革兰氏阳性荚膜细菌基因组DNA提取方法的优化比较研究

提取高质量的基因组DNA对于分子生物学相关研究至关重要,具有荚膜的革兰氏阳性细菌由于细胞壁肽聚糖层较厚,现有常规方法很难破壁(破壁困难)、并获得理想的基因组DNA,本文旨在探寻一种高效稳定针对该类菌的 DNA提取方法。方法:以S. mucilaginosus 和C.perfringens为受试菌,采用4种常规法和优化的细菌基因组DNA提取方法,对5种提取基因组DNA应用紫外分光光度和琼脂糖凝胶电泳技术检测其纯度及完整性比较,并进行16SrDNA基因有效扩增验证。结果:优化的超低温冷冻—溶菌酶破壁法提取得到的DNA质量浓度较高,且平行样间浓度和纯度稳定。结论:为革兰氏阳性荚膜细菌基因组DNA提取提供参考。