离子液体中酶催化的脂肪胺的不对称酰基化反应

以离子液体为酶促不对称酰基化反应介质,对脂肪胺进行了手性拆分。催化剂为Novozym 435,200mg;酰基供体为甲氧基乙酸甲酯,420 mg,4 mmol;反应在20 mL离子液体[bmim]BF4中进行,反应温度为50℃。目标化合物的转化率和ee值分别为42.6%和99%。该方法还可以用于其它脂肪胺类化合物的手性拆分。

核酸适配体在液相色谱和毛细管电泳中的应用

指数富集配体的系统进化(SELEX)技术是一种新的组合化学技术,应用人工合成的随机寡核苷酸文库,通过筛选、分离、富集获得能与氨基酸、蛋白、药物、有机小分子、无机离子等靶分子特异性结合的寡核苷酸适配子,对于靶分子具有高亲和力。本文从核酸适配体分子识别特性出发,综述了核酸适配体在液相色谱和毛细管电泳中应用的研究进展。

膜电喷雾质谱法快速检测细菌氨基糖苷耐药性

目的针对细菌耐药性的产生和传播已成为全球重要公共卫生问题的现状,拟建立细菌氨基糖苷耐药性的快速检测方法。方法基于膜电喷雾质谱法,以ArmA蛋白的特异性肽段TYDVVFLLK(TK-9)特征性母子离子对为检测目标,建立了细菌氨基糖苷耐药性的快速检测方法。结果采用合成的标准肽段用于建立和验证定性定量检测方法学。由于膜电喷雾离子化技术可大幅度提高质谱检测灵敏度,使得检测流程仅需进行2h增菌,与微波酶解法配合运用可最大程度缩短样本前处理流程。结论经验证该方法可成功检测模拟真实环境样本中细菌氨基糖苷耐药性,具有极高的检测灵敏度和准确度。在今后的研究中有望将该方法用于对环境样本中其它细菌耐药蛋白的快速检测。

2017-2022年全国斑疹伤寒流行特征分析

目的分析我国2017—2022年斑疹伤寒流行特征,为制定斑疹伤寒防控策略提供科学依据。方法通过中国疾病预防控制信息系统传染病报告信息管理系统收集全国各省(自治区、直辖市)2017—2022年斑疹伤寒监测个案数据,运用描述流行病学方法进行分析。结果2017—2022年全国每年报告病例数(发病率)分别为929例(0.07/10万)、971例(0.07/10万)、1173例(0.08/10万)、1069例(0.08/10万)、1310例(0.09/10万)、1291例(0.09/10万),报告病例数及发病率呈波动增加趋势。2017—2022年每年有22~24个省份[309~342个县(区)]报告病例,主要分布于云南、广东、四川、安徽、湖北、山东、广西、湖南、河北9个省份(自治区),9个省份(自治区)每年合计报告病例数占全国病例数比例波动于85.56%~91.14%,其中云南、安徽、湖北省每年报告病例数及占全国报告病例数比例均呈增加趋势,山东省呈下降趋势。全国每年报告病例居前10位县(区)合计报告病例数(占全国病例数比例)分别为293例(31.53%)、284例(29.25%)、332例(28.30%)、400例(37.42%)、579例(44.20%)、636例(49.26%)。职业分布主要为农民、学生、散居儿童及幼托儿童,每年占报告病例数的比例分别波动于61.04%~65.60%、10.71%~15.43%、7.67%~9.80%。男女性别比波动于0.86∶1~1.02∶1之间。每年报告病例均以40~64岁年龄组病例占比最高,波动于38.54%~43.69%。结论2017—2022年每年报告斑疹伤寒病例数居前的省份均为云南、安徽、广东、广西、四川、湖北、湖南、河北、山东9省份(自治区),每年合计报告病例数占全国病例数均在85.00%以上,云南、湖北、安徽省每年报告病例数呈增加趋势。病例高度散发与局部高发并存。应动态开展疫情分析、风险评估及预警,加强重点地区、重点人群综合防控措施,进一步降低居民感染风险。

1950-2021年中国斑疹伤寒流行特征分析

目的分析斑疹伤寒在我国的流行病学特征,探讨我国斑疹伤寒防控工作面临的问题及挑战和策略。方法资料来源于中国公共卫生科学数据中心传染病历史数据库和中国疾病预防控制信息系统传染病报告信息管理系统1950-2021年斑疹伤寒报告数据,采用描述性统计方法、Mann-Kendall检验和圆形分布法对斑疹伤寒的发病情况、死亡情况、病死率进行分析,研究我国斑疹伤寒流行的时间、空间、人群分布和诊断现状。结果1950-2021年,我国共报告斑疹伤寒发病数452965例,死亡数7339例,分别在20世纪50年代、60年代和80年代的14年中报告发病数均过万。20世纪90年代以来,斑疹伤寒发病数和发病率大幅降低,流行强度以散发为主,但安徽省、湖北省和湖南省报告发病数呈上升趋势。斑疹伤寒在全年均可发病,但可呈现一定的季节聚集性,我国斑疹伤寒的发病率高峰集中在夏、秋季,不同省份斑疹伤寒的月发病高峰从北方至南方逐渐向前推移。斑疹伤寒发病的男女性别比为1.01∶1(18529∶18366),近年来女性发病数逐渐超过男性;≤9岁人群发病数占比最大(18.9%),≥50岁人群发病数呈增加趋势;发病人群职业以农民为主,并呈逐年增加趋势,学生和散居儿童发病数占比也较大。斑疹伤寒病例从发病日期至诊断日期间隔时间的中位数为6 d,实验室确诊病例占比较低,检测方法为外斐反应为主。结论尽管我国斑疹伤寒流行态势整体好转,仍需警惕局部暴发的风险,其防控工作仍面临很多挑战,需加强斑疹伤寒病原体检测和监测能力建设。

TaqMan-探针实时荧光定量PCR同时检测立克次体目中7种重要病原菌

目的建立及优化检测立克次体目中7种重要病原菌的TaqMan-探针实时荧光定量PCR(qPCR)方法,可同步检测并明确感染类型。方法根据普氏立克次体、莫氏立克次体和斑点热群立克次体ompB基因、恙虫病东方体groEL基因、查菲埃立克体16S rRNA基因、嗜吞噬细胞无形体gltA基因和贝氏柯克斯体com1基因序列合成引物和探针,优化反应体系及反应程序至同一方案,对该方法灵敏度、特异性和重复性等进行评价,并使用该方法对模拟样本和实际样本进行检测。结果7种病原菌标准曲线的Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(均R^(2)>0.9900),所建立方法最低检测限均为1×10拷贝数/μl且具有良好的特异性。96份蜱虫核酸提取物样本中,1份样本检出贝氏柯克斯体,3份样本检出斑点热群立克次体;80份不明原因发热患者血标本DNA中,1份样本检出恙虫病东方体,2份样本检出斑点热群立克次体。结论本研究基于TaqMan-探针qPCR方法,将7种病原菌反应体系及反应程序优化至同一方案,克服目前不同立克次体目病原菌采用不同的反应体系和反应程序的缺点,可将临床样本中立克次体目的7种重要病原菌精确定位检测至种,明确感染病原菌类型并缩短检测时间,有助于对患者的精准诊治。

植物应答非生物胁迫的代谢组学研究进展

代谢组学技术是研究植物代谢的理想平台,通过现代检测分析技术对胁迫环境下植物中代谢产物进行定性和定量分析,可以监测其随时间变化的规律。而各种组学平台包括基因组学、转录组学及代谢组学的整合,更是一个强有力的工具箱,将所获得的不同组学的信息联系起来,有利于从整体研究生物系统对基因或环境变化的响应,如可判断代谢物的变化是从哪一个层面开始发生的,帮助人们揭开复杂的植物胁迫应答机制。该文对近期代谢组学技术及其与蛋白质组学、基因组学技术相结合探索植物应答非生物胁迫的研究进行了综述。代谢组学的应用,拓展了对植物耐受非生物胁迫分子机制的认识,开展更多这方面的研究,再通过植物代谢组学、转录组学、蛋白质组学和基因组学整合,有助于从整体水平上把握植物胁迫应答机制。

基于HS-SPME-GC-MS的不同产地彝药满山香挥发性成分比较研究

建立与优化了基于顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱技术（HS-SPME-GC-MS）的彝药＂满山香＂挥发性成分的定性与半定量分析方法。并利用该方法对4个不同产地满山香中挥发性成分进行了分析与评价,共鉴定出了54种成分,云南武定、云南罗平、贵州清镇与湖北神农架产地的样品分别鉴定出51,53,52和50种挥发性成分,其中46种挥发性成分为4个产地共有。采用主成分分析、聚类分析等化学计量学方法比较不同产地满山香挥发性成分的差异。结果表明,通过挥发性组分的分析可以区分4个产地的满山香,而地理位置接近的产地的满山香样品中挥发性成分组成具有一定的相似性。该文所建立的方法稳定可靠,适用于满山香中挥发性成分的快速分析,可以为彝药满山香的质量控制、药物开发和资源的科学利用提供重要依据。

药用植物基因工程的研究进展

虽然伴随着一定的质疑,但基因工程技术在现代农业中的应用显示了其在应对粮食短缺等全球性问题上的出色作用和巨大潜力。药用植物同样面临着资源匮乏、生长环境恶化、种质衰退等一系列问题,使药用植物传统种植和采集模型受到极大的挑战。基因工程技术由于可以赋予传统植物新的特性从而给药用植物的发展带来了希望和曙光。基因工程技术可以用来提高药用植物的抗病、抗虫、抗除草剂的能力,提高药用植物的产量,增加药用植物中活性物质的含量,改善药材的品质等方面,有利于药用植物的大面积种植和保护。在发展药用植物基因工程过程中,转基因药用植物的安全性也应受到重视,在充分认识到药用植物特殊性的基础上建立一套科学的,适用于转基因药用植物的安全性评价体系和判断标准,促进转基因技术在药用植物领域健康、可持续发展。在保证安全性的前提下,使基因工程技术的优势在药用植物研究和应用中得到充分的利用。

显微共聚焦拉曼技术在细菌分类鉴定中的应用

拉曼光谱可以用于识别和描述微生物的特征,作为当今微生物分类鉴定研究的热点。相比于传统的微生物分离培养技术和分子生物学鉴定技术,拉曼技术具有免培养、快速和高效等优点。随着光学领域拉曼技术和分子生物学的结合发展,使得微生物的鉴定变得更加高效快捷。拉曼显微光谱结合稳定同位素探针、荧光原位杂交和光镊技术,为研究生态系统中不可培养微生物的功能和生理提供了一种独立的方法。显微共聚焦拉曼技术在细菌分类鉴定中具有巨大的应用前景。本文主要阐述拉曼光谱技术的基础知识和显微共聚焦拉曼技术在细菌分类鉴定中的研究进展,并对该技术的优缺点进行总结和评价,旨在为拉曼光谱技术应用于微生物学的研究提供参考。

血竭活血化瘀作用的GC-MS代谢组学初步研究

目的:利用代谢组学技术,从内源代谢产物的角度探讨传统药材—血竭的活血化瘀作用。方法:将大鼠分组,分别为正常对照组、血瘀证模型组(血瘀证模型大鼠)和血竭给药组(血瘀证大鼠灌胃给予血竭),采集血浆并采用GC-MS方法检测各组大鼠血浆中的内源代谢产物。通过主成分分析和偏最小二乘法等数据分析方法寻找血瘀证大鼠的血浆的差异代谢物,分析大鼠给药后血浆内源代谢产物的变化趋势。结果:建立了基于GC-MS的大鼠血浆内源性代谢产物分析方法,并进行了方法学的确证;采用该方法在大鼠血浆中分析得到约200个数据点,其中约有30个数据点在与NIST库的匹配中得到了初步的鉴定。通过多元数据分析发现了若干血瘀证大鼠差异代谢物,包括乳酸、D-3-羟基丁酸、缬氨酸、异亮氨酸等,这些差异性代谢物与血瘀证相关的代谢通路有密切的联系;血瘀证大鼠经过血竭给药之后,其血浆中的差异代谢物的浓度发生明显的变化,即各差异代谢物指标与血瘀证模型组相比都有一定的恢复作用,代谢组学研究结果与血瘀证大鼠血液流变学实验结果相吻合。结论:建立了血瘀证大鼠的血浆内源代谢产物的研究方法,并将该方法应用于血竭活血化瘀作用的研究中,从代谢组学的角度证实了血竭对血瘀证的治疗作用。

不明原因发热患者血样中9种致病性胞内菌病原调查

目的 基于实时荧光定量PCR技术初步调查分析9种胞内致病菌在不明原因发热患者中的临床意义。方法 靶向立克次体17 kDa、恙虫病东方体47 kDa、埃立克次体dsb、无形体msp2、贝氏柯克斯体23S rRNA、鹦鹉热衣原体omp1、巴尔通体ssr A、土拉弗朗西斯菌ISFtu2、布鲁氏菌bcsp31属特异性基因保守区域合成TaqMan引物和探针,优化统一反应条件,评估特异性和可行性,实施临床血样多病原筛查。结果 本研究优化了一种同时检测9种病原的TaqMan PCR阵列,分析显示各探针引物组与非目标物种无交叉反应,对内蒙古中西部2021年3—12月临床不明原因高热患者血样(N=335)进行的可行性验证发现,检出率10.75%(36/335)。阳性病例以40~79岁男性为主;职业为农民、牧民等与动物接触频繁的人群。其中无形体6.87%(23/335),立克次体2.99%(10/335),布鲁氏菌0.90%(3/335)。巢式PCR和测序揭示,检测到的立克次体与西伯利亚立克次体高度相关。结论 提示内蒙古西部地区不明原因发热患者中特别是40~79岁男性农牧民中主要感染的胞内病原体可为无形体、立克次体、布鲁氏菌,提示当地临床医生和卫生行政部门应予重视。

膜电喷雾质谱法快速检测临床样本中志贺毒素

志贺毒素是大肠杆菌O157:H7重要的毒力因子,是毒力最强的毒素之一。本文建立了采用膜电喷雾质谱(MESI-MS/MS)快速检测人粪便样本中志贺毒素的方法。将两种志贺毒素的特异性肽段作为检测目标物,在蛋白水平上对志贺毒素进行检测。对肽段YNDDDTFTVK(YK1)和YNEDDTFTVK(YK2)的母子离子对建立了定量检测方法,并对检测方法学进行了验证。实验结果表明方法具有良好的检测精密度、准确度以及回收率。MESI-MS/MS具有去除基质效应的能力,可对酶解后的混合蛋白样本实现直接检测,全部操作过程可在3 h内完成。方法有望推广至其它细菌毒素的检测,且有望与便携式质谱相结合实现现场快速检测。

顶空进样GC-MS比较蕲春与南阳产艾叶的挥发性成分（英文）

目的:观察比较湖北蕲春与河南南阳两个产地艾叶的挥发性成分的种类。方法:采用顶空加热提取艾叶挥发性成分并进行气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析,结合美国国家标准与技术研究院(National Institute of Standards and Technology,NIST)提供的标准数据库进行定性分析,以峰面积归一化法计算各组分的相对含量。结果:从湖北蕲春产艾叶中鉴定出59种化合物,从河南南阳产艾叶中鉴定出51种化合物,主要为单萜类、倍半萜及其含氧衍生物,及其他的醛、酮、烷及苯系化合物。两地艾叶药材挥发性成分中有32种共有成分,具有一定差异;所鉴定化合物的色谱流出峰面积占湖北蕲春艾叶GC-MS色谱总流出峰面积的96.38%,占河南南阳艾叶的95.54%。结论:顶空加热提取结合GC-MS技术可以便捷地揭示不同产地艾叶的挥发性成分异同,为艾材的质量评价和筛选提供一定科学依据。