白头翁皂苷B4对糖尿病大鼠视网膜凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨白头翁皂苷B4对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡的作用。方法采用随机数字法将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型对照组及糖尿病+白头翁皂苷B4处理组,每组20只。模型对照组、糖尿病+白头翁皂苷B4处理组大鼠腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型。建模成功3 d后,糖尿病+白头翁皂苷B4处理组以5 mg/kg的剂量腹腔注射白头翁皂苷B4,2次/d,持续腹腔注射8周,正常对照组、模型对照组大鼠腹腔注射同等剂量生理盐水。于糖尿病+白头翁皂苷B4处理组腹腔注射8周后,获取视网膜组织,行视网膜石蜡切片苏木精-伊红染色(HE),观察视网膜组织结构及形态改变;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测Bcl-2及Bax蛋白表达水平;行荧光定量PCR(Q-PCR)检测视网膜组织中Caspase-3 mRNA表达水平。结果 HE染色显示,正常对照组大鼠视网膜结构完整,形态清晰;模型对照组大鼠视网膜结构紊乱,各层变薄,细胞排列紊乱、稀疏;而白头翁皂苷B4治疗后的大鼠视网膜结构与形态好转;与正常对照组相比,模型对照组大鼠视网膜Bcl-2蛋白相对表达量减弱(t=57.81,P<0.01),Bax表达增强(t=10.47,P<0.01),Bcl-2/Bax比值下降(t=23.98,P<0.01),差异均具有统计学意义;与模型对照组比较,糖尿病+白头翁皂苷B4处理组大鼠视网膜Bcl-2蛋白相对表达量增强(t=41.07,P<0.01),Bax表达减弱(t=6.811,P<0.01),Bcl-2/Bax比值上升(t=14.70,P<0.01),差异均具有统计学意义;模型对照组大鼠视网膜组织Caspase-3 mRNA表达较正常对照组增高(t=7.916,P<0.01),而糖尿病+白头翁皂苷B4处理组大鼠视网膜组织中Caspase-3 mRNA表达较模型对照组降低(t=6.221,P<0.01),差异均有统计学意义。结论白头翁皂苷B对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡具有一定的抑制作用,其机制可能与增强Bcl-2表达及下调Bax、Caspase-3表达有关。