盐生海芦笋内生真菌Salicorn 35的分离鉴定与抗氧化发酵条件优化

采用分子生物学与形态学观察相结合的方法,鉴定分离自盐生海芦笋中的内生真菌Salicorn 35。提取基因组DNA后分别对其18S rDNA和ITS1-5.8S-ITS4区域进行PCR扩增并进行单克隆测序分析。将序列提交NCBI进行核酸序列同源性比较,利用MEGA5.0软件对序列进行分析,构建系统发育树。结合形态学与显微镜观察将该菌鉴定为茄病镰刀菌(Fusarium solani)。在此基础上,以抗氧化活性为指标,采用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应曲面法对Salicorn 35菌株的发酵条件进行优化,最大限度地提高其抗氧化活性。优化后的最佳培养基配方为(质量分数):酵母膏1.5%、蛋白胨2.7%、土豆40%、麦芽糖3%、甘露醇1%、葡萄糖1.5%、味精1.0%、氯化钠6.0%,pH5;采用此培养基所得发酵产物对DPPH自由基的清除率为76.75%,比优化前(清除率57.77%)有显著提高。

盐生海芦笋内生真菌S19的分离鉴定与抗氧化发酵条件优化

以盐生海芦笋中分离的1株内生真菌S19菌株为研究对象,对ITS区域序列进行PCR扩增测序并进行系统发育分析,结合形态学观察,将其鉴定为Gibberella avenacea。采用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应曲面法对S19菌株的发酵条件进行优化,最大限度地提高其抗氧化活性。优化后的最佳培养基配方为:16 g.L-酵母膏,17 g.L-1蛋白胨,300g.L-1土豆,30 g.L-1麦芽糖,30 g.L-1甘露醇,5 g.L-1葡萄糖,10 g.L-1味精,10 g.L-1氯化钠,pH为7。采用此培养基所得发酵产物对2,2-二苯基-1-苦肼基(DPPH)自由基的最大清除率为78.25%,比优化前(清除率66.55%)有显著提高。

18S rDNA和ITS相结合鉴定一株盐生海芦笋内生真菌的研究

对分离自盐生海芦笋的一株代号为Salicorn 8的真菌进行鉴定,提取基因组DNA后分别PCR扩增18S rDNA和ITS区域,基因测序并进行同源性分析,构建ITS基因系统发育树,结合形态学分析,将该菌鉴定为木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)。

分子生物学与形态学相结合鉴定盐生海芦笋内生真菌Salicorn 15

从盐生海芦笋中分离出一株内生真菌(Salicorn 15),采用分子生物学与形态学观察相结合对其鉴定。提取该菌的基因组DNA后分别对其18S rDNA和ITS区域进行PCR扩增并进行单克隆测序分析,在NCBI上进行同源性分析,进而构建系统发育树,再结合形态学观察,将菌株Salicorn 15鉴定为层出镰刀菌Fusarium proliferatum。