小黄鱼免疫肽制备条件的响应面优化

优化胰蛋白酶(PTN 6.0S)酶解小黄鱼制备免疫肽的制备条件。MTT法检测酶解产物对小鼠脾细胞的增殖程度,并以脾细胞增殖指数(SI)为指标,通过单因素试验及响应曲面法优化酶解条件。结果显示:在温度41.66℃、时间18.24h、底物质量浓度6g/100mL、酶与底物的质量比(酶底比)3.13‰条件下,模拟得出多肽产物的SI值为0.387。验证实验发现,在温度42℃、时间18.2h、底物质量浓度6g/100mL、酶底比3‰条件下,SI值为0.369±0.0 0 3,略低于模拟值,所得条件较为理想。

响应曲面法优化胰蛋白酶酶解条件制备乳源免疫活性肽

目的:优化胰蛋白酶(PTN 6.0S)酶解酪蛋白酸钠制备高免疫活性肽的酶解条件。方法:以四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)测得的酶解产物对小鼠脾细胞增殖程度(刺激指数SI)及氨基氮(AN)含量为指标,通过单因素试验及响应曲面法优化酶解条件。结果:在pH7.0、温度55.0℃、时间15h、底物质量浓度3.5g/100mL、酶与底物比3.8:1000的酶解条件下,酶解产物的SI值达到0.184±0.002,AN含量为(0.795±0.012)g/L。结论:以酶解产物的活性为指标,可直接获得免疫活性最高的乳源多肽的酶法制备条件。