水蛭对非酒精性脂肪肝病小鼠的保护作用及其机制

目的探讨水蛭对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠的保护作用及潜在机制。方法将雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠随机分为模型组和水蛭低、高剂量组(0.45、0.9 g/kg),每组10只;另取同周龄野生型雄性C57BL/6J小鼠10只,作为对照组。对照组小鼠以基础维持饲料喂养,其余各组小鼠以高脂饲料喂养12周以建立NAFLD模型。第13周,各药物组小鼠灌胃相应药液,每天1次,连续8周。末次给药后,测定各组小鼠的体重、肝脏质量,并计算肝脏指数;检测其血清核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;观察其肝组织病理形态学变化,并检测肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠肝组织可见较多的脂肪空泡和炎症细胞浸润,并有明显的脂质堆积;其体重、肝脏质量及肝脏指数和血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG、LDL-C水平均显著升高,血清HDL-C水平和肝组织中PPARγ、SIRT1蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,水蛭低、高剂量组小鼠肝组织病理改变均有所缓解;其体重、肝脏质量及肝脏指数和血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG、LDL-C水平均显著降低,血清HDL-C水平和肝组织中PPARγ、SIRT1蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论水蛭可能通过激活PPARγ、SIRT1蛋白的表达来调节肝脏脂质代谢、抑制炎症反应,从而发挥对NAFLD的改善作用。

水蛭对ApoE^(-/-)动脉粥样硬化小鼠自噬的影响

目的 探讨水蛭对动脉粥样硬化小鼠自噬的影响。方法 将40只健康雄性ApoE^(-/-)小鼠随机均分为模型组、对照组(3×10^(-3) g·kg^(-1)·d^(-1)辛伐他汀)及低、中、高剂量实验组(0.45、0.9、1.8 g·kg^(-1)·d^(-1)脉血康胶囊),8只健康雄性C57BL/6J小鼠为空白组。给予普通饲料适应性喂养1周后,除空白组外,其余各组采用高脂饲料喂养8周建立动脉粥样硬化小鼠模型,之后按照设定剂量灌胃给药,每日1次,连续给药12周,期间继续给予高脂饲料饮食。用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;用蛋白质印迹法检测Beclin-1、LC3自噬蛋白水平。结果 高、中、低剂量实验组和对照组、模型组、空白组的IL-6含量分别为(107.59±3.03)、(99.31±5.12)、(103.52±2.28)、(98.68±4.68)、(112.66±6.08)和(93.98±3.43)pg·mL^(-1),TNF-α含量分别为(538.41±30.26)、(504.49±21.51)、(538.51±19.05)、(494.05±25.08)、(578.53±26.32)和(467.35±21.53)pg·mL^(-1),模型组的上述指标与实验组、对照组和空白组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。高、中、低剂量实验组和对照组、模型组的Beclin-1蛋白表达水平分别为1.48±0.05、1.72±0.05、1.19±0.02、1.51±0.04和0.66±0.03,LC3Ⅱ蛋白表达水平分别为1.53±0.01、1.83±0.02、1.16±0.01、1.90±0.01和0.49±0.01,模型组的上述指标与低、中、高实验组和对照组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 水蛭可能通过调节斑块内细胞自噬水平,从而达到抗动脉粥样硬化的作用。

含水蛭中成药治疗动脉粥样硬化的网状Meta分析

采用网状Meta分析评价含水蛭中成药干预动脉粥样硬化的疗效及安全性,为动脉粥样硬化的临床治疗提供循证依据。计算机检索中国知网(CNKI)、万方(Wanfang)、维普(VIP)、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、PubMed、EMbase等,搜索有关含水蛭中成药干预动脉粥样硬化的随机对照试验(randomized controlled trial,RCT),检索时限为各数据库建库至2022年7月1日。采用Cochrane推荐的偏倚风险评估工具对纳入的RCT进行质量评价。应用Stata 17软件和ADDIS 1.16.5软件进行贝叶斯模型网状Meta分析。最终纳入67项RCTs,总样本量6826例,其中试验组3569例,对照组3257例,共纳入3种口服中成药。网状Meta分析结果表明,在降低动脉内膜-中层厚度(IMT)方面,排序前3的干预措施为通心络胶囊+他汀类>脉血康胶囊+他汀类>脉血康胶囊;在降低斑块面积方面,脉血康胶囊+他汀类为排序第1的干预措施,其余疗效相当;在降低斑块积分方面,排序前3的干预措施为脉血康胶囊>通心络胶囊+他汀类>脑心通胶囊;在降低斑块数量方面,排序前3的干预措施为脑心通胶囊+他汀类>通心络胶囊+他汀类>通心络胶囊;在不良反应发生方面,发生率最低的干预措施为脑心通胶囊+他汀类。含水蛭中成药治疗动脉粥样硬化的方案中,在降低IMT方面首选通心络胶囊+他汀类,在降低斑块积分方面首选脉血康胶囊,在降低斑块面积方面首选脉血康胶囊+他汀类,在降低斑块数量方面首选脑心通胶囊+他汀类。对于4项结局指标,含水蛭中成药联合或不联合他汀类均比单独口服他汀类效果好。因此,动脉粥样硬化的治疗应当综合评估,注重中成药联合化学药的应用,以治疗效果最佳化及不良反应最小化为基准。