一株鸡源嗜铅乳酸菌的筛选鉴定

试验目的是从肉鸡的肠道内容物及排泄物中筛选出具有铅抗性的细菌，用于重金属铅的去除。采用涂布平板技术从采集的样品中共分离筛选到8株具有较好铅抗性和吸附性的菌株，其中JT1菌株对铅的抗性（800 mg/L）和去除能力（66．95％）最高。通过培养特征、形态观察、生理生化鉴定、16S rDNA序列分析等方法证明，所得JT1菌株为屎肠球菌（Enterococcus faecium）。该菌株可以在10～45℃、pH 4．5～9．6、6．5％NaCl溶液、0．8％胆盐、0．1％胰蛋白酶浓度条件下生长良好。

嗜铅乳酸菌JT_1传代培养稳定性研究

从表型特征和益生特性两方面研究嗜铅乳酸菌JT_1在优化后的M1培养基和加入魔芋粉的M2培养基中连续传代的稳定性。结果表明,嗜铅乳酸菌JT_1在两种培养基中,连续传至1 000代时,形态并没有发生改变,菌落呈不透明白色突起,表面光滑,与原始菌株的菌落形态一致;连续传代并没有改变培养周期内总生物量和周期末活菌数的变化;菌株JT_1对p H为2.5的人工胃液、p H为8.0的人工肠液以及0.3%的胆盐的耐受能力基本保持稳定;菌株所特有的吸附Pb2+功能在传代过程中没有受到很大的影响,吸附率基本稳定在60%左右。为嗜铅乳酸菌JT_1的可持续性生产提供了可靠依据。

鸡肉保鲜抑菌中草药的筛选及稳定性研究

本试验通过分析18种中草药提取液对假单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌和沙门氏菌等5种菌的抗菌活性筛选出对鸡肉起到保鲜抑菌作用的中草药。结果表明:黄连、肉桂、丁香、苦参和苦丁5种提取液对鸡肉主要腐败菌均表现抑制作用,抑菌效果较好,本试验还测定了其最低抑菌浓度。用5种提取液进行1∶1∶1配伍的10种复配液对供试菌的抑菌试验,表明复配液FP7、FP8和FP10是其中效果较好的配伍。

ICP-OES法对水产品中重金属污染状况监测分析

为研究水产品中重金属的污染现状,建立了一种用ICP-OES方法同时测定Cd、Cr、Cu、Pb 4种重金属元素含量的方法,相关系数均大于0.9990,相对标准偏差在0.1%~0.77%之间,加标回收率在96.5%~104.0%之间,说明该方法可快速、准确、简便地测定水产品中重金属元素的含量。并根据食品中重金属限量标准对食用安全进行评估。调查结果显示,重金属在不同种类海产品中的分布差异显著,Cd、Cr、Cu、Pb 4种重金属中,Cr含量严重超标,超标率达100%,其次则为Cd,Cu的超标现象最低,为2.38%;对于海水鱼类、淡水鱼类、软体动物类、甲壳类等水产品,以软体动物类及甲壳类中重金属含量超标现象比较严重,应该引起重视。

食源性致病菌快速检测试剂盒的研制与应用

目的:研制1种快速检测沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7和金黄色葡萄球菌的三重PCR检测试剂盒,并加以应用。方法:设计3种待检目的菌特异性引物,优化PCR反应条件,建立多重PCR检测试剂盒,并对其特异性、灵敏度、抗干扰性、准确性等方面进行评估。结果:该试剂盒特异性好,灵敏度高,3种待检目的菌在不同食品介质中的检出限均达到101CFU/mL,抗干扰性强。在6个月保存期内,其稳定性和准确性均未发生改变。结论:本研究建立的试剂盒可同时检测上述3种病原菌,且具有稳定性好、准确性高等特点,可用于禽肉及其制品的日常微生物安全监测。

鸡源肠球菌体内外铅吸附作用研究

利用已分离鉴定的鸡源肠球菌进行体内外除铅作用试验。体外试验结果显示,菌株JT1清除率最高,为66.95%,可耐受Pb^(2+)质量浓度400 mg/L以上。选用小鼠为实验动物模型,研究该菌株的体内除铅作用。通过自由饮水建立铅中毒模型,在造模过程中测定全血铅的含量;造模成功后通过投给JT1菌液进行除铅试验。结果显示,该菌株对亚慢性铅中毒小鼠具有明显的除铅作用,血液中铅清除率高达79.4%,为利用该菌进一步开发研究,预防和缓解人体铅中毒提供科学依据。

益生菌混合发酵高产工艺优化的研究

对3株乳酸菌株进行混合发酵,采用单因素与正交试验相结合优化发酵的培养基及培养条件以得到高活菌数的发酵液。研究表明,最佳发酵培养基配方为:蔗糖10 g/L,胰蛋白胨10g/L,酵母膏10 g/L,Na_2HPO_4 7 g/L;最佳培养条件为发酵温度37℃,接种量(v/v)0.5%,初始p H8.5,摇床转速200 r/min,发酵周期16 h。此时发酵液中菌体量可比优化前增加42%,活菌数达到1.8×10^(13) cfu/m L,研究结果为工业化生产高活菌数的乳酸菌制剂提供参考。

乳糖化壳聚糖对重金属的吸附能力及其机制研究

以甲壳素为原料制备乳糖化壳聚糖,研究不同脱乙酰度的乳糖化壳聚糖对重金属离子Cr6+、Pb2+吸附能力及其机制。研究表明,乳糖化壳聚糖脱乙酰度随Na OH浓度的增加而增加,在Na OH饱和溶液中达到最大;不同脱乙酰度的乳糖化壳聚糖对Cr6+的清除率随乳糖化壳聚糖脱乙酰度的增加呈先不变后降低的趋势,最大清除率为47.26%;而对Pb2+的清除率随乳糖化壳聚糖脱乙酰度的增加先升高后降低,在乳糖化壳聚糖脱乙酰度为56.4时达到最大,最大清除率可达62.09%。红外扫描显示,乳糖壳聚糖主要是-OH和-NH参与重金属吸附反应,吸附Cr6+时O=C=O参与配位,吸附Pb2+时-NO3参与配位;电镜扫描结果显示,乳糖化壳聚糖具有较好的三维结构,对Cr6+、Pb2+的吸附除配位结合外,也有部分附着在其三维结构中。因此,乳糖化壳聚糖对重金属离子具有一定的清除能力,其吸附形式主要为配位键吸附和结构吸附2种形式。

嗜铅肠球菌JT_1对大鼠体内的排铅机理

研究了对铅离子有吸附能力的嗜铅肠球菌JT_1作为体内排铅试剂的排铅机理。建立大鼠铅中毒模型,模型组血铅水平达到600μg/L即造模成功。通过灌胃的方式给予大鼠嗜铅肠球菌JT_1的发酵液,4周后处死,无菌采集结肠进行菌落计数,并进行扫描电子显微镜观察及能谱分析。同时,采集大鼠血液、尿液及粪便测定其铅含量的变化。结肠菌落计数结果显示:铅中毒模型组大鼠结肠乳酸菌总数较其它组少,差异显著(P<0.05);灌喂嗜铅肠球菌JT_1的模型组和对照组菌落总数高于未灌胃空白组和染铅组,差异显著(P<0.05)。结肠扫描电镜研究结果表明:仅能在灌喂嗜铅肠球菌JT_1的模型组和对照组大鼠结肠内发现类似嗜铅肠球菌JT_1的菌体,能谱分析显示模型组大鼠结肠内菌体表面铅含量明显增多,说明铅离子在菌体表面形成金属沉积物。灌胃嗜铅肠球菌JT_1的模型组大鼠的血铅水平均低于灌胃前,差异显著(P<0.05),且该组的粪铅水平显著上升,差异显著(P<0.05)。上述结果表明,嗜铅肠球菌可在大鼠结肠存活,嗜铅肠球菌JT_1与铅离子主要以表面吸附的形式排铅,在灌胃嗜铅肠球菌JT_14周后能有效降低大鼠血铅水平,其排铅的主要途径是随粪便排出。

嗜铅益生菌JT_1菌株可逆性表面吸附铅的研究

以嗜铅益生菌JT_1为生物吸附剂,研究pH对该菌吸附铅及其可逆性,其它金属阳离子对吸附过程的影响。应用透射电子显微镜对该菌吸附铅前、后的形态进行分析,揭示该菌体外吸附铅的作用过程。结果表明:溶液pH对该菌吸附铅的影响较大,当pH较低时,JT_1对Pb2+的吸附能力较弱。随着试验溶液pH的升高,JT_1对Pb2+吸附能力显著增加,当pH为6.0时,吸附率最高,达71.72 mg/g;该菌对铅离子的选择性吸附作用非常强,基本不受其它金属阳离子的干扰;菌体吸附铅具有可逆性,可被解离剂解离。透射电子显微镜照片显示:吸附铅离子后的菌体表面有大量金属沉积物。JT_1对铅离子的吸附主要发生在菌体表面,吸附率与pH值具有相关性。推测静电作用、离子交换和络合作用可能在吸附过程中起重要作用。

鸡源嗜铅菌JT_1菌株体外吸附铅的机理

以嗜铅鸡源肠球菌JT_1为生物吸附剂,研究该菌株在体外对铅的吸附机理。首先研究该菌的吸附等温模型和吸附动力学特征;再应用扫描电子显微镜和EDS能谱进行观察,分析JT_1吸附反应发生部位;最后,应用傅里叶变换红外光谱仪对其吸附铅有关的功能基团的特征进行验证。结果表明,JT_1吸附过程符合Langmuir吸附等温模型;整个吸附过程遵循伪二级吸附动力学模型;扫描电子显微镜照片显示,菌体表面有沉积物堆积;EDS能谱分析表菌体表面吸附的是铅沉积物;傅里叶红外变换光谱研究显示,菌体表面的氨基、羧基、羟基和磷酸基等官能团参与对铅的吸附。由此,JT_1对铅的吸附主要是表面吸附,菌体表面的一些官能团参与了吸附过程。