飞龙掌血根的质量研究

【目的】建立飞龙掌血根的质量标准。【方法】采用薄层色谱法（TLC）对飞龙掌血根中氯化两面针碱和毛两面针素进行鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）测定飞龙掌血根中氯化两面针碱和毛两面针素的含量，同时参照《中国药典》附录相关方法，测定其水分、灰分含量。【结果】 TLC法可对飞龙掌血根中氯化两面针碱和毛两面针素进行鉴别，且斑点清晰，与其他成分分离度好； HPLC测定结果显示：氯化两面针碱在2.84～42.6μg／mL，毛两面针素在25.6～384μg／mL线性关系良好，平均回收率分别为99．2％（相对标准偏差sR＝1．12％）和100％（sR＝0．71％）；水分含量为75．8～98．9 mg／g，总灰分含量为12．4～33．6 mg／g。【结论】本研究所建立的方法专属性和准确性良好，可为飞龙掌血根质量标准的建立提供实验依据。

岗梅实时荧光定量PCR内参基因的筛选

为筛选适用于岗梅实时荧光定量PCR的内参基因。应用实时荧光定量PCR技术,分析18S r RNA(18S)、Actin(ACT)、α-tubulin(TUA)、β-tubulin(TUB)、Cyclophili(CYP)、Elongation factor 1-α(EF-1α)和Polyubiquitin(UBQ)共7个看家基因在岗梅的8个不同组织部位中的表达情况,并利用Ge Norm、Norm Finder和Best Keeper共3个软件对每个看家基因的表达稳定性进行评价。3个软件的分析结果均表明:18S、ACT和TUA看家基因的稳定性和相关性均较好,可在这3个看家基因中选择1个或以18S-ACT、18S-TUA组合作为岗梅基因研究的内参基因。

大黄等5味中药及单体成分对临床多重耐药菌的抑制作用

目的：研究大黄、丁香、蒲公英、姜黄、金银花5味中药及大黄素、芦荟大黄素、丁香酚、咖啡酸、绿原酸和姜黄素对临床多重耐药菌的抑制作用。方法：用微量稀释法测定各药物的最小抑菌浓度（MIC）。记录细菌连续24 h的吸光度A595,绘制生长曲线,用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析细菌可溶性蛋白质。结果：大黄的抑菌效果显著,MIC在6.25-12.50g·L^-1;丁香的抑菌谱最广,对所有实验菌株均有抑菌作用,MIC在3.13-25.00 g·L^-1,蒲公英、金银花和姜黄在本实验中未见抑菌活性;6种单体药物在实验中对铜绿假单胞菌均没有抑菌效果;大黄素、芦荟大黄素和丁香酚对金黄色葡萄球菌的抑菌效果优于其他临床耐药菌株;大黄素的抑菌效果显著,MIC在1.95-15.63 mg·L^-1;芦荟大黄素的抑菌效果稍弱,MIC在2.34-75.00 mg·L^-1;丁香酚是唯一对鲍曼不动杆菌有抑菌活性的单体化合物,MIC在5.32-10.64 mg·L^-1;姜黄素、咖啡酸、绿原酸在实验中未显示抑菌活性。大黄素作用下,金黄色葡萄球菌的生长及可溶性蛋白表达发生明显改变。结论：大黄和丁香以及大黄素和芦荟大黄素、丁香酚对金黄色葡萄球菌等多种临床多重耐药菌具有显著的抑制效果。大黄素、芦荟大黄素和丁香酚分别是大黄和丁香发挥抑菌作用的主要成分,其具体作用机制有待于深入研究。