混悬制剂,采用一次离心沉淀法结合薄膜过滤法可有效去除抑菌成分。结论经验证的上述微生物限度检查方法,可以客观地反映硫软膏、复方硫磺洗剂中微生物的污染状况,可行性强,能达到检测目的。

盐酸左氧氟沙星片含量测定方法比较

目的对盐酸左氧氟沙星片的不同含量测定方法进行比较,确定该品种含量测定的最佳方法。方法分别采用以水作溶剂的紫外分光光度法、以0.1mol/LHCL作溶剂的紫外分光光度法(改进法)和以0.03mol/LHCL作溶剂液相色谱法3种不同的方法,对不同厂家的3批盐酸左氧氟沙星片进行含量测定,并对结果进行分析比较。结果以0.1mol/LHCL作溶剂的紫外分光光度法(改进法)和液相色谱法能准确地测定药品质量,且两法测定结果基本一致。结论紫外分光光度法准确、简便、快速,建议作为药品生产单位的质控检验标准。

薄层色谱法鉴别化妆品中的红霉素

参照现版药典中的薄层色谱方法检测化妆品中红霉素。用甲醇进行提取，以硅胶G预制板为载体，三氯甲烷-甲醇（85：15）为展开剂，乙醇-对甲氧基苯甲醛-硫酸（90：5：5）为显色剂的薄层条件鉴别化妆品中的红霉素，其检测限度可达1．2mg／g。该方法准确、简便、快速，重现性好，适用于化妆品中红霉素的检测。

蒿甲虚热清颗粒对利血平和甲状腺素致阴虚模型小鼠的影响

目的研究蒿甲虚热清颗粒对阴虚模型小鼠的影响。方法采用甲状腺素和利血平建立小鼠阴虚模型,给予不同剂量的蒿甲虚热清颗粒灌胃6 d,观察其对阴虚模型小鼠体质量、疼痛、血糖、免疫功能等指标的影响。结果与正常对照组比较,阴虚模型小鼠体质量和存活率下降,痛觉增敏(增加扭体次数),血糖、脾系数和胸腺系数显著下降,抑制迟发型超敏反应(DTH),差异有统计学意义;蒿甲虚热清颗粒能明显增加阴虚动物的体质量、增加阴虚动物存活率,降低痛反应(减少扭体次数)、升高血糖、增加脾指数、胸腺指数,增强DTH,与模型组比较,差异有统计学意义。结论蒿甲虚热清颗粒能改善阴虚模型小鼠体征,具有一定的镇痛、升高血糖和增强机体免疫功能。

黄草乌及其炮制品对心脏毒性的作用和机制研究

目的:研究黄草乌炮制前后对心脏的毒性作用及机制。方法:采用小鼠十二指肠注射给予黄草乌混悬液,观察小鼠心电图和心率变化;不同浓度滇乌碱作用于H9c2心肌细胞后,采用MTT法检测心肌细胞活力;倒置显微镜观察心肌细胞的形态;试剂盒检测心肌细胞中LDH、MDA和SOD的变化情况;流式细胞术和RT-PCR法检测心肌细胞凋亡情况及凋亡基因Caspase-3 mRNA表达量。结果:与正常对照组比较,黄草乌心电图的QRS波异常,心率明显减慢;而制黄草乌组心电图的QRS波较正常。滇乌碱作用H9c2心肌细胞24 h后,IC50值为97.63μmol/L;与正常对照组比较,100、50μmol/L滇乌碱和50μmol/L乌头碱能显著提高细胞上清液中的LDH和MDA含量,100、50、10μmol/L滇乌碱和50μmol/L乌头碱能显著降低SOD的活性以及增加心肌细胞的凋亡率和Caspase-3 mRNA的表达量;与50μmol/L乌头碱组比较,50、10μmol/L滇乌碱组的LDH和MDA含量、细胞凋亡率及Caspase-3 mRNA的表达量均有显著性差异。10μmol/L滇乌碱仅SOD活性与正常对照组有显著性差异。结论:黄草乌对心脏有明显毒性,炮制后毒性减小。在相同浓度下,乌头碱对心肌细胞的毒性大于滇乌碱。

红景天苷-胶原蛋白海绵支架的构建及其对大鼠皮肤创伤的修复作用

目的构建红景天苷-胶原蛋白海绵支架,并探讨其修复大鼠皮肤创伤的效果。方法(1)采用冷冻干燥法制备红景天苷-胶原蛋白海绵支架。扫描电子显微镜观察其内部结构,乙醇渗透法检测其孔隙率,高相液相法检测药物体外释放量。(2)将24只SD大鼠随机分为模型组、胶原蛋白海绵支架组和红景天苷-胶原蛋白海绵支架组各8只。3组均建立全层皮肤切除模型,模型组创口不做其他处理,两个支架组植入相应的支架后包扎。造模后第7、14、21、28天,计算各组创口愈合率,镜下观察创面组织病理学变化,并测量造模后第28天新生上皮厚度。结果(1)红景天苷-胶原蛋白海绵支架具有高互联性和高孔隙率结构,药物释放不受影响。(2)在造模后各个时间点两个支架组的创口愈合率均大于模型组(均P<0.05),造模后第14天红景天苷-胶原蛋白海绵支架组的创口愈合率大于胶原蛋白海绵支架组(P<0.05),造模后第28天两个支架组大鼠的创口基本愈合。造模后第28天3组创面组织达完全再上皮化,新生表皮各层分化良好,但只有红景天苷-胶原蛋白海绵支架组的新生上皮厚度接近正常皮肤(P>0.05),并有附属器形成。结论红景天苷-胶原蛋白海绵支架可成功构建,其能够促进皮肤创口的修复和皮肤的再上皮化。

TBL结合PBL教学对大学生病生课程学习的促进作用研究

病理生理学是联系基础医学和临床医学的桥梁学科,提高其教学质量是重中之重。在病理生理学教学中尝试采用PBL与TBL相结合教学方法,将其与传统教学模式进行对比,探索新型教学方法的作用效果。结果表明,采用PBL与TBL相结合教学方法有利于提高教学质量,一定程度上提高学生的学习成绩,并提高学习主观能动性、自学能力、综合分析能力和创新意识等素质,加强了团队合作能力和交际能力。

香鳞毛蕨有效部位体外抗犬小孢子菌作用及其机制研究

目的探讨香鳞毛蕨有效部位(DF)体外抗犬小孢子菌(Microsporum canis)的作用及机制。方法采用微量稀释法测定DF对M.canis的最低抑菌浓度(MIC)以及最低杀菌浓度(MFC),从生物量的生成、山梨糖醇保护试验、麦角甾醇结合试验、细胞泄漏以及对麦角甾醇含量的影响等角度,探究DF的抗菌机制。结果 DF对M.canis的MIC及MFC几何均值的范围分别为0.298～0.596 mg/mL和0.334～0.668mg/mL。与生长对照组相比,DF高剂量组、阳性药物组均能显著性降低M.canis的生物量和麦角甾醇的含量(P<0.01),和明显增加胞内物质的释放(P<0.01);无论是否加入外源性山梨糖醇和麦角甾醇,DF对M.canis的MIC值均无变化。结论 DF对M.canis具有良好的体外抗菌效果,其机制可能是通过影响麦角甾醇的合成,或破坏细胞的完整性而实现。

香鳞毛蕨有效部位乳膏对犬小孢子菌的影响

目的 探究香鳞毛蕨有效部位乳膏对犬小孢子菌(Microsporum canis)的体内外抗菌作用.方法 采用琼脂扩散法测定药物对抑菌圈直径的影响,试管药基法和微量稀释法测定香鳞毛蕨有效部位对12株M.canis的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC);绘制时间-杀菌曲线,动态评价香鳞毛蕨有效部位对M.canis的杀菌作用.建立M.canis致豚鼠体癣模型,皮肤病变评分、真菌学转阴率、组织病理学三方面综合评价香鳞毛蕨有效部位乳膏对M.canis的体内抗菌作用.结果 香鳞毛蕨有效部位高、中、低剂量对M.canis产生不同大小的抑菌圈.试管药基法和微量稀释法测定香鳞毛蕨有效部位对12株M.canis MIC范围为0.185~1.477 mg/mL和0.157 4~1.26 mg/mL,MFC范围为0.369~2.594 mg/mL和0.472 5~1.89 mg/mL;香鳞毛蕨有效部位高剂量组72 h时呈现明显杀菌作用.与模型组比较,香鳞毛蕨有效部位乳膏第14、21天均可降低豚鼠体癣模型皮损评分(P<0.05,P<0.01),给药21 d香鳞毛蕨有效部位乳膏低、中、高剂量转阴率分别为40%、60%、80%,PAS染色结果表明给药14、21 d,香鳞毛蕨有效部位乳膏可减少感染组织皮肤角质层孢子数.结论 香鳞毛蕨有效部位对M.canis有一定体内外抑菌和杀菌作用.

黄草乌炮制前后生物碱含量及心脏毒性差异研究

目的考察黄草乌炮制前后两种生物碱含量变化及其对心脏的毒性影响。方法采用UPLC法测定黄草乌炮制前后滇乌碱、8-去乙酰滇乌碱的含量;采用Bliss法测定黄草乌生品的大鼠半数致死量(LD50);连续ig给药14d,观察麻醉大鼠II导联心电图变化,检测血清中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的水平,观察心肌病理组织形态学变化等。结果黄草乌炮制前后滇乌碱的含量分别为263.96μg/g、未检出,8-去乙酰滇乌碱的含量分别为未检出、568.47μg/g;生品LD50为生药4.2 g/kg,炮制品最大给药量为生药18.0 g/kg;连续ig给药14 d,生品组麻醉大鼠先后出现室性早搏、室性二联律和室颤等,炮制品组前期出现心动过缓,60 min恢复正常;与对照组比较,生品组血清LDH和CK水平均显著升高(P<0.05),炮制品组只有LDH水平显著升高(P<0.05);生品组心肌纤维之间间隙明显扩大,炎细胞浸润明显;炮制品组心肌纤维排列较整齐,间质中可见个别炎细胞浸润。结论在所给的剂量下,黄草乌生品对心脏毒性较强,炮制后毒性明显降低。

八味痛风康微丸抗痛风作用的实验研究

目的:研究八味痛风康微丸的抗痛风作用。方法:采用尿酸盐结晶(MSU)致大鼠急性痛风性关节炎模型及次黄嘌呤所致的小鼠高尿酸血症模型,观察八味痛风康微丸的抗痛风作用,并通过热板法、醋酸扭体法和甲醛法观察该药的镇痛作用;利用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型、角叉菜胶致大鼠足肿胀模型、小鼠毛细血管通透性模型,观察该药的抗炎作用。结果:八味痛风康微丸16.4g/kg以上剂量可明显抑制尿酸盐结晶(MSU)诱导的大鼠足跖肿胀,降低血清IL-1β和TNF-α水平,并能降低次黄嘌呤所致高尿酸血症小鼠的血尿酸水平;能提高小鼠的痛阈值,减少醋酸所致小鼠的扭体次数,并能够降低甲醛致小鼠镇痛实验中足中PGE2含量;八味痛风康微丸也可抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性的增加,抑制角叉菜胶大鼠足趾肿胀和二甲苯致小鼠耳廓肿胀。结论:八味痛风康微丸具有抗痛风、镇痛、抗炎作用,其作用机制可能与降低炎症因子IL-1β、、TNF-α和PGE2水平有关。