16SrRNA高通量测序研究有龋者唾液微生物群落结构及多样性

目的:通过16SrRNA高通量测序研究有龋和无龋者唾液的微生物群落结构及其差异。方法:在甘肃省康乐县景古镇居民口腔检查中随机选取14位汉族居民,其中,7例有龋(caries-active,CA组,DMFT≥4)、7例无龋(caries-free,CF组)。采取唾液样本,提DNA,PCR扩增,利用Illumina Miseq测序平台对16SrRNA V4区进行双端测序;利用Mothur、MEGAN4、Cluster 3.0和Java Treeview等软件进行细菌群落结构及多样性的差异分析。结果:共得到118151条优质序列,发现5738个OTUs,2795个物种,归属27个门,218个属。CA组和CF组唾液微生物群落结构有差异,其中,门水平上,Firmicutes和SR1在CA组显著低于CF组(P<0.05)。属水平上,Rothia、Alistipes和Catonella在CA组显著低于CF组(P<0.05),Scardovia在CA组显著高于CF组(P<0.05);CA组和CF组OTUs分别为(550.2±26.48),(597.4±66.07),CA组和CF组Simpson多样性指数分别为(0.73±0.03),(0.49±0.01),均无统计学差异。结论:人类口腔唾液有复杂的微生物群落结构;在门水平和属水平上,有龋者的微生物种类较无龋者稍有减少;Firmicutes和SR1菌门,Rothia、Alistipes和Catonella菌属的存在与龋病呈负相关;相反地,Scardovia等菌属的存在与龋病呈正相关。

口腔枯草芽孢杆菌代谢产物的抑菌活性研究

目的:从口腔中分离枯草芽孢杆菌并验证其代谢产物对主要致龋菌的抑制作用。方法:搔刮法提取牙菌斑,平板稀释法筛选出细菌后,进行形态学观察及16SrDNA基因序列的比对。琼脂平板打孔法检测其代谢产物对变形链球菌、粘性放线菌及嗜酸乳杆菌的抑菌活性。结果:从牙菌斑中分离出3株细菌,通过形态学及16SrDNA基因序列检测确定为枯草芽孢杆菌;其代谢产物对变形链球菌、粘性放线菌、嗜酸乳杆菌均具有抑制作用,其中对粘性放线菌抑制作用最强。结论:牙菌斑中可以分离出枯草芽孢杆菌,并且其代谢产物对主要致龋菌具有抑制作用,枯草芽孢杆菌有望作为益生菌在龋病防治中发挥重要作用。