一种新的人胚胎干细胞自身来源的滋养层支持其体外培养

通过人胚胎干细胞(Human embryonic stemcells,hESCs)经体内分化获取间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)为人胚胎干细胞提供一种新的滋养层。将约5×106个hESCs注射入重症免疫联合缺陷小鼠形成畸胎瘤,8周后再从畸胎瘤中分离MSCs并鉴定,将MSCs作为hESCs的滋养层细胞,并检测和观察hESCs的生长情况、细胞特性和分化能力。从畸胎瘤中获得了纯度较高的具有类似骨髓来源的MSC特性的细胞群,其形态相似、表面抗原标志相似(CD34和CD45阴性,CD29、CD49b、CD105、CD73和CD90阳性),经诱导可以向成骨细胞和成脂细胞分化。将hESCs在MSCs滋养层细胞上传代培养10代以上,hESCs依然具有正常的细胞形态,反转录PCR证实其特异转录因子Oct4、Nanog的表达,干细胞表面标记SSEA-1显示为阴性,SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81显示为阳性,碱性磷酸酶染色显示为阳性,并且核型正常。体外EB形成和体内畸胎瘤形成证明了其全能性。因此来源于hESCs本身的MSCs可以被用来作为支持胚胎干细胞生长并维持其未分化状态的滋养层细胞。

绿色荧光蛋白兔多克隆抗体的制备

目的制备绿色荧光蛋白(GFP)兔多克隆抗体。方法选取GFP免疫原性较强、保守性低的98～117位氨基酸序列,利用F-moc法固相合成该段序列,经高效液相色谱纯化,MALDI-TOF-MS鉴定合成多肽的分子量后,与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联,免疫新西兰雄兔,制备抗血清,并进行Western blot鉴定。结果合成的GFP多肽经MALDI-TOF-MS分析,分子量为2497.9,与理论值相符。1∶200稀释的抗血清与转染pEGFP-N1质粒的HeLa细胞表达的增强型GFP在相对分子质量27000处有清晰的杂交信号出现。结论已成功制备了特异性较好的GFP兔多克隆抗体。

中国汉族结直肠癌患者UGT1A1*28基因多态性分析

目的研究汉族人群中结直肠癌(colorectal cancer)患者尿苷二磷酸葡醛酸转移酶1A1(UGT1A1)*28基因多态性的分布情况。方法收集2016~2017年合作医疗机构505例汉族结直肠癌患者血液标本,通过焦磷酸测序技术检测UGT1A1*28基因型。根据性别、年龄和地区因素对患者进行分组,统计分析各组间结直肠癌患者UGT1A1*28基因型及等位基因分布情况。结果在505例结直肠癌患者中,UGT1A1*28三种基因型TA6/TA6,TA6/TA7和TA7/TA7频率分别为74.26%,22.97%和2.77%。根据性别分组,患者UGT1A1*28的3种基因型在不同性别结直肠癌患者中的分布差异无统计学意义(χ^2=3.276,P>0.05)。根据年龄分为≤44岁,45~59岁,60~74岁和75~89岁四组,患者UGT1A1*28的3种基因型在不同年龄结直肠癌患者中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。根据地区分为山东、辽宁、江苏、上海和甘肃五组,患者UGT1A1*28的3种基因型在不同地区结直肠癌患者中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论中国汉族结直肠癌患者UGT1A1*28基因多态性主要为TA6/TA6和UGT1A1*28的3种基因型分布与中国汉族结直肠癌患者性别、年龄分层和地区差异无关。

现阶段高中生物教学的思考

1钻研教材,理解新教材的编写思想新教材改变原教材过于注重书本知识和知识“陈、旧”的现状,加强课程内容与现实生活以及现代社会和科技发展的联系,关注学生的学习兴趣和经验,精选必备的基础知识与技能。1.1教材特别注重知识的发生和发展过程的展示:新教材所表现的是经过逻辑加工的归纳体系,以资料、问题、现象。