过表达endophilin A2减轻异丙肾上腺素诱导的心肌肥大

目的:研究过表达吞蛋白A2(endophilin A2,Endo A2)对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的心肌肥大的影响。方法:取健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、Ad-EndoA2组、ISO模型组及ISO+Ad-EndoA2组,其中Ad-EndoA2组和ISO+Ad-EndoA2组于给药前1 d左心室壁注射Ad-EndoA2腺病毒,假手术组和ISO组注射磷酸缓冲盐溶液,然后分别连续7 d皮下注射生理盐水或ISO。7 d后用小动物超声测定心功能指标,然后处死大鼠,收集心脏,以心脏重量指数、HE染色及胚胎基因表达水平评价心肌肥大情况,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3和P62的表达。结果:小动物超声结果显示,与假手术组相比,ISO组大鼠处于心肌肥大代偿期(左室收缩期前壁厚度、左室收缩期后壁厚度、射血分数和短轴缩短率升高,左室收缩内径及心输出量下降,均P <0. 05),心脏重量指数、HE染色及RT-qPCR结果也均显示心脏发生了明显肥大(P <0. 05),过表达Endo A2可明显减轻ISO诱导的心肌肥大,改善心功能(P <0. 05)。Western blot结果显示,过表达Endo A2明显逆转ISO引起的自噬水平降低(P <0. 05)。结论:过表达Endo A2可减轻ISO诱导的大鼠心肌肥大,可能与加强自噬有关。

青蒿琥酯对小鼠巨细胞病毒性肺炎的治疗作用

为了探索青蒿琥酯对小鼠巨细胞病毒性肺炎的治疗作用及其机制,应用滴鼻法建立携带绿色荧光蛋白的小鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus-green fluorescent protein,MCMV-GFP)感染的巨细胞病毒性肺炎模型。动物福利和实验过程均遵循广州医科大学动物伦理委员会的规定。将BALB/c-nu小鼠随机分为5组:空白对照组、巨细胞病毒肺炎模型组、青蒿琥酯60、120和240 mg·kg^-1组。观察小鼠生存期和肺组织病理变化,并进一步进行分子机制研究。分别采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法检测肺组织的病理变化;荧光定量PCR(polymerase chain reaction)方法检测肺组织中MCMV主要即刻早期基因1(major immediate early 1,Mie1)mRNA的表达;免疫荧光法检测MCMV-GFP的表达;ELISA法(enzyme-linked immunosorbent assay)检测肺上清炎症因子白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、IL-10和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的含量;Western blot法检测感染后肺组织NF-κB(nuclear factor-κB)通路的变化;绘制小鼠体重变化和生存曲线图。结果显示,MCMV感染模型组小鼠肺组织出现大量炎症细胞浸润,肺组织结构破坏。青蒿琥酯(120 mg·kg^-1)治疗后的小鼠肺部炎症减轻,肺泡结构明显好转。与MCMV感染模型组相比,青蒿琥酯(120和240 mg·kg^-1)剂量组治疗后,小鼠肺部病毒复制水平降低,青蒿琥酯(120 mg·kg^-1)剂量组可显著降低促炎因子IL-6和TNF-α水平并增加抗炎因子IL-10的水平;磷酸化NF-κB蛋白表达明显下降,治疗组小鼠体重增加,生存期延长。上述结果表明,青蒿琥酯具有抑制MCMV感染小鼠肺炎的作用,通过抑制NF-κB炎症信号通路的激活,减轻肺组织炎症因子IL-6和TNF-α的释放,并增加抗炎因子IL-10的表达,从而实现减轻肺部组织炎症的作用。