DAPT在ox-LDL损伤HUVECs过程中的细胞保护作用

目的:探究γ-分泌酶抑制剂N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester(DAPT)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)损伤人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)模型中的细胞保护作用及其对Notch信号通路的调控。方法:体外培养HUVECs,用oxLDL处理HUVECs构建细胞损伤模型。实验分为对照组、ox-LDL处理组、DAPT处理组和DAPT+ox-LDL处理组。用倒置相差显微镜观察不同处理方法下细胞的形态变化;CCK-8法检测细胞存活率;Western blot法检测蛋白Notch1、Notch4和Jagged1的表达情况。结果:体外培养HUVECs,倒置相差显微镜下发现ox-LDL处理组细胞死亡和碎片增多,经DAPT预处理后,ox-LDL作用造成的细胞损伤死亡较少,细胞碎片较少。通过CCK-8法检测发现ox-LDL处理组细胞存活率降低,DAPT处理组细胞存活率升高,DAPT预处理后ox-LDL造成存活率降低的幅度变小。在ox-LDL作用下,Notch1和Jagged1蛋白表达量降低,Notch4表达量升高;而DAPT作用下Notch1和Jagged1表达量升高,Notch4表达量降低;ox-LDL与DAPT共同作用时蛋白接近正常水平。结论:ox-LDL对HUVECs具有损伤作用;DAPT减轻ox-LDL对HUVECs造成的损伤;DAPT保护HUVECs免受ox-LDL损伤的作用与Notch信号通路有关。