抗黑斑病月季品种初选研究

以北京地区的50个常用月季品种为试验对象,研究了品种不同时间、地域间抗病性差异,分析不同月季品种影响月季黑斑病抗性的因素和黑斑病病症变化过程,进行了抗黑斑病的月季品种筛选.结果表明:月季黑斑病发病与气候有关,年度、月度发病率与降水量呈正相关,5个不同抗性品种随生长情况表现出不同的适应性状表现.

采用国际生存质量量表评价肺积方治疗非小细胞肺癌患者生存质量

目的采用国际生存质量量表评价肺积方治疗非小细胞肺癌患者生存质量。方法将102例非小细胞肺癌患者随机分为两组,联合组(61例)接受肺积方治疗及化疗,对照组(41例)单纯接受化疗,共观察两个疗程。采用EORTCQLQ-C43与FACT-L两种国际生存质量量表作为测定工具,并以传统的临床疗效评价指标作为参照。结果联合组生存质量各领域包括功能子领域及症状子领域评分治疗后明显改善,对照组则明显下降,两组间比较差异有显著性(P<0·05);体能状态ECOG、KPS评分显示相似结果;联合组胃肠道反应及骨髓抑制反应较对照组轻(P<0·05);临床缓解率两组比较差异无显著性(P>0·05)。结论肺积方具有改善非小细胞肺癌患者生存质量,减轻化疗毒副反应,改善体能状态的作用。

中西医结合治疗91例老年晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的观察中西医结合疗法对老年晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)临床疗效的影响,为进一步研究提供临床依据。方法将91例老年晚期NSCLC患者随机分成中医组(31例)、化疗组(30例)及中医加化疗组(30例)。中医组采用中药汤剂加中成药静脉滴注治疗;化疗组单纯接受化疗方案治疗;中医加化疗组采用化疗方案治疗的同时服用中药汤剂,均以28天为1个周期,治疗2个周期。采用中医原发性肺癌症状分级量化表、骨髓抑制评分、无疾病进展生存期(progression-free survival,PFS)等作为疗效评价指标,同时建立Cox回归模型,分析对患者PFS产生影响的有利及危险因素。结果中医组与中医加化疗组治疗后中医症状积分优于治疗前,差异有统计学意义(P<0.01);中医加化疗组骨髓抑制发生率较化疗组低,骨髓抑制程度也较化疗组轻,但组间比较差异无统计学意义(P=0.097,P=0.299);PFS中医加化疗组为202天,中医组168天,化疗组129天,中医加化疗组优于化疗组(P=0.0157);经Cox回归模型分析,影响老年晚期NSCLC患者PFS有统计意义的预后因素有:治疗因素(中医治疗和中医加化疗为有利因素)、手术史(无手术史为有利因素)及治疗前行为状态评分(performance status,PS评分,1为有利因素)。结论中医药治疗可改善老年晚期NSCLC患者的症状;中医加化疗对老年患者PFS可能存在优势。

两种国际肺癌患者生活质量量表EORTC QLQ-LC43与FACT-L的比较

背景与目的:生活质量量表是生活质量评价的工具。选择恰当的量表是临床研究中首先遇到的问题。国内外对此方面进行的研究甚少。本研究采用多种统计学方法对临床应用广泛的欧洲癌症研究和治疗组织肿瘤患者生存质量量表(EORTC QLQ-LC43)和癌症治疗功能性量表(FACT-L)两种国际肺癌患者生活质量量表进行对比,以期为临床研究中生活质量量表的选用提供参考。方法:采用EORTC QLQ-LC43和FACT-L量表对125例肺癌患者进行临床调查,以所获临床数据为基础,采用多种统计学方法如Pearson相关检验、典型相关检验、多元线性回归等进行分析;同时对两种量表的一般形式如框架、条目形式数量、内容等进行比较。结果:量表在长度、等级类型、时间框架均相似,条目结构亦都相似。两种量表均含有测量生理、情感、功能和社会等方面的条目。但也有各自独有的条目。Pearson相关检验显示,两种量表相应模块的相关系数在0.331至0.664之间;典型相关分析得到了4个具显著统计学意义的典型相关变量,典型相关系数为0.87至0.26,冗余度为41%。多元线性回归分析显示,EORTC QLQ-LC43各模块被FACT-L解释的比例在0.531至0.766之间,FACT-L各模块被EORTC QLQ-LC43解释的比例在0.537至0.823间(除了医师关系模块),并且相应模块的解释比例在总的解释比例中占到50%至90%。结论:虽然两种量表间有一定的重叠,但两种量表涉及生活质量的不同方面。其次两种量表的相应领域虽然具有相同的名称,但并无直接的可比性。另外两种量表不能互相替代,对两种量表所得结论进行直接比较可能是不可取的。对临床应用而言(如两种治疗方案的比较),两种量表均适用。但各有其特点,应根据不同研究目的选用。

肺癌国际生存质量量表与体能状态评定指标及中医症状量表的关系

目的从临床观察角度探讨国际生存质量量表与体能状态评估及中医症状量表之间的相互关系。方法采用欧洲癌症研究与治疗组织肺癌生存质量量表(EORTCQLQLC43)和癌症治疗功能评价量表(FACTL)两种国际生存质量量表测定363例肺癌患者生存质量,同时记录其卡氏(KPS)评分与体能状态(ECOG)及肺癌中医症状量表(LCSLTCM)计分,并作相关性及一致性分析。结果EORTCQLQLC43和FACTL计分与KPS评分、ECOG及中医症状量表计分存在相关,但相关系数较小;各指标之间存在一致性。中医症状量表与KPS评分、ECOG之间不存在一致性。结论生存质量测评应采用生存质量量表,而不能以体能状态指标代替,但体能状态指标可作为生存质量的简易预测指标。中医症状量表与生存质量量表及体能状态指标之间有一定相关性。

健脾理气方联合rIL-2对荷瘤小鼠化疗免疫抑制的影响

目的研究联合应用中药健脾理气方和重组白细胞介素－２（ｒＩＬ－２）对肿瘤化学治疗免疫抑制的影响。方法用环磷酰胺（ＣＴＸ）给Ｈ２２荷瘤小鼠化疗，造成免疫抑制，应用中药健脾理气方和ＩＬ－２联合治疗后，用３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测荷瘤小鼠的ＮＫ、ＬＡＫ细胞活性，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测脾细胞增殖活性，ＦＡＣＳ法检测ＩＬ－２受体，Ｌ３Ｔ４，ＬＹ２阳性细胞数。结果采用大剂量ＣＴＸ后，荷瘤鼠脾重、脾细胞数、脾细胞增殖及杀伤能力均明显降低。Ｔ细胞亚群中ＴＨ比例下降明显，ＩＬ－２受体表达能力也受损，而加用健脾理气方或ｒＩＬ－２后，上述各项指标均有一定改善，其中中药组ＴＨ比例升高较明显；两者合用，则各项免疫指标的恢复更加显著。结论中药及生物反应调节剂联合应用有可能会更有效地减轻化疗的免疫抑制作用。

肺积方对人肺癌SPAC-1荷瘤裸鼠肿瘤血管生长的影响

目的探讨中药肺积方抑制裸鼠移植瘤组织血管生成及促进肿瘤血管正常化的作用及其机制。方法采用人肺腺癌细胞株SPAC-1建立BALB/c裸鼠鼠背视窗模型,造模后将裸鼠随机分为空白组及肺积方高、中、低剂量组。用共聚焦显微镜活体观察各组裸鼠活体背部视窗的肿瘤内部血管,计算瘤内单位面积的平均血管数量和直径;同时用免疫荧光染色法观察肿瘤血管壁Ⅳ型胶原(Collagen-Ⅳ)及血管平滑肌抗体(a-SMA)细胞覆盖率。结果在干预后第5天,高剂量组小鼠瘤径显著小于空白组(P<0.05);第9天,高剂量组与中剂量组血管数明显少于空白组(P<0.05),且高剂量组的血管平均直径明显小于中剂量组(P<0.05);第14天,高剂量组、中剂量组血管数明显少于空白组(P<0.05),且高剂量组瘤径明显小于空白组和低剂量组(P<0.05)。自药物干预第6天始,肿瘤血管a-SMA和Collegen-Ⅳ覆盖率较空白组逐步升高,其中高、中剂量组较空白组升高明显(P<0.05)。结论肺积方具有抑制肿瘤血管生成并可促进肿瘤血管正常化的作用,其机制与增加肿瘤血管aSMA和Collegen-Ⅳ覆盖率相关。

AGEs通过RAGE促进Jurkat细胞分泌肿瘤坏死因子-α

目的:探讨晚期糖化终产物(AGEs)与晚期糖化终产物受体(RAGE)结合对Jurkat细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响及相关信号分子的变化。方法:不同浓度AGEs作用于植物血球凝集素(PHA)预刺激的Jurkat细胞24小时,MTT检测AGEs对细胞生存率的影响,ELISA检测AGEs诱导Jurkat细胞分泌TNF-α;Western blot检测AGEs诱导Jurkat细胞表达RAGE和p38MAPK、JNK磷酸化水平。结果:AGEs作用于PHA预刺激Jurkat细胞24小时对细胞生存率无明显影响;AGEs促进Jurkat细胞表达RAGE,增加炎症因子TNF-α分泌,抗RAGE抗体明显抑制AGEs诱导的TNF-α分泌。AGEs可引起p38MAPK、JNK磷酸化,p38MAPK、JNK的抑制剂明显抑制AGEs诱导的TNF-α表达。结论:AGEs通过RAGE促进PHA预刺激的Jurkat细胞分泌炎症因子TNF-α,其机制与激活p38MAPK、JNK途径有关。

肺积方治疗非小细胞肺癌61例临床疗效评价

观察肺积方对非小细胞肺癌临床症状的影响。将102例非小细胞肺癌患者随机分为观察组(61例)和对照组(41例),观察组采用肺积方和化疗,并以单纯化疗为对照组,观察治疗前后症状改变,采用欧洲癌症研究与治疗组织生命质量测定量表(EORTCQLQ LC43)中的症状子量表及肺癌特异模块观察。结果:观察组多数症状较治疗前缓解,而对照组治疗后多数症状呈加重趋势。结论:肺积方能有效缓解非小细胞肺癌患者疾病相关及化疗相关临床症状。

低温贮藏对菊花插穗扦插成活率的影响

在低温贮藏条件下，不同品种的菊花插穗扦插成活率存在着显著的差异；在５℃环境下菊花插穗的贮藏期以３周为宜；贮藏期超过３周，菊花插穗的扦插成活率急剧下降。

RAGE、NF-κB反义RNA单/双基因共表达载体的构建及序列测定

目的 构建晚期糖化终产物受体(RAGE)、核因子κB(NF κB)反义RNA单/双基因共表达载体。 方法 从人脐静脉内皮细胞ECV30 4中提取总RNA ,RT PCR扩增RAGE基因片段;从糖尿病人外周血单核细胞提取总RNA ,RT PCR扩增NF κBp6 5基因片段。分别克隆入PGEM T载体,酶切鉴定阳性克隆,再经PCR反应获得多量的RAGE ,NF κB基因片段,反向插入双启动子真核表达载体pBudCE 4 .1,构建RAGE、NF κB反义RNA单/双基因共表达载体。 结果 RT PCR扩增出RAGE基因片段32 8bp,扩增出NF κBp6 5基因片段36 4bp。测序分析证实目的基因片段正确反向插入3个重组载体。 结论 RAGE、NF κB反义RNA单/双基因共表达载体构建成功。

晚期糖化终产物受体反义RNA腺相关病毒载体的构建及在肾脏系膜细胞中表达

目的构建晚期糖化终产物受体(RAGE)反义RNA腺相关病毒载体,并在大鼠肾脏系膜细胞中表达。方法构建腺相关病毒介导的RAGE反义RNA载体,3个质粒共转染293细胞,获得病毒原液,感染大鼠肾脏系膜细胞,流式细胞术、RT-PCR、ELISA检测重组病毒感染的细胞RAGE的表达和分泌细胞外基质的情况。结果经酶切鉴定、序列分析显示RAGE基因片段正确完整反向插入pAAV-MCS。利用293细胞包装获得病毒原液的滴度为8.7×107VP/mL。感染重组病毒的细胞与正常细胞比较RAGE表达被抑制(48.2±6.1)%,分泌Ⅳ型胶原(ColⅣ)水平明显下降(P<0.05)。结论成功构建具有抑制功能的RAGE反义RNA腺相关病毒载体,为进一步研究RAGE的作用机制,以及基因治疗RAGE相关疾病提供一个重要工具。

晚期糖基化终末产物对内皮细胞前列腺素合成的影响及可能机制

目的探讨晚期糖基化终末产物对内皮细胞前列环素、前列腺素E2合成的影响及可能机制。方法不同浓度的晚期糖基化终末产物作用内皮细胞,酶联免疫吸附法测定前列环素的稳定代谢产物6-酮—前列腺素F1α和前列腺素E2的表达。逆转录聚合酶链反应、免疫细胞化学测定环氧合酶2 mRNA和蛋白表达的改变。晚期糖基化终末产物受体、核因子κB单/双基因反义RNA对晚期糖基化终末产物刺激内皮细胞分泌6-酮—前列腺素F1α、前列腺素E2的影响。结果晚期糖基化终末产物引起内皮细胞分泌6-酮—前列腺素F1α、前列腺素E2增加(P<0.01),具有剂量依赖关系。晚期糖基化终末产物引起内皮细胞环氧合酶2的mRNA和蛋白表达增加(P<0.01)。晚期糖基化终末产物受体、核因子κB单/双基因反义RNA可减轻晚期糖基化终末产物刺激的内皮细胞分泌6-酮—前列腺素F1α、前列腺素E2(P<0.05或0.01),双基因的抑制效果更明显(P<0.05)。结论晚期糖基化终末产物可能通过晚期糖基化终末产物受体、核因子κB途径使内皮细胞的环氧合酶2表达增加,从而引起前列环素、前列腺素E2合成增加,这个机制可能参与了晚期糖基化终末产物所致的血管炎症损伤。

晚期糖化终产物受体、核因子-κB双基因反义RNA抑制糖化终产物刺激的炎症因子表达

目的:观察晚期糖化终产物受体(receptor ofadvanced glycation endproducts,RAGE)、核因子-κB(NF-κB)双基因反义RNA对晚期糖化终产物(ad-vanced glycation endproducts,AGEs)刺激ECV304细胞分泌炎症因子的影响。方法:酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法观察AGEs对ECV304细胞分泌TNF-α和IL-6的影响,应用脂质体将RAGE、NF-κB单/双基因反义RNA转染ECV304,流式细胞仪、筛选低表达RAGE、NF-κB的细胞株,观察RAGE、NF-κB双基因反义RNA对AG-Es刺激ECV304细胞分泌TNF-α和IL-6的影响。结果:AGEs可引起ECV304细胞分泌TNF-α和IL-6增加,诱导作用具有时间和剂量依赖规律。稳定转染筛选出低表达RAGE、NF-κB的细胞株,在AGEs100 mg.L-1诱导下双基因转染细胞ECV-asRAGE-asP65克隆中RAGE、NF-κBp65表达抑制率分别为(62.2±8.7)%及(37.2±7.1)%。AGEs 100 mg.L-1刺激下ECV-asRAGE-asP65克隆分泌TNF-αI、L-6较空载体转染细胞、单基因转染细胞减少更明显(P<0.01)。结论:RAGE、NF-κB双基因反义RNA可抑制AGEs刺激的ECV304细胞的TNF-α和IL-6释放。

肿瘤微环境和血管正常化在中西医结合治疗肿瘤中的作用机制探讨

肿瘤内部血管异常是造成肿瘤微环境异常的重要因素,而微环境不仅与肿瘤恶性程度转移复发密切相关,其所造成的酸性环境、乏氧等因素严重影响肿瘤的常规治疗及放化疗疗效。以血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)为目标靶点的抗肿瘤新生血管治疗药物不仅能拮抗肿瘤血管新生,而且能在一定程度上促进肿瘤内部血管正常化,从而降低细胞间质压,改善肿瘤内部血供,提高放化疗的疗效。既往的临床及基础研究已证实,许多中药在与放化疗联合的综合治疗中具有增敏增效作用,同时近年研究亦证明许多中药具有抗肿瘤血管新生并降低血清VEGF浓度、抑制VEGF表达作用。因此,从促肿瘤血管正常化角度探讨中医药抗肿瘤机制对寻找中医疗法在综合治疗中时间的切入点,优化治疗方案,并进一步阐明中医药在综合治疗中的作用开辟了一个全新的领域。

研制肿瘤患者生活质量量表中医版的意义及必要性

现行以生存期及病灶缓解率为主要观察指标的肿瘤临床疗效评价标准,已无法全面而准确地反映中医治疗肿瘤的临床疗效。生活质量因其概念及所覆盖范围与中医基础理论和临床辨证论治及疗效评价体系的一致性,已开始进入中医及中西医结合治疗肿瘤临床疗效评价体系,但尚缺乏已成为生活质量测定规范化测定工具的、能准确反映中医和中西医结合治疗肿瘤临床疗效的生活质量量表。本文从现行临床疗效评价体系的不足、中医辨证论治体系与生活质量的关系等方面论述了研制由中医临床及研究人员参与、能全面而准确反映中医治疗肿瘤临床疗效的肿瘤患者生活质量量表的意义及必要性。

甲基乙二醛对Jurkat细胞氧化应激及分泌细胞因子的影响

目的：探讨甲基乙二醛（MGO）对Jurkat细胞氧化应激及分泌细胞因子的影响。方法：不同浓度MGO作用PHA预刺激的Jurkat细胞,MTT检测细胞生长,流式细胞检测细胞内活性氧（ROS）,Western blot检测p38 MAPK、JNK磷酸化水平,ELISA检测TNF-α、IFN-γ。结果：1560μmol/L MGO对Jurkat细胞生长无影响,但能使ROS呈浓度依赖性升高;N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）和氨基胍（AG）能明显抑制此作用。MGO作用30分钟,pp38/p38、pJNK/JNK明显升高。MGO诱导Jurkat细胞分泌TNF-α、IFN-γ;P38、JNK抑制剂及NAC能降低TNF-α、IFN-γ的分泌。结论：MGO能诱导Jurkat分泌TNF-α、IFN-γ;其机制可能通过氧化应激、P38、JNK信号通路。