重组TRX-BNP融合蛋白的构建和表达

目的:构建人B型钠尿肽(BNP)表达质粒,用pET原核表达系统制备重组抗原TRX-BNP融合蛋白。方法:根据GenBank中检索到的人BNP成熟蛋白序列编码,设计合成编码BNP-32蛋白的DNA,并分别在5′端和3′端设计EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点,经聚合酶链反应(PCR)、构建重组质粒pET32a.BNP,并在BL21(DE3)经IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和层析制备TRX-BNP。通过DNA测序、融合蛋白的相对分子质量分析及Western印迹来鉴定TRX-BNP质粒及表达的BNP抗原的正确性。结果:DNA测序结果表明,所获得的BNP基因编码序列符合序列设计的要求,正确插入设计位点,重组质粒pET32a.BNP构建成功。IPTG诱导后SDS-PAGE电泳显示有特异性蛋白TRX-BNP表达,蛋白相对分子质量21 400,Ni-NTA亲和纯化,在UVP凝胶成像分析系统上作定量分析,BNP蛋白纯度达到95%。Western印迹结果证实TRX-BNP蛋白特异性表达。结论:成功制备TRX-BNP融合蛋白。

新型单铆双盘状封堵器治疗动脉导管未闭的安全性和疗效观察

目的评价新型单铆双盘状封堵器治疗动脉导管未闭的安全性及疗效。方法收集动脉导管未闭患者47例,按选用封堵器的类型不同分为试验组31例,植入新型单铆双盘状封堵器(Sunflower封堵器),对照组16例,植入双盘状封堵器(SHSMA封堵器)。记录两组患者的年龄、体重、植入封堵器大小,右室收缩、舒张、平均压,肺动脉收缩、舒张、平均压及主动脉收缩、舒张、平均压和并发症发生率,术后随访心电图,术后1、3、6个月随访经胸超声心动图。结果 47例患者手术全部成功,手术成功率为100%。试验组植入封堵器腰部直径为5～18 mm,平均(11.7±3.6)mm;对照组植入封堵器腰部直径为6～16 mm,平均(11.0±3.3)mm。试验组患者术后均无并发症发生;心电图左心室负荷增大明显改善,彩色多普勒超声随访未见残余分流。对照组有1例术中出现高血压危象,1例术后血小板减少,1例术后3个月内存在残余分流,心电图及术后6个月的随访对照组与试验组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Sunflower封堵器治疗动脉导管未闭安全、有效。

替米沙坦治疗轻中度高血压患者降压效果及其安全性

目的:观察替米沙坦治疗轻、中度高血压病的临床降压效果。方法:72例临床确诊为轻、中度高血压病者,随机分为替米沙坦组(35人)和氯沙坦组(37人),分别每日早晨服替米沙坦80mg,或氯沙坦50mg,总观察时间为8周。服药后第4、8周测定血压,入选时与服药后第8周测定血钾、肝功能、肾功能。结果:服药第4周、第8周两观察组血压均较观察前显著降低(P<0.05,P<0.01),且替米沙坦的降压作用较氯沙坦明显(P<0.01,P<0.001)。到第8周末,替米沙坦组与氯沙坦组降压总有效率分别达94.1%与88.6%。与观察开始前比较,第8周末血钾、肝功能、肾功能无明显改变。结论:替米沙坦对轻、中度高血压病患者有良好的降压效果,服用安全。

静脉内和冠脉内同时应用替罗非班在急性心肌梗死介入治疗中的疗效与安全性

目的:评价静脉内和冠脉内同时应用负荷剂量替罗非班在急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)中的疗效和安全性。方法:43例拟行急诊PCI术STEMI患者随机选入替罗非班IV组(仅静脉内推注负荷剂量替罗非班,22例)和替罗非班IV&IC组(静脉内和冠脉内同时推注负荷剂量替罗非班,21例),观察患者PCI术前术后thrombolysis in myocardial infarction trial(TIMI)血流分级和心肌组织灌注,住院期间心脏超声、主要不良心血管事件(MACE)、出血事件和血小板减少,以及术后30d的MACE。结果:两组患者的基础临床情况和术前冠脉造影特征差异无统计学意义;两组患者术后TIMI血流分级,校正的TIMI帧数计数(CTFC)≤27帧差异无统计学意义;术后心电图ST段抬高总和回落(sumSTR)百分比≥70%,肌钙蛋白I(cTnI)与肌酸激酶同工酶(CK-MB)峰值浓度等差异无统计学意义;住院期间左室收缩功能、MACE、大量出血事件、血小板减少症的发生率等差异无统计学意义;两组术后30dMACE发生率差异无统计学意义。结论:在STEMI患者急诊PCI术中,静脉内和冠脉内同时应用负荷剂量替罗非班是安全的,近期疗效与单纯静脉内应用替罗非班相当。

高等院校招生方法改革研究

游晓华等．高等院校招生方法改革研究．定义了学生培养潜力评价分数Ｍ分数，提出了ＭＣ及ＭＮＣ录取法。

永存左上腔静脉合并右上腔静脉缺如植入心脏永久起搏器1例报告

1病例资料 患者男性,76岁,因＂间断发作性晕厥1个月,2010年9月22日门诊Holter检查提示最长R-R间期11.5 s＂于当日收入院。患者既往体健,个人史、婚育史、家族史无特殊。查体：血压130/80 mmHg（1 mmHg=0.133kPa）,颈静脉无充盈,双肺未闻及啰音,心界不大,心率70次/min,律齐,心脏各听诊区未闻及杂音,肝脾肋下未触及,

左盘无铆型卵圆孔未闭封堵器的实验研究

目的评价新型左盘无铆型卵圆孔未闭(PFO)封堵器经导管植入的可行性、安全性和有效性,为临床研究提供实验依据。方法取20只健康成年犬,经皮房间隔卵圆窝穿刺、球囊扩张术建立犬PFO模型。将20只犬分为实验组(植入左盘无铆型PFO封堵器)和对照组(植入双铆型PFO封堵器),每组10只。术后1、2、3和6个月分别通过对心脏大体标本、光镜、电镜检查,评价新型封堵器植入后内皮化过程,观察有无残余分流、血栓形成等并发症。结果 20只犬均成功进行了房间隔卵圆窝穿刺和球囊扩张术,右房造影可见对比剂由右房进入左房,成功建立了犬PFO模型。实验组左盘无铆型PFO封堵器植入成功率为10/10,对照组成功率为9/10。19只犬术后1、2、3和6个月分别取出心脏大体标本进行观察,结果显示两组PFO封堵器的位置均无移位,无合金丝断裂,封堵器表面未见血栓形成和赘生物附着。术后1个月实验组封堵器双侧盘面可见薄层透亮组织覆盖,病理和电镜检查证实为纤维组织和内皮细胞,盘面无血栓和赘生物。至术后6个月,封堵器表面组织逐渐增厚,封堵器边缘与周围心脏组织融合。术后1个月对照组封堵器左侧盘面除中央铆钉外可见纤维组织和内皮细胞覆盖,术后6个月1只犬的左盘铆钉上仍无组织覆盖。结论新型左盘无铆型PFO封堵器设计科学,与双铆型PFO封堵器相比较,完全内皮化的时间缩短,可有效的封堵PFO,具有良好的临床应用前景。

LACBES左心耳封堵器及动物实验可行性研究

目的介绍一种自主研究开发的LACBES左心耳封堵器,探讨其封堵左心耳的可行性。方法选取8只健康杂种犬,经股静脉途径应用LACBES封堵器封堵左心耳,术后测量封堵器压缩比例,造影定性评估残余分流;术前术后监测左心房压,分析左心耳封堵后对左心房压的即时影响。结果8只实验犬均成功植入LACBES左心耳封堵器,封堵器压缩比例为10%~15%。1只封堵术后有少量残余分流。2只术后死亡与操作相关,原因分别为封堵器移位及股动脉穿刺部位血肿,无器械相关死亡发生。术后即刻左心房收缩压升高,由术前(25.4±2.8)mm Hg升至(27.5±3.4)mm Hg(P<0.05),15 min后恢复至(25.3±2.8)mm Hg。结论 LACBES封堵器封堵左心耳即刻成功率高,残余分流率低,左心房收缩压短暂升高,器械相关并发症低,有望应用于临床。

卵圆孔未闭动物模型的制备

目的探讨采用经皮房间隔穿刺和球囊扩张法制备犬卵圆孔未闭(patent foramen ovale,PFO)动物模型的可行性。方法采用22只健康成年犬,经皮房间隔卵圆窝穿刺、球囊扩张术制备犬PFO模型,对其中2只犬的卵圆窝穿刺点进行病理学等检查。结果 22只犬均成功进行房间隔卵圆窝穿刺和球囊扩张术,右房造影可见对比剂由右房进入左房,成功建立了犬PFO模型。完成房间隔卵圆窝穿刺及球囊扩张平均用时(25.1±5.1)min,X线曝光时间平均(5.8±1.6)min。穿刺前右心房平均压为(1.9±0.8)mmHg,穿刺后测得左心房平均压为(2.5±0.7)mmHg。对2只犬的心脏大体观察见心包膜完整;房间隔卵圆窝缺损分别为5 mm×6 mm和6 mm×6 mm,缺损周边均见少量淤血,未见血栓附着,余心内膜均完整。结论经皮穿刺犬的房间隔卵圆窝、球囊扩张方法制备PFO模型可行。

2型糖尿病患者血浆肿瘤坏死因子水平与部分骨代谢生化指标的相关探讨

目的 :探讨 2型糖尿病 (DM )患者血浆肿瘤坏死因子 (TNF α)与骨代谢相关指标的关系。方法 :采用放射免疫分析法测定 60例 2型DM患者 (包括病程≤ 5年 3 3例 ,病程 >5年 2 7例 )和 5 6例正常对照组的TNF α含量 ,并将其与血清骨钙素 (osteoalain ,BGP)、空腹胰岛素 (Insuline ,Ins)、血尿钙、磷水平进行比较。结果 :糖尿病组TNF α水平高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,并与血清骨钙素呈负相关 (r =-0 41,P <0 0 1) ,与尿钙、磷的水平呈正相关 (r =0 43 ,P <0 0 1;r =0 46,P <0 0 1)。结论 :2型DM患者血浆TNF

单中心九年冠状动脉介入治疗围术期患者死亡原因的探讨

目的探讨PCI围术期患者死亡的原因。方法选择2002年1月～2010年12月行PCI患者5225例,记录围术期死亡患者的基线临床资料、冠状动脉病变特点、死亡时间及死亡原因。结果围术期患者共死亡54例,病死率1.03%,54例死亡患者中,单支病变13例,双支病变11例,3支病变30例;19例(35.2%)死于术后第1天、20例(37.0%)死于术后2～8d;有18例(33.3%)死于心源性休克、9例(16.7%)死于支架内血栓形成、7例(12.9%)死于严重左心衰竭。结论 PCI围术期死亡发生率低,且多发生在急诊PCI、老年、多支病变患者。引起死亡原因多为心源性休克、支架内血栓形成、严重左心衰竭等。

可降解涂层雷帕霉素洗脱支架(Tivoli支架)治疗冠状动脉性心脏病的疗效

目的评价国产可降解涂层雷帕霉素洗脱支架(Tivoli支架)用于冠状动脉性心脏病(CHD)患者介入治疗的安全性和近期疗效。方法 2010年9—11月于第二军医大学附属长海医院心血管内科单一植入Tivoli支架的CHD患者167例。术后接受双联抗血小板治疗9个月,观察主要心血管不良事件(MACE)的发生情况,并在术后12个月复查冠状动脉造影。结果 223处靶血管病变共使用Tivoli支架267枚,植入支架成功率达100%。术后12个月冠状动脉造影随访结果显示,支架内再狭窄的发生率为1.9%(4/211),无1例发生MACE。结论 Tivoli支架治疗CHD是可行的,且具有良好的安全性和满意的近期临床效果。

重视临床医学教学中循证医学思维的培训

以循证医学本质为基础，以传统医学与循证医学的根本区别为出发点，探讨临床医学教学中循证医学思维培训的必要性。

关于课件制作的几点思考

笔者通过对课件制作的哲学性思考,提出了以教师讲授为核心,以学生主体为前提,以内容第一为宗旨,以课堂效果为目标的课件制作理念。追求页面清爽、形式简单、注重逻辑、内容实在、启迪为本、引领思想的教学方式和课件风格,注重课件的亲和性和有效性。

尼群地平缓释片治疗高血压病的降压效果

目的:观察尼群地平缓释片(商品名落普思,lowpresser)治疗高血压病的临床降压效果。方法:225例门诊高血压病人入选,并随机分为尼群地平组(114例)和氨氯地平组(111例)。前者口服尼群地平缓释片10mg,2次/d;后者晨服氨氯地平片5mg,总观察时间为30d。观察期间定期测定血压,并于观察开始前与服药第30天测定血钠、钾、氯和肝、肾功能。结果:服药第14、第30天两观察组血压均较观察前显著降低(P<0.01)。到第30天.尼群地平缓释片组与氨氯地平组降压总有效率分别达到84.4%与84.7%。与观察开始前比较,第30天血钠、钾、氯和肝、肾功能无明显改变。尼群地平缓释片组与氨氯地平组分别有4例和3例病人因头痛终止试验。结论:尼群地平缓释片有良好的降压效果,不良反应轻而少,服用安全。

70岁以上2型糖尿病合并冠心病患者临床指标和冠状动脉造影分析

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)与70岁以上冠心病(CHD)患者的临床特点及冠状动脉病变程度的关系。方法:回顾性分析本院2006年4月至2008年7月经冠状动脉造影证实的155例70岁以上T2DM合并CHD者(DM-CHD)患者的临床资料,作为病例组,以同期155例性别匹配的70岁以上不合并T2DM的CHD患者为对照组,对两组患者进行年龄、性别、血压、血脂、凝血、射血分数等临床指标和冠状动脉造影结果的分析比较。结果:DM-CHD组合并高血压的发病率明显高于NDM-CHD组(P<0.05),其空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、纤维蛋白原(FIB)水平明显高于对照组(P<0.01),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于NDM-CHD组(P<0.05);DM-CHD组左室射血分数(EF)显著低于NDM-CHD组(P<0.01)。155例DM-CHD患者,有35例初诊的DM患者(22%),若不行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)而仅依靠FBG,则有14例DM患者漏诊(40%)。DM-CHD组以弥漫病变为主(P<0.01),冠脉狭窄指数及闭塞的血管数显著高于NDM组(P<0.01)。结论:CHD患者DM漏诊率较高;DM-CHD较之NDM-CHD患者存在更多的CHD危险因素,冠状动脉病变的范围和狭窄程度更严重。

新型单铆双盘状封堵器治疗房间隔缺损的安全性和疗效观察

目的评价新型单铆双盘状封堵器治疗房间隔缺损(ASD)的安全性及疗效。方法选取继发孔ASD患者49例,按选用封堵器的类型不同分为试验组34例,植入新型单铆双盘状封堵器(Sunflower封堵器),对照组15例,植入双盘状封堵器(SHSMA封堵器)。记录两组患者的ASD直径、肺动脉收缩压(PASP)、右室收缩压(RVSP)、封堵器腰部直径、手术时间、透视时间及并发症发生率,术后随访心电图及1、3和6个月的经胸超声心动图。结果 49例手术全部成功,手术成功率为100%。试验组34例植入封堵器腰部直径为6～32 mm,对照组为14～34 mm。两组患者术中均无严重并发症,术后即刻超声心动图检查示,对照组1例可见残余分流,术后6个月残余分流消失,其他患者均未见心房水平分流,封堵器未影响右房室瓣返流。术前、术后心电图变化两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论Sunflower封堵器与SHSMA封堵器治疗ASD同样安全和有效。

hVEGF_(165)四环素调控腺病毒载体的构建及其在大鼠成肌细胞表达

目的构建表达人血管内皮生长因子165基因(hVEGF165)的四环素调控重组腺病毒,并测定其在原代培养大鼠成肌细胞的表达水平。方法亚克隆hVEGF165全长cDNA到穿梭质粒pTREShuttle2,获得四环素可调控的目的基因表达盒;亚克隆表达盒到BDAdeno-XTMViralDNA,获得重组腺病毒质粒;重组质粒转染HEK293细胞以包装产生具有感染能力的重组腺病毒颗粒AdTRE.VEGF165。hVEGF165重组腺病毒和Tetoff调节病毒共感染原代培养的成肌细胞,酶联免疫法检测目的基因的表达。结果成功构建了能表达hVEGF165的四环素调控的重组腺病毒载体。hVEGF165重组腺病毒(20pfu/cell)和Tetoff调控病毒(20pfu/cell)共感染骨骼肌成肌细胞后5d,ELISA检测显示培养上清中VEGF165蛋白浓度显著高于未感染的细胞培养上清[(14.80±1.15ng/ml)×105/(cell·24h)vs(1.39±0.36ng/ml)×105/(cell·24h),P<0.01)]。结论四环素调控表达的腺病毒系统可高效地转导VEGF基因进入哺乳动物细胞;原代培养的骨骼肌成肌细胞感染AdTRE.VEGF165后可高水平地分泌VEGF165蛋白。