电针联合中药熏洗、功法锻炼对膝骨关节炎的康复疗效

目的:观察电针联合中药熏洗、功法锻炼对膝骨关节炎(KOA)康复的影响。方法:将78例KOA患者按照随机数字表法分为试验组和对照组各39例。2组均给予基础治疗(健康教育及必要时抗炎镇痛药应用),对照组进行中药熏洗、功法锻炼,试验组在对照组的治疗基础上加电针。治疗4周后,2组通过KOA症状分级量化表、视觉模拟评分法(VAS)、美洛昔康人均用量、5次坐-立试验(FTSST)、膝关节屈伸度等指标进行康复的疗效评价。结果:2组治疗后KOA症状分级量化表评分、VAS评分、FTSST时间均明显降低而膝关节屈伸度明显提高(P<0.01),2组治疗前后差值比较差异有统计学意义(P<0.01);试验组的美洛昔康人均用量明显少于对照组(P<0.01)。结论:电针联合中药熏洗、功法锻炼可改善KOA患者综合功能,减轻患者疼痛,提高下肢肌力,改善关节屈伸活动度。

近17年针刺治疗膝骨关节炎取穴及配伍分析

目的:分析近17年针刺治疗膝骨关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)取穴及配伍规律,为临床优化针刺治疗KOA的方案提供参考。方法:通过计算机检索2000年1月1日至2016年12月31日17年间万方数据知识服务系统、中文科技期刊数据库及清华同方知网数据库中针刺治疗KOA的相关文献,按照纳入、排除标准筛选得到所需文献,并进行分类整理,将篇名、穴位名称录入Microsoft Excel 2010表格中,建立数据库,采用频数统计方法分别统计腧穴使用频次、归经、配伍规律等信息。结果:纳入1 563篇文献,其中取穴多以十四经穴为主(5 312次),且足阳明胃经使用频数最高(2 264次);犊鼻(944次)、内膝眼(928次)、阿是穴(816次)、阳陵泉(738次)、血海(677次)为最常用腧穴;最常用的两个腧穴配伍为犊鼻与内膝眼(726次);常用三个腧穴配伍为犊鼻、内膝眼与血海(456次)或阳陵泉(455次)。结论:针刺治疗KOA常用穴位以近端局部取穴为主,多取十四经穴,且以足阳明胃经上的穴位最为常见;穴位配伍方面,以犊鼻为主穴,分别与内膝眼或(及)血海配伍使用最多见;此外,犊鼻、内膝眼配伍阿是穴或血海或阳陵泉组成的"膝三针",可作为临床治疗KOA的针刺小组方。

表观遗传修饰在哮喘中的作用

表观遗传学作为一种通过表观遗传修饰调控基因变化的机制,被认为与哮喘复杂的病理生理学变化密切相关,目前已成为哮喘研究的重要领域。因此,本文梳理表观遗传学机制及其对哮喘发病影响等方面的最新研究进展,并介绍该机制在哮喘治疗中的应用前景,以期为哮喘研究提供参考。

飞龙九一巴布贴抗炎、镇痛药效学及其对膝骨关节炎滑膜炎影响的研究

目的:明确飞龙九一巴布贴的抗炎镇痛效果及其对膝骨关节炎滑膜炎的疗效。方法:采用角叉菜胶致大鼠足趾肿胀炎症模型,热板致小鼠舔足、冰醋酸致小鼠扭体2个疼痛模型及木瓜蛋白酶致新西兰大白兔膝骨关节炎滑膜炎模型等,观察飞龙九一巴布贴对大鼠足趾肿胀度、小鼠痛阈值、扭体次数、兔关节表面温度、关节周径、改良Lequesne MG得分及滑膜组织形态学等指标的影响。结果:(1)抗炎镇痛药效方面,与致炎组及致痛组比较,巴布贴组可显著降低大鼠足趾肿胀程度,提高小鼠痛阈值,减少小鼠扭体反应次数(P <0.01)。在大鼠足肿胀实验中,致炎后0～2 h,巴布贴组对肿胀抑制作用弱于双氯芬酸二乙胺乳胶剂组(扶他林组)(P <0.05);致炎后2～8 h,巴布贴组比扶他林组对肿胀的抑制作用更强(P <0.05)。在小鼠热板法实验中,末次给药干预后0～1 h,巴布贴组对小鼠痛阈值的提高作用弱于扶他林组(P <0.05);末次给药干预后1～3 h,巴布贴组比扶他林组对小鼠痛阈值的提高更显著(P <0.05)。在小鼠扭体实验中,巴布贴组与扶他林组减少小鼠扭体次数的作用相当(P> 0.05)。(2)对膝骨关节炎滑膜炎影响方面,与空白组比较,模型组膝关节表面温度、关节周径、改良Lequesne MG得分显著升高(P <0.01);与模型组比较,巴布贴组各指标均显著降低(P <0.01),且滑膜炎症细胞浸润得到明显改善;与扶他林组比较,各指标差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论:飞龙九一巴布贴抗炎镇痛作用显著,对膝骨关节炎滑膜炎亦有显著抑制作用。

基于NALP3炎性体的痛风宁对急性痛风性关节炎大鼠抗炎作用量效和时效研究

目的观察痛风宁对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠NALP3炎性体及相关炎症因子的影响,探讨其抗炎作用的量效与时效关系。方法将240只SD大鼠随机分为造模组200只和正常组40只。右后踝关节腔内注射尿酸盐混悬液制作大鼠AGA模型,成模大鼠随机分为模型组、秋水仙碱组及痛风宁低、中、高剂量组,每组40只。正常组和模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,其余组大鼠给予相应药物灌胃干预。首次干预后6、12、24、48 h各组随机取10只大鼠处死,收集右后踝关节液与滑膜组织,采用ELISA、Western blot和RT-qPCR分别检测白细胞介素-1β(IL-1β)、前列腺素E2(PGE2)含量及NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠各时间点IL-1β、PGE2含量及NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,痛风宁中、高剂量组及秋水仙碱组大鼠各时间点IL-1β、PGE2含量及NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.01,P<0.05);与秋水仙碱组比较,痛风宁中、高剂量组大鼠各时间点IL-1β、PGE2含量及NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表达无明显差异(P>0.05),痛风宁低剂量组大鼠明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论中剂量痛风宁在下调模型大鼠NALP3、ASC、Caspase-1蛋白和mRNA表达及降低IL-1β、PGE2含量方面作用相对较佳,且首次干预后48 h抗炎作用相对明显。

中药凝胶贴膏的研究进展

中药凝胶贴膏作为临床经皮给药途径的主要药物剂型,相比其他外用剂型具有其独特优势和广阔的发展空间。目前,国内中药凝胶贴膏的相关研究主要集中在基质选择及配比、透皮促进剂、工艺研究和质量评价标准等方面,并取得了较大进展,但现阶段其发展仍存在一些制约因素。未来,国内中药凝胶贴膏的研究应在遵循中医药理论的基础上,将辨证论治和经络理念贯穿始终,并合理引入新技术、新设备和新工艺,从而研发出更加符合患者需求和高质量的中药凝胶贴膏新剂型。

单细胞转录组测序在哮喘研究中应用的研究进展

哮喘是一种异质性疾病,传统转录组测序方法获得的是同一基因在所有细胞中的平均表达水平,不能完全揭示异质性哮喘的发病机制及药物疗效。单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing,sc RNA-seq)是在单细胞水平对全转录组进行扩增与测序的一项新技术,能够获得每个细胞的m RNA表达信息,发现不同的细胞亚群及相关信息,揭示细胞间基因表达的异质性及鉴定稀有细胞类型,为深入研究和理解哮喘发病机制提供了新的技术手段。本文对sc RNA-seq技术在哮喘研究中的应用做一概述,以期为深入研究哮喘这一异质性疾病的发病机制提供新的视角和研究思路。

痛风宁含药血清对尿酸盐刺激的THP-1炎症反应的时效观察

目的:观察痛风宁对尿酸盐刺激的人单核细胞THP-1炎症反应的影响,揭示痛风宁发挥最佳抗炎效应的时间。方法:将THP-1随机分为单钠尿酸盐(MSU)造模组和空白对照组,MSU造模组给予MSU混悬液刺激诱导建立细胞炎症模型,空白对照组不予干预。将造模成功的THP-1再随机分为模型组、痛风宁组及阳性对照组,分别用10%空白血清、10%痛风宁含药血清、10%空白血清+Caspase-1抑制剂干预,空白对照组给予10%空白血清干预。于干预后6、12、24、48 h,检测各组THP-1中NALP3、Caspase-1、ASC蛋白、mRNA表达及IL-1β、前列腺素E_(2)(PGE_(2))含量。结果:干预后各时间点,模型组NALP3、Caspase-1、ASC蛋白与mRNA表达及IL-1β、PGE_(2)含量均高于空白对照组(P<0.01或P<0.05);各时间点痛风宁组所有指标水平明显低于模型组(P<0.01或P<0.05);各时间点阳性对照组IL-1β、PGE_(2)含量及Caspase-1蛋白表达均明显低于模型组(P<0.01或P<0.05),NALP3、ASC蛋白及3个mRNA表达差异无统计学意义(均P>0.05);干预后12、24、48 h痛风宁组所有指标水平均低于阳性对照组;痛风宁组各时间点间比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);在痛风宁首次干预达24 h时,炎性体相关蛋白及mRNA、炎症介质表达水平达到最低。结论:痛风宁干预尿酸盐刺激的THP-1后,于6 h、12 h、24 h、48 h均表现出显著抗炎效应,在首次干预后24 h抗炎效应达到高峰。

铁死亡在哮喘气道炎症中的作用及针刺干预研究进展

支气管哮喘(哮喘)是一种常见的慢性呼吸道疾病,是世界范围内严重影响人类健康的常见病、多发病之一。根据2015年全球疾病负担研究结果显示,全球哮喘患者高达3.58亿[1],成人哮喘患病率约为10%[2],随着城市化、工业化等现代文明的发展,近年来哮喘平均患病率呈上升趋势,预计到2025年可达4亿。儿童和青年人具有较高的哮喘发病率,是哮喘发病的主要人群,而老年人哮喘的发病率与青年人相似。

肾虚与骨质疏松症关联性研究进展

骨质疏松症(Osteoporosis,OP)是一种以骨量减少、骨组织微细结构退变为特征的全身性代谢性骨骼疾病[1],常见于老年人,随着我国人口老龄化的加剧,其发病率逐年上升。本病常可引起疼痛、脆性骨折、身高缩短、活动功能受限等临床表现[2],严重影响了患者的日常生活质量,故开展本病防治的相关研究具有积极的意义。中医认为肾之精气是骨骼生长发育的根本,肾虚与OP的关系非常密切[3]。

痛风宁对急性痛风性关节炎模型大鼠IL-1β,TNF-α及NALP3炎性体的影响

目的：从核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NALP3）炎性体角度探讨痛风宁的抗炎作用机制。方法：将48只SD大鼠随机分为造模大鼠36只、正常大鼠12只。造模大鼠采用踝关节局部注射O．2mL尿酸钠（monosodium urate，MSU）混悬液建立急性痛风性关节炎（acute outyarthritis，AGA）模型，正常大鼠予相同部位注射生理盐水。造模成功后，随机分为模型组、痛风宁组、秋水仙碱组，分别用生理盐水、痛风宁药液、秋水仙碱混悬液灌胃，每天2次，共3d。正常大鼠为正常组，同时予等量生理盐水灌胃。造模成功后72h，行腹腔注射麻醉后取踝关节液及滑膜组织。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠踝关节液白细胞介素-1β（IL-lβ），肿瘤坏死因子-a（TNF-a）含量；蛋白免疫印迹法（Westernblot）及实时荧光定量PCR（Real-timePCR）检测滑膜组织NALP3炎性体相关蛋白与mRNA表达。结果：与正常组比较，模型组大鼠踝关节液IL-1β，TNF-α含量显著升高，滑膜组织NALP3，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1），凋亡相关斑点样蛋白（ASC）蛋白及mRNA表达均显著增加（P〈0．01）；与模型组比较，痛风宁组与秋水仙碱组大鼠踝关节液IL-1β，TNF-1β含量显著下降，且滑膜组织中NALP3，Caspase-1，ASC蛋白及mRNA表达均显著降低（P〈0．01）；与秋水仙碱组比较，痛风宁组大鼠踝关节液IL-1β ，TNF-a含量仍较高（P〈0．05），但滑膜组织中NALP3，Caspase-1，ASC蛋白及mRNA表达均较低（P〈0．05，P〈0．01）。结论：痛风宁对AGA的抗炎作用机制可能是通过抑制NALP3炎性体相关蛋白及mRNA表达，从而减少IL-1β，TNF-α的生成，减轻关节炎症反应。

膝骨痹康熏洗剂联合电针、功法治疗膝骨关节炎的疗效观察

目的:观察膝骨痹康熏洗剂联合电针、功法治疗膝骨关节炎的疗效。方法:将60例膝骨关节炎患者,随机分为观察组和对照组各30例,对照组采用健康教育联合电针、功法进行治疗,观察组在对照组基础上给予膝骨痹康熏洗剂熏洗,两组患者均在VAS评分≥4分时配合口服美洛昔康分散片;治疗4周后,分别观察两组患者WOMAC(疼痛、僵硬、功能障碍)评分、肿胀评分及疗效。结果:治疗4周后,对照组患者的疼痛、肿胀及功能障碍积分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05),而僵硬积分无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者在疼痛、僵硬、肿胀及功能障碍积分方面均较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,组间比较,观察组疼痛症状的改善情况与对照组相当,差异无统计学意义(P>0.05),但在功能障碍、僵硬、肿胀方面,观察组治疗效果明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组临床总有效率比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:膝骨痹康熏洗剂联合电针、功法治疗对膝骨关节炎具有良好的疗效,值得临床推广应用。

痛风宁含药血清对尿酸盐诱导THP-1中NALP3炎性体相关蛋白及炎症因子表达的影响

目的通过检测痛风宁含药血清对尿酸盐(monosodium urate,MSU)诱导人单核细胞株THP-1(human monocytic cell line,THP-1)中NALP3炎性体相关蛋白与mRNA及上清液中IL-1β、PGE_2表达的影响,探讨痛风宁对痛风性关节炎的抗炎机制。方法制备低、中、高剂量痛风宁含药血清。将THP-1随机分为空白组和MSU干预组,MSU干预组予200 mg/L MSU混悬液诱导12 h建立炎症细胞模型,模型鉴定成功后采用随机数字表法分为模型组及低、中、高剂量痛风宁含药血清组(以下简称低、中、高剂量痛风宁组)、阳性对照组,分别予10%空白血清,10%低、中、高剂量痛风宁含药血清,10%空白血清+Caspase-1抑制剂干预,无MSU干预的空白组予10%空白血清干预。24 h后,离心收集各组THP-1及细胞上清液。采用ELISA检测各组细胞上清液中IL-1β、PGE_2含量,Western Blot、RT-qPCR分别检测各组THP-1中NALP3、Caspase-1、ASC蛋白及mRNA表达。结果与空白组比较,模型组NALP3、Caspase-1、ASC蛋白与mRNA表达及IL-1β、PGE_2含量均升高(P<0.01);各剂量痛风宁组所有指标均低于模型组及阳性对照组(P<0.01),同时低、高剂量痛风宁组所有指标水平均高于中剂量痛风宁组(P<0.05,P<0.01);阳性对照组Caspase-1蛋白表达及IL-1β、PGE_2含量低于模型组(P<0.01),Caspase-1 mRNA、NALP3、ASC蛋白及mRNA表达与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。结论痛风宁对AGA的抗炎机制可能与抑制NALP3炎性体相关蛋白及mRNA表达,减少炎症因子IL-1β、PGE_2的产生有关。

六味地黄丸对肾阴虚证大鼠股骨髁松质骨差异蛋白质表达的影响

目的:从差异蛋白质角度探讨肾阴虚证的实质及六味地黄丸治疗肾阴虚证的机制。方法:建立肾阴虚证模型,设立空白对照组、肾阴虚组和中药组。中药组及其余两组分别予六味地黄丸、0.9%氯化钠溶液灌胃3周后进行大鼠股骨髁松质骨总蛋白提取、双向电泳(2-DE)蛋白质分离、凝胶图谱的获取、质谱分析及生物信息学检索。结果:与空白对照组比较,肾阴虚组有β微管蛋白2C等22个差异表达的蛋白质;六味地黄丸治疗后,肾阴虚模型原表达上调的热休克蛋白70等5个蛋白质及表达下调的GDP解离抑制因子β等5个蛋白质出现表达趋势的反向调整。结论:β微管蛋白2C等22个差异表达的蛋白质可能与肾阴虚状态密切相关;热休克蛋白70等10个与骨结构、凋亡、能量代谢等相关的差异蛋白质表达的回调可能与六味地黄丸的干预效应有关。

肾阳虚股骨颈骨折患者松质骨组织差异蛋白质的表达分析

目的:比较并分析肾阳虚与非肾虚患者股骨颈松质骨差异表达的蛋白质,从骨组织功能蛋白质角度初步探讨"肾主骨"理论科学内涵。方法:收集肾阳虚患者及非肾虚患者的股骨颈松质骨标本各13例,进行骨总蛋白提取、双向电泳(2-DE)蛋白质分离、凝胶图谱的获取、质谱分析及生物信息学检索。结果:2-DE获得的肾阳虚及非肾虚患者股骨颈松质骨可辨识总蛋白点数目为582个,与非肾虚组比较,肾阳虚证组有16个蛋白出现差异表达。其中线粒体热休克蛋白90(Hsp90s)等5个蛋白表达上调;骨形态发生蛋白4(BMP-4)等11个蛋白表达下调。结论:股骨颈松质骨16个蛋白表达改变可能与肾阳虚证的发生有关,"肾"可能通过调节这些与骨组织关系密切的蛋白表达而发挥"主骨"作用。

甲状腺激素对适应性免疫细胞的作用

甲状腺激素(Thyroid hormones,THs)参与免疫功能的调节,在固有免疫和适应性免疫中发挥着重要作用。THs异常分泌所致的免疫功能失调被认为参与了格雷夫斯病和桥本甲状腺炎等自身免疫性疾病的发生发展。目前,THs在固有免疫细胞(中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、肥大细胞)中的作用已得到了较好的阐明,但THs对适应性免疫细胞(T淋巴细胞与B淋巴细胞)的影响等方面的研究仍未引起足够的重视。因此,本研究从适应性免疫细胞的角度出发,重点讨论了THs对这些细胞的发育、分化及功能等方面的影响,为进一步理解THs调节免疫功能的作用提供新视角。

痛风宁对高尿酸血症模型大鼠肾脏尿酸盐转运体表达的影响

目的:通过观察痛风宁对高尿酸血症(HUA)模型大鼠肾脏尿酸盐转运体蛋白及mRNA表达的影响,探讨该方促进尿酸排泄的机制。方法:将80只SD大鼠随机分为空白组20只和造模组60只。造模组行腹腔注射氧嗪酸钾(OAPS)联合盐酸乙胺丁醇(EMB)灌胃造模,于第21天时鉴定模型,确定造模成功后将60只造模大鼠随机分为模型组、痛风宁组和苯溴马隆组,每组20只。痛风宁组和苯溴马隆组分别予15. 3 g·kg^-1·d^-1痛风宁药液及5. 2 mg·kg^-1·d^-1苯溴马隆混悬液灌胃,空白组和模型组予等量生理盐水灌胃,于干预第14,21天分批采集大鼠尿液、血液、肾脏组织。采用酶比色法检测血尿酸(SUA),尿尿酸(UUA)含量,脲酶法检测血尿素氮(BUN)含量,肌氨酸氧化酶法检测血肌酐(CRE)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肾脏尿酸盐转运体蛋白和mRNA表达。结果:药物干预第14,21天,与空白组比较,模型组SUA,CRE,BUN升高,UUA显著降低(P<0. 01),尿酸盐转运体1(URAT1),葡萄糖转运体9(GLUT9)蛋白与mRNA表达明显升高(P<0. 05),三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2),有机阴离子1(OAT1),有机阴离子3(OAT3)蛋白与mRNA表达明显下降(P<0. 05);与模型组比较,痛风宁组及苯溴马隆组SUA,CRE,BUN明显降低,UUA明显升高(P<0. 05),URAT1,GLUT9蛋白与mRNA表达明显下降(P<0. 05),ABCG2,OAT1,OAT3蛋白与mRNA表达明显升高(P<0. 05),痛风宁组CRE,BUN明显降低(P<0. 05,P<0. 01),且明显优于苯溴马隆组(P<0. 05);干预第21天痛风宁组,除BUN外,其余指标改善趋势均更明显。结论:腹腔注射OAPS联合EMB灌胃可致HUA,并伴有肾功能异常;痛风宁可促进尿酸排泄,降低血尿酸,并下调肾脏URAT1,GLUT9表达,上调ABCG2,OAT1,OAT3表达,这可能是其促进尿酸排泄而降尿酸的作用机制之一;痛风宁对肾功能具有一定的保护作用。

壮骨健膝方含药血清对人退变关节软骨细胞caveolin-p38MAPK信号通路的影响

目的:观察壮骨健膝方含药血清对人退变关节软骨细胞caveolin-p38MAPK信号通路关键信号分子及下游效应产物的影响,阐明该方含药血清保护人退变关节软骨细胞的机制。方法:取正常人及膝骨关节炎(KOA)患者软骨标本体外分离软骨细胞并培养至第3代。将正常人软骨细胞设为正常组,KOA患者软骨细胞随机分为KOA组、阻滞剂组、含药血清组及含药血清+阻滞剂组。分别用20%空白血清、20%空白血清、20%空白血清+20μmol/L SB203580、20%含药血清、20%含药血清+20μmol/L SB203580进行干预;48h后,收集细胞;采用Western Blot检测细胞中caveolin-1、p-p38蛋白表达,RT-PCR检测细胞中TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达。结果:与正常组比较,KOA组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与KOA组比较,阻滞剂组、含药血清组、含药血清+阻滞剂组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01);与阻滞剂组比较,含药血清组软骨细胞中caveolin-1蛋白及MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),p-p38蛋白及TNF-α、MMP-3 mRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05);含药血清+阻滞剂组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05);与含药血清组比较,含药血清+阻滞剂组软骨细胞中caveolin-1、p-p38蛋白及TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01)。结论:壮骨健膝方含药血清保护人退变关节软骨细胞的机制可能与其抑制caveolin-p38MAPK信号通路中关键信号分子caveolin-1、p-p38蛋白表达,降低下游效应产物TNF-α、IL-1β、MMP-3、MMP-13 mRNA表达有关。

基于网络药理学探讨补肾益气方治疗支气管哮喘的作用机制

目的采用网络药理学方法探讨补肾益气方治疗支气管哮喘的物质基础和作用机制。方法采用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)结合文献检索获取补肾益气方的有效成分,并结合UniProt知识库得到对应的靶点信息。利用OMIM、DrugBank、TTD和Genecards数据库挖掘哮喘相关靶点。通过Cytoscape3.7.1软件构建补肾益气方有效成分-靶点及哮喘-靶点网络,绘制维恩图以获得重叠靶点。利用String平台构建重叠靶点的蛋白相互作用网络,通过Cytoscape的Cytohubba模块依据度值获得核心靶点。使用Metascape数据库,对所获靶点进行富集分析。结果筛选到黄芪17种有效成分及209个潜在靶点,淫羊藿23种有效成分及222个潜在靶点,生地黄2种有效成分及31个潜在靶点,综合分析得到237个补肾益气方有效成分的相关靶点,并同时筛选到930个哮喘相关靶点,匹配到103个重叠靶点。通过生物信息学分析,定位到20个核心靶点,进一步富集分析发现其发挥作用可能涉及白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF)、Toll样受体、NF-κB、NOD样受体、MAPK、PI3K-Akt等信号通路。结论补肾益气方中槲皮素、山柰酚、刺芒柄花素、淫羊藿苷、淫羊藿素、谷甾醇、豆甾醇等成分可能是治疗哮喘的物质基础,与调节炎症反应、T细胞分化、氧化应激、平滑肌细胞增殖等机制有关。

金匮肾气丸对肾阳虚证模型大鼠股骨髁松质骨差异蛋白质表达的影响

目的探讨金匮肾气丸治疗肾阳虚证的可能作用机制。方法 60只Wistar大鼠随机分为正常组20只和造模组40只,将造模成功的38只大鼠再随机分为中药组和模型组各19只,中药组大鼠给予金匮肾气丸8. 44 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组大鼠给予生理盐水3 ml灌胃,每日1次,连续3周。分别取正常组、模型组和中药组大鼠的股骨髁松质骨,进行总蛋白的提取与制备;采用蛋白质双向凝胶电泳技术展示各组大鼠股骨踝松质骨蛋白质组图谱,应用PDQuest 8. 0软件分析各组间差异表达蛋白点,采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)初步鉴定差异表达蛋白点。结果各组大鼠股骨髁松质骨双向凝胶电泳图谱的蛋白点数目均为552个;与正常组比较,模型组有23个差异表达的蛋白质;与模型组比较,中药组有16个差异表达的蛋白质。给予金匮肾气丸溶液后,肾阳虚模型大鼠股骨髁松质骨中原来表达上调的磷酸甘油酸激酶1及表达下调的14-3-3ζ蛋白、网钙蛋白3、原肌球蛋白异构体2α-3链、原肌球蛋白α-4链、原肌球蛋白异构体α-1链、40s核糖体蛋白sa、半乳糖凝集素1、线粒体ATP合成酶亚基α、膜联蛋白A1、GDP解离抑制因子1、Ⅰ型胶原α-1链、LOC683667蛋白、膜联蛋白A5、过氧化氧化还原蛋白2和蛋白质二硫键异构酶A3均出现表达趋势的反向调整。结论金匮肾气丸对肾阳虚证的调节可能涉及股骨髁松质骨结构构成、物质转运、能量代谢和细胞增殖与凋亡等方面。