低氧模拟剂氯化钴对胃癌细胞BGC823中S100A4基因表达的影响

S100A4基因是肿瘤侵袭转移相关的重要基因,该基因高表达与胃癌浸润、淋巴结转移及胃癌细胞体外侵袭力密切相关。为探讨S100A4基因高表达的机制,文章应用低氧模拟剂氯化钴处理胃癌细胞BGC823,RT-PCR、免疫组化、免疫荧光及Westernblotting方法分别检测BGC823细胞中S100A4mRNA及蛋白表达情况。结果显示,氯化钴处理胃癌BGC823细胞后,S100A4mRNA及蛋白表达明显增加。提示低氧模拟剂氯化钴可促进胃癌细胞BGC823中S100A4基因表达。

B-RAF基因特异的siRNA干扰对胃癌BGC823细胞的影响

为探讨B-RAF基因特异的siRNA干扰对胃癌BGC823细胞的增殖和凋亡的影响,设计并合成B-RAF小分子干扰RNA(B-RAF-siRNA)和阴性对照siRNA,用TransMessenger介导转染胃癌BGC823细胞,RT-PCR分析检测胃癌BGC823细胞中B-RAF基因以及Bcl-2基因的表达;MTT检测胃癌BGC823细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并与对照组进行比较。TransMessenger能够有效介导B-RAF-siRNA和阴性对照siRNA转染胃癌BGC823细胞,TransMessenger介导的B-RAF-siRNA有效地抑制胃癌BGC823细胞B-RAF以及Bcl-2基因的表达,与对照组相比,抑制率达90.0%以上,最高达100%;同时明显抑制胃癌BGC823细胞增殖;促进胃癌BGC823细胞的凋亡(P<0.01)。B-RAF基因特异的siRNA干扰能有效地抑制胃癌BGC823细胞中B-RAF基因以及Bcl-2基因的表达,同时促进胃癌细胞凋亡和抑制胃癌细胞增殖。

RNA干扰抑制RPS12基因表达对胃癌细胞凋亡的影响及分子机制探讨

目的:探讨RPS12基因特异的RNA干扰对胃癌BGC823细胞凋亡的影响及机制。方法:设计并构建RPS12特异性shRNA表达载体(RPS12-shRNA),以Lipofectamine2000介导将RPS12特异性shRNA及Scram-ble-shRNA表达载体分别转染胃癌细胞。RT-PCR方法检测BGC823细胞中RPS12基因及凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA的表达,流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析RNA干扰对细胞凋亡的影响。结果:RT-PCR结果显示,RPS12-shRNA表达载体转染第3、5、7天后,RPS12基因表达低于对照组,其中第5天下调最明显。RPS12特异性RNA干扰第5天、第7天后,Bcl-2 mRNA表达明显下调,BaxmRNA表达无明显改变。流式细胞术分析结果显示,RNA干扰RPS12基因第7天后,胃癌细胞凋亡率(17.84%)明显高于对照组(1.89%)。结论:RNA干扰RPS12基因促进胃癌细胞凋亡作用可能是其作为上游基因通过下调Bcl-2基因表达而实现的。

浅谈产后健康教育

爱婴医院和母婴同室区的建立,使产妇分娩后很快肩负照顾新生儿的责任,加之产妇在妊娠期和分娩时体力大量消耗,宫内尚有较大创面,全身又有一系列的内分泌改变,抵抗力下降，易于感染疾病。所以对产妇产后进行健康教育非常重要，为了提高产后健康教育的质量，近几年来我科进行一种新式的产后健康教育，通过对患者的满意度调查，发现产妇与家属对护士服务态度满意率有明显提高，现介绍如下。

浅析上海地区基桩低应变检测技术与常见问题的处理方法

根据作者多年工作经验,参考各类文献,简述低应变检测技术,并对上海地区基桩低应变检测中遇到的问题加以分析,提出部分解决方法。

上海地区岩土工程中桩基静载检测的问题及建议

在岩土工程施工过程中，桩基发挥着重要作用。随着岩土工程快速发展，对桩基的要求也在逐渐提高。为了防止出现桩基问题，需要对岩土工程桩基进行静载检测。文章对上海地区岩土工程桩基静载检测的问题及建议进行了探讨。

浅谈异位妊娠的术前术后护理

异位妊娠也称宫外孕,是指受精卵在子宫体腔以外着床。异位妊娠是妇产科常见的急腹症,是孕产妇主要死亡原因之一,近年我院从住院率来看有上升的趋势,异位妊娠严重威胁妇女的身心健康,甚至危及生命,一旦明确诊断,需尽快缩短时间做好抢救及护理工作尤其重要。

Williams-Beuren综合征胎儿的家系诊断及无创产前检测

目的对1例超声检查提示心室间隔缺损的胎儿进行遗传学诊断,追溯其变异的来源,同时评估扩展的无创产前检测的灵敏度和有效性。方法采用G显带核型分析技术对胎儿羊水及其父母的外周血进行染色体核型分析,采用高通量测序技术对胎儿脐带血及其父母的外周血进行染色体拷贝数变异检测,同时对孕妇外周血样进行胎儿游离DNA拷贝数变异检测,采用荧光原位杂交对结果进行验证。结果胎儿羊水及其父母的外周血核型分析结果均未见异常,拷贝数检测提示胎儿染色体7q11.23区存在1.30 Mb的缺失,覆盖了Williams-Beuren综合征约93%的区域,其父亲在该区域缺失1.42 Mb,覆盖了Williams-Beuren综合征约99.8%的区域。荧光原位杂交检测提示胎儿及其父亲7q11.23区均存在缺失,与拷贝数检测结果相符。孕妇外周血胎儿游离DNA拷贝数检测提示胎儿7q11.23区缺失1.30 Mb,提示其具有较高的风险罹患Williams-Beuren综合征。结论胎儿的心室间隔缺损可能由染色体微缺失导致。应用高通量测序技术进行家系检测,有助于检出染色体微缺失并追溯变异的来源。通过扩展的无创产前检测方法可检出7q11.23缺失引起的胎儿Williams-Beuren综合征。

来源于9号染色体短臂四体的标记染色体的产前诊断

孕妇30岁,G1P0。孕早期唐氏筛查低风险;孕19^+4周在本院超声检查提示胎儿室间隔缺损、单脐动脉、左侧脉络丛囊肿、小脑蚓部异常、双肾回声增强。夫妻双方表型正常,非近亲结婚,无不良遗传病家族史。

两例Y染色体部分缺失胎儿的产前诊断

目的对两例Y染色体部分缺失胎儿进行产前诊断。方法采用常规G显带及C显带技术分析胎儿及父亲的核型,采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、染色体拷贝数变异检测技术(copy number varaition sequencing,CNV-seq)性别决定基因(sex region of Y chromosome,SRY)检测技术及无精子因子(azoospermia factor,AZF)检测技术检测胎儿DNAO结果2例胎儿羊水染色体在320〜400条带水平均提示46,XN,del(Y)(qll.2),Y染色体着丝粒探针FISH检测结果均提示Y染色体数目未见异常。2例胎儿父亲外周血染色体核型均未见明显异常。胎儿羊水DNA拷贝数检测提示一例胎儿Y染色体q 11.221-ql2处缺失12.88 Mb,涉及全部AZFb+AZFc区域;另一例胎儿Y染色体qll.21-ql2处缺失14.84 Mb,涉及全部AZF区域。2例胎儿羊水SRY基因检测提示SRY基因阳性,SKY基因编码区未检测到已报道的致病点突变。2例胎儿基因检测提示存在AZF部分或全部缺失。结论联合多种技术有助于明确诊断Y染色体结构异常。CNV-seq检测有利于快速筛查胎儿Y染色体微缺失,可做为对染色体核型分析的补充和验证的方法。

一例Emanuel综合征胎儿的遗传学诊断及追溯

目的对1例孕30怕周B超提示为Dandy-Walker畸形的胎儿进行遗传学检查，追溯其发病原因，并为其父母在再次妊娠时提供产前诊断。方法应用常规G显带法分析患儿及其父母的染色体核型，之后用下一代测序和荧光原位杂交对患儿及其母亲进行分析。再次妊娠时应用上述方法对胎儿进行产前诊断。结果G显带染色体分析显示胎儿的核型为47，XX，＋mar，其父亲核型正常，母亲核型为46，XX，t（11；22）（q23；q11）。胎儿脐带血DNA下一代测序的结果提示其11号及22号染色体上存在重复区段，荧光原位杂交结果证实胎儿所携带的标记染色体为＋der（22）t（11；22）（q23；q11），确诊为Emanuel综合征。再次妊娠时产前诊断提示胎儿携带与母亲相同的平衡易位。经咨询后孕妇选择继续妊娠，并生育一正常儿。结论成功诊断1例Emanud综合征胎儿，其标记染色体来源于母亲所携带的46，XX，t（11；22）（q23；q11）平衡易位。对于产前发现的Dandy-Walker畸形进行染色体检查非常重要，必要时可结合高分辨率的检测手段以明确其病因。

联合低深度全基因组测序及核型分析在产前诊断中应用

目的探讨基于下一代测序(NGS)技术的基因组拷贝数变异测序(CNV-seq)联合核型分析技术在产前诊断中的应用价值。方法于2017年1月1日-2018年12月31日以辽宁沈阳地区516例行羊水产前诊断的单胎妊娠孕妇为研究对象,进行常规G显带核型分析联合CNV-seq技术对胎儿羊水进行染色体分析。结果 CNV-seq检出核型分析漏检的30例染色体拷贝数变异(CNVs),明确13例核型分析提示染色体结构异常的具体位点,并检出5例> 10%嵌合体,但漏检1例低比例(1%)嵌合体和13例被核型分析检出的染色体结构异常。结论 CNV-seq弥补了核型分析技术分辨率低的不足,提高了异常染色体检出率,值得在产前诊断方面推广和应用。

一例Prader-Willi/Angelman综合征胎儿的遗传学诊断及无创产前检测

目的 明确1例超声提示宫内生长受限胎儿的病因,同时验证扩展的无创产前检测技术针对此类微缺失改变的灵敏度和有效性.方法 采用高通量测序技术同时检测胎儿脐带血染色体拷贝数及孕妇外周血胎儿游离DNA拷贝数,采用常规G显带分析技术分析胎儿及父母的核型,采用荧光原位杂交技术对结果进行验证.结果 胎儿脐带血染色体拷贝数检测提示胎儿15号染色体q11.2-q13.1处缺失4.88Mb,覆盖了Prader-Willi综合征(2型)和Angelman综合征(2型)约99%区域,且包含了两个关键基因SNRPN及UBE3A.孕妇外周血胎儿游离DNA拷贝数微缺失检测提示胎儿15号染色体q12处缺失4.6Mb,为Prader-Willi/Angelman综合征高风险.胎儿及父母染色体在320-400条带水平未见明显异常.荧光原位杂交检测结果证实胎儿15q12处存在缺失.结论 该胎儿生长受限病例可能由Prader-Willi/Angelman综合征引起.通过扩展的无创产前检测方法可能检出该微缺失综合征.

早期自然流产的遗传学因素分析

目的对早期流产组织进行遗传学检测,并对各种染色体异常的年龄分布进行分析。方法综合应用染色体核型分析、高通量基因测序及荧光原位杂交技术,对180份稽留流产绒毛组织进行检测,分析不同年龄孕妇流产组织中染色体异常的发生率,同时分析各种染色体异常的年龄分布情况,并分析异常胚胎的亲代染色体核型。结果在180例稽留流产绒毛样本中,共发现染色体异常89例,其中数目异常77例,拷贝数异常12例。在35岁以上的孕妇中,胚胎染色体异常发生率最高。结论高通量测序技术能够对流产组织进行高效检测,失败率低,对样本要求低,检测分辨率高。同传统的染色体核型分析以及荧光原位杂交相结合,能够显著提高染色体异常的检出率。