发光法分析莪术油等中药对肝、胃癌细胞增殖活性抑制作用的实验研究

目的:探讨抗癌中药莪术油、华蟾素、龙葵碱与肝癌细胞株SMMC7721、胃癌细胞株NKM45增殖活性的抑制作用。方法:应用生物发光法(BLA法)测定莪术油、华蟾素和龙葵碱与SMMC7721、NKM45作用后的ATP含量,并与5-氟脲嘧啶(5-FU)的作用进行比较,分析莪术油对NKM45生长曲线的影响。结果:莪术油等三种中药与SMMC7721、NKM45作用后的ATP含量明显下降(P<0.05～P<0.01);与5-FU作用后的ATP含量比较,无明显差异(P>0.05)。莪术油对NKM45的存活率有明显的抑制作用。结论:莪术油等中药能够抑制SMMC7721、NKM45细胞的增殖活性。BLA法可广泛应用于抗肿瘤药物的筛选。

羧甲基壳聚糖银的合成及抑菌实验的研究

目的研究羧甲基壳聚糖银的合成方法及其对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和变形杆菌的抑菌作用。方法对壳聚糖经化学修饰后的衍生物进行红外吸收光谱分析。用稀释法和凹环法对烧伤常见的病原菌进行抑菌实验。结果修饰后的衍生物经红外图谱分析表明 ,壳聚糖已被氯乙酸所修饰。羧甲基壳聚糖银对浓度均为 10 4 CFU/ml的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的抑菌率分别为 88%、80 .2 %和 75 .3%。羧甲基壳聚糖银和AgNO3 对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度相同 ,对大肠埃希菌的最低抑菌浓度则前者低于后者。结论羧甲基壳聚糖银对烧伤感染常见致病菌有抑制作用 ,它可作为一种新型的预防、治疗烧伤感染的药物。

三磷酸腺苷生物发光法分析莪术油等中药抑制肝、胃癌细胞增殖活性的研究

目的研究抗癌中药莪术油、华蟾素、龙葵碱与肝癌细胞株SMMC7721、胃癌细胞株NKM45作用后的ATP水平,探讨药物对瘤细胞增殖活性的抑制作用。方法应用三磷酸腺苷生物发光法(ATP-BLA法)测定莪术油、华蟾素和龙葵碱与肝、胃癌细胞作用后的ATP含量,并与5-氟脲嘧啶(5-FU)的作用进行比较。结果莪术油、华蟾素、龙葵碱与SMMC7721、NKM45作用后的ATP含量明显下降(P<0.05～P<0.01);与5-FU作用后的ATP含量比较,无明显差异(P>0.05)。结论应用ATP-BLA研究抗癌中药对肿瘤细胞增殖活性的抑制作用,对于筛选抗肿瘤药物具有广阔的应用前景。

莪术油、华蟾素和5-氟脲嘧啶对肝癌细胞化学发光的影响

目的探讨抗癌中药莪术油、华蟾素及化疗药物5-氟脲嘧啶(5-FU)对肝癌细胞化学发光(Chemilumines-cence,CL)的影响。方法应用鲁米诺(Luminol)增强的CL法检测人肝癌细胞株(SMMC7721)与莪术油、华蟾素、5-FU作用48h后的肝癌细胞CL,分析瘤细胞存活率与肝癌细胞CL强度的相关性。结果与对照组比较,莪术油组、华蟾素组、5-FU组峰值均明显下降(P均<0.01),峰时延长(P<0.01,P<0.05)。瘤细胞存活率与肝癌细胞CL强度呈正相关(r=0.853,P<0.01)。结论莪术油、华蟾素及5-FU能够明显抑制肝癌细胞CL。研究肿瘤细胞的CL,可为筛选敏感的抗瘤药物提供实验依据。

女性患者淋球菌对抗生素的多重耐药性分析

目的了解本地区女性淋球菌感染患者对抗生素的多重耐药状况,为临床合理用药提供实验依据。方法应用K-B琼脂扩散法分析女性感染淋球菌对不同类别抗生素的敏感性,筛选出多重耐药菌株;用琼脂稀释法测定青霉素、四环素、环丙沙星对淋球菌的最小抑菌浓度(MIC);碘量法检测产青霉素酶淋球菌(PPNG)。结果112例女性患者标本经分离、培养、鉴定的淋球菌为86株。从86株淋球菌中筛选出58株(67.44%)多重耐药株。青霉素耐药率为51.16%(44/86),四环素耐药率61.25%(49/80),其中质粒介导的PPNG和高度耐四环素(TRNG)菌株的阳性率分别为18.60%(16/86)和12.50%(10/80);环丙沙星耐药率92.94%(79/85)。结论本地区女性感染淋球菌出现的多重耐药状况较为严重,有必要持续监测淋球菌的耐药性。

不育症病人中沙眼衣原体和解脲支原体的检出调查

非淋菌性尿道炎(non—gonococcal urethritis，NGU)的病原体主要为解脲支体(ureaplasma urelyticum，UU)和沙眼衣原体(chlamydia trachomatis，CT)。近年来，NGU感染所致不育症逐渐引起医务工怍者的重视。UU和CT不仅是引起非淋菌性尿道炎的主要病原体，而且也是导致不育症的病因之一。为了探索本地区UU和CT感染对不育症的影响，本研究室对132例男女不育症门诊患者进行了UU和CT的检测，结果报道如下。

肿瘤患者外周血NK细胞活性的分析测定

采用即用型Ｓ－Ｐ一步染色法，对正常人及肺癌、鼻咽癌、乳腺癌、大肠癌、胃癌和食道癌患者外周血的ＮＫ细胞活性进行了测定，并比较了各肿瘤组ＮＫ细胞的活性分析结果。结果表明，各个肿瘤组的ＮＫ细胞活性均明显下降（Ｐ＜０．００１～Ｐ＜０．０１），而各个肿瘤组之间的ＮＫ细胞活性无显著差异（Ｐ＞０．０５）。

110例肿瘤患者治疗前后体液及分泌物的细菌学检查及药敏试验分析

目的：了解肿瘤患者经各种治疗后病原菌感染状况及对抗生素的敏感性。方法：对１１０例肿瘤患者治疗前、后的体液、分泌物标本进行细菌学分析；对治疗后所分离的部分菌株进行药敏感试验。结果：治疗前分离出革兰阳性菌３５株，阳性率为３０４３％；革兰阴性菌４１株，阳性率为３５１５％；类酵母菌１２株，阳性率为１０４３％。治疗后分离出革兰阳性菌３６株，阳性率为３１３０％；革兰阴性菌６５株，阳性率为５６５２％；类酵母菌３２株，阳性率为２７８３％。与治疗前相比，革兰阴性菌、类酵母菌感染明显上升（Ｐ＜００１），且革兰阴性菌中以大肠埃希氏菌和铜绿假单胞菌占优势。结论：肿瘤患者经各种治疗后，条件致病菌和类酵母菌的感染率正逐渐升高。

莪术对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的探讨莪术(RC)对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法采用腹腔注射环磷酰胺(CY)复制免疫功能抑制小鼠模型,再给模型小鼠分别腹腔注射高、中、低剂量的RC(2.5、1.250、.625 g/kg),连续给药7 d。同时设正常对照组和免疫抑制模型组。末次给药后24 h进行免疫学检测;采用称重法测定胸腺、脾脏重量并计算脏器指数;镜检计数外周血白细胞数;比色法测定小鼠碳粒廓清指数和血清溶血素的含量;MTT法测定刀豆蛋白A(Co-nA)诱导的脾淋巴细胞增殖反应。结果低、中、高剂量RC能拮抗CY引起的小鼠脾萎缩和白细胞数量减少;高、中剂量RC能提高免疫抑制小鼠的碳粒廓清指数、促进血清溶血素的生成及提高ConA诱导的脾淋巴细胞增殖反应,且其作用强度呈剂量依赖性。但RC对免疫抑制小鼠胸腺指数无显著性影响。结论 RC能明显改善CY抑制的小鼠免疫功能,这可能是RC抗肿瘤的作用机理之一。

羧甲基壳聚糖银、锌、铈的合成及抑菌实验的研究

报道了羧甲基壳聚糖银、锌、铈的合成及其混合物对金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌和变形杆菌的抑菌作用 ,并与磺胺嘧啶银进行比较 ,结果发现 ,羧甲基壳聚糖银、锌、铈水溶液 (含量为 0 .6 95mg/ml,Ag、Zn、Ce含量分别为 0 .2 5 2× 10 6、5 .2 8× 10 6、2 .15 4× 10 6)对上述 5种细菌 (含量为10 4CFU/ml)杀菌率为 96 %以上 ,与 1.

前列腺炎患者前列腺液的病原微生物分析

目的分析研究引起前列腺炎的病原微生物。方法应用培养法和免疫金标法,对112例临床确诊为前列腺炎患者的前列腺液进行了细菌分离培养及药物敏感实验、支原体培养和衣原体的检测分析。结果112份前列腺液标本中分离出金黄色葡萄球菌18株,表皮葡萄球菌7株,链球菌20株,四联球菌10株,淋病奈瑟菌6株,肠杆菌科菌6株,白色念珠菌2株。单纯细菌感染40例,支原体感染7例,衣原体感染8例,细菌合并支原体、衣原体感染27例。对三种主要病原菌的药物敏感实验结果表明,环丙沙星的耐药率最高。结论引起前列腺炎的病原微生物比较复杂,除了致病菌外,条件致病菌、支原体、衣原体的感染率已呈上升趋势。因此,对于前列腺炎患者有必要进行全面的检查分析,以便进行综合治疗。

新生儿病理性黄疸病原菌分布及耐药性分析

目的了解新生儿病理性黄疸血培养病原菌的分布特点及耐药状况。方法将1 716例新生儿病理性黄疸病例分为早期(出生≤7 d)和晚期(出生>7 d)两组。用全自动血培养系统对两组患儿进行血培养,并以全自动细菌鉴定分析系统对分离的菌株进行鉴定和药敏试验。结果 1 716份血液标本共分离培养病原菌99株,其中革兰氏阳性(G+)球菌39株(39.39%),革兰氏阴性(G-)杆菌59株(59.60%),白色念珠菌1株(1.01%)。G+球菌以凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)为主(64.10%)。早期组的主要致病菌为葡萄球菌(36.36%)和肺炎克雷伯菌(25%),晚期组为肺炎克雷伯菌(52.73%)和大肠埃希菌(18.18%)。MRCNS对阿莫西林/克拉维酸、头孢唑啉、亚胺培南、红霉素的耐药率明显高于甲氧西林敏感株(MSCNS)(P均<0.05)。两菌ESBLs阳性菌株对氨曲南、头孢曲松、头孢吡肟的耐药率明显高于ESBLs阴性菌株(P均<0.05)。肺炎克雷伯菌ESBLs阳性菌株对氨苄西林/舒巴坦、替卡西林/棒酸、阿莫西林/克拉维酸的耐药率高于ESBLs阴性菌株(P均<0.05)。结论 G-杆菌为新生儿病理性黄疸的主要致病菌。MRCNS及G-杆菌耐药状况相当严重。根据病原菌种类及药敏试验结果选择抗菌药物有助于减少细菌耐药性的产生,提高治疗效果。

鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子的制备及鉴定

目的制备鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子(EYHBV-TF),并检测其免疫活性。方法用乙肝疫苗免疫母鸡,收集鸡蛋,取卵黄进行透析,制备EYHBV-TF,参照药典要求,采用光谱法、高效液相色谱法(HPLC)、Lowry法等检测其理化性质。采用白细胞粘附抑制法(LAI)和迟发型皮肤超敏试验(DTH)检测特异免疫活性。结果EYHBV-TF是一种可透析、含有18种氨基酸、相对分子质量小于12000的小分子物质,其多肽含量为1·2mg/ml,核糖含量为152·94μg/ml,pH6·9±0·5,蛋白反应阴性,最大紫外吸收光谱在270nm处。该EYHBV-TF能明显抑制小鼠白细胞粘附(P<0·01),并能诱导小鼠跖趾部皮肤的迟发型超敏反应(P<0·01),与猪脾淋巴细胞制取的乙肝特异性转移因子(PSHBV-TF)检测结果接近(P>0·05)。而正常卵黄提取液组、非特异性转移因子和甲肝抗原(HAAg)对照组均不能表现出这两种效应(P>0·05)。结论EYHBV-TF与PS-TF主要理化性质和作用相类似,均具有乙肝抗原特异性细胞免疫活性。

两种检测方法对地塞米松诱导小鼠淋巴细胞凋亡的观察

目的探讨地塞米松体外诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡的实验方法,为进一步研究淋巴细胞凋亡对机体免疫调节作用机理及其临床应用提供实验依据。方法取昆明小鼠,分离其脾脏淋巴细胞制成单细胞悬液,实验组加入地塞米松(DEX)使终浓度为10-5mol/L,培养24 h后,采用瑞氏染色法光镜下观察凋亡细胞形态,用凝胶电泳法观察其DNA ladder;同时设立不加DEX的对照组及新鲜淋巴细胞对照组。结果光镜观察,淋巴细胞在DEX作用下,可见典型的凋亡形态特征变化,主要表现为细胞核边聚、浓缩,以“齿轮状”细胞改变多见;DNA凝胶电泳图谱呈现典型的凋亡DNA ladder,两种方法结果相符。而未加DEX对照组凋亡细胞明显偏少,新鲜淋巴细胞对照组未见凋亡改变。结论体外条件下用DEX可高效诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡,用瑞氏染色法及DNA凝胶电泳法能准确、快速鉴定凋亡淋巴细胞。

南昌地区健康儿童末梢血微量元素的检测及其相关因素分析

目的了解本地区不同年龄段健康儿童的微量元素水平,分析微量元素缺乏的相关因素。方法采用原子吸收分光光度法检测1027名健康儿童末梢血铜、锌、钙、镁、铁元素的含量。结果0～1岁组婴儿的缺铁、缺锌率最高,分别为72.63%和28.10%;缺钙率最高的是3+～5岁组,为34.54%。结论0～1岁组铁、锌的高缺乏率主要与膳食结构有关;3+～5岁组的高缺钙率与家长们未重视钙的补充以及幼儿活动量大、能量消耗增多有关。检测儿童末梢血微量元素的含量水平,对及时调整婴幼儿的膳食结构,合理地补充微量元素有重要的指导作用。

重组(酵母)乙型肝炎疫苗接种母鸡的体液免疫应答

近年来,对鸡抗体研究较多,现已证明用病原体免疫母鸡可诱发机体产生特异性抗体,但用重组酵母乙肝疫苗刺激母鸡诱发免疫应答的研究还未见报道.为此本实验采用重组酵母乙肝疫苗免疫母鸡,观察其血清特异性抗体变化及其诱发体液免疫应答水平及免疫应答持久性.

基因乙肝疫苗接种母鸡的体液免疫应答

目的 :探讨基因乙肝疫苗对母鸡免疫效果的影响。方法 :用基因乙肝疫苗辅以佐剂皮下注射母鸡 ,随后加强免疫 4次 ,用ELISA方法检测血清中抗 HBs。结果 :在初次免疫母鸡血清中检出低滴度抗体 ,加强免疫后 ,抗体水平显著上升 ,滴度高达 1∶6 40 ,并维持较长时间 ,其抗体水平及抗体应答持久性与注射次数与注射途径有关。此外 ,用乙肝疫苗加佐剂比单用乙肝疫苗免疫效果明显要好。结论

2004～2007年南昌地区淋球菌耐药趋势的分析研究

目的了解南昌地区2004～2007年淋病奈瑟菌株对抗生素敏感性的变迁,产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)的流行状况。方法采用琼脂扩散法,选用六种常用的抗生素对临床分离到的淋病奈瑟菌株进行耐药性测定分析;应用头孢噻吩显色法检测PPNG菌株。结果2004～2007年青霉素的耐药率由33.33%上升到51.02%;环丙沙星的耐药率由88.62%上升到97.96%;而头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、壮观霉素一直处于高敏感率状态。在检出的青霉素耐药菌株中,PPNG占80%以上。而就诊患者淋球菌检出率呈下降趋势。结论头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、壮观霉素可作为南昌地区治疗淋病的首选药;青霉素、环丙沙星耐药率呈上升趋势,已不宜作为治疗淋病的可选药物。