昆明部分地区女性HPV感染情况的调查研究

目的调查昆明市某三甲医院就诊女性人乳头瘤病毒(HPV)感染情况、不同年龄感染情况及多重HPV感染的情况,为宫颈癌的防治提供科学依据。方法采用基因扩增技术及导流杂交原理,对22485名女性进行21种HPV基因型筛查。对总体流行情况、HPV基因型感染情况和不同年龄感染情况、各年感染率进行分析。结果HPV整体感染率为15.79%。高危型人乳头瘤病毒(HR⁃HPV)感染率为14.24%,占阳性例数的90.03%;低危型人乳头瘤病毒(LR⁃HPV)感染率为2.81%,占阳性例数的17.80%。在这些阳性病例中,75.98%为单一感染,24.02%为多重感染。最常见的高危型HPV基因型为HPV⁃52(22.52%),其次是HPV⁃16(15.91%)、HPV⁃58(13.89%)、HPV⁃39(11.05%)和HPV⁃53(10.18%);最常见低危型为HPV⁃CP8304(9.19%)。在不同年龄组,感染率最高的为≤20岁年龄组。2015—2020年感染率分别为20.09%、21.01%、17.42%、17.22%、14.91%和15.02%。结论昆明部分地区女性HPV感染率在逐渐下降,但感染率仍较高,且主要流行的亚型与其他地区存在一定差异性。针对不同地区需研发适用的HPV疫苗,以进一步降低宫颈癌发病率和死亡率。

昆明地区青少年非综合征遗传性耳聋患者耳聋基因热点突变的筛查

目的探讨昆明地区青少年非综合征遗传性耳聋(NHI)患者病因学特点,揭示该地区NHI人群的常见致病基因,分析遗传因素在耳聋致病因素中的作用。方法采用基因芯片技术检测昆明地区某聋哑学校110例NHI患者4个耳聋基因中常见的13个位点:包括GJB2基因35del G、155del TCTG、176del16、235del C和299del AT,SLC26A4基因1229C>T、2168A>G和IVS7-2A>G,线粒体DNA基因1555A>G、1494C>T、7445A>G和12201T>C,GJB3基因538C>T位点。结果携带遗传性耳聋相关突变基因的患者有21例(19.1%,21/110)。其中GJB2突变者14例,包括235del C纯合突变6例,235del C单杂合突变2例,235del C复合299del AT突变4例,235del C复合176del16突变2例;SLC26A4突变5例,包括IVS7-2A>G纯合突变3例,IVS7-2A>G杂合突变2例;线粒体基因突变(mt DNA)2例,mt DNA1494C>T均质突变及mt DNA7445A>G均质突变各1例。结论昆明地区青少年NHI患者中耳聋易感基因检出率较高,GJB2基因突变比例最高。

1372例宫颈感染人乳头瘤病毒基因分型的探讨

目的探讨昆明地区女性宫颈感染人乳头瘤病毒的感染情况及其主要型别的分析。方法回顾分析2012--2013年在我院妇产科就诊的女性患者1372例，采用核酸扩增法对宫颈脱落细胞进行HPV-DNA扩增，用斑点杂交法进行21种亚型分型，并对结果进行分析。结果1372例中阳性460例、癌跺g}沩33．53％、HPV亚型以16亚型20．00％、52亚型18．47％、53亚型8．04％、cp83047．04％、18亚型5．22％为主，感染年龄主要分布在21～30岁、31--40岁、41～50岁年龄段。结论昆明地区人乳头瘤病毒亚型分布依次为16亚型、52亚型、53亚型、cp8304以及18亚型，感染年龄主要分布在21～50岁年龄段。

β-地中海贫血基因测序的实验研究

目的建立测序法对β-地中海贫血进行诊断。方法选用已知β-地贫突变标本,设计引物进行PCR扩增,扩增产物用AB3500测序。结果测序结果与已知突变一致。结论本研究建立的测序方法能用于临床实验室对β-地贫进行诊断。

云南省某大型综合医院临床病原菌的分布及耐药分析

目的了解医院临床分离病原菌的分布特点及耐药情况,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法回顾性分析2012年1月至2013年12月医院临床标本中分离的病原菌,采用VITEK2-compact全自动细菌分析仪进行鉴定和药敏试验。按美国临床和实验室标准协会（CLSI）2013标准判断结果,应用WHONET5.6软件进行统计和分析。结果 2012~2013年医院共分离病原菌2 744株,其中革兰阴性菌1 986株（占72.4%）,革兰阳性菌675株（占24.6%）,真菌83株（占3.0%）。排列前三位革兰阴性菌为大肠埃希菌694株（25.3%）、肺炎克雷伯菌303株（11.0%）和铜绿假单胞菌266株（9.7%）;排列前三位革兰阳性菌为金黄色葡萄球菌184株（6.7%）、凝固酶阴性葡萄球菌146株（5.3%）和屎肠球菌119株（4.3%）,以呼吸道、尿路、血液感染为主,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为45.7%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCN）检出率为（84.6%）,MRSA对氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物呈多重耐药,耐药率均大于90.0%,对大环内酯类抗菌药耐药率小于50.0%;未发现耐万古霉素和利奈唑胺的葡萄球菌;屎肠球菌对万古霉素的耐药率为1.7%,未发现对利奈唑胺耐药的屎肠球菌。产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的检出率分别为65.2%和39.9%,大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率分别为0.0%和6.3%,鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药率达50.0%以上,铜绿假单胞菌对常用的抗假单胞菌活性的药物的耐药率小于40.0%。结论 2012~2013年医院分离病原菌耐药现象较为普遍,特别是多重耐药的非发酵菌;产酶等机制导致多种抗菌药物耐药的肠杆菌科细菌、MRSA和MRSCN检出率上升,给临床抗感染治疗造成极大的困难。开展细菌耐药性监测,对指导临床合理使用抗菌药物,降低医院感染率和控制细菌耐药性有重要意义。

耐碳青霉烯类雷氏普罗威登斯菌耐药机制研究

目的分析1株分离自足部感染的产KPC-2酶雷氏普罗威登斯菌的耐药性及其产酶类型。方法常规方法分离培养、鉴定菌株;采用MIC及K-B法进行体外药物敏感试验;通过改良Hodge实验和EDTA协同实验进行碳青霉烯酶表型分析;应用PCR法进一步确定碳青霉烯酶的基因型。结果这株雷氏普罗威登斯菌对喹诺酮类、β-内酰胺类(包括碳青霉烯类)抗菌药物耐药,对阿米卡星敏感。改良Hodge实验阳性,EDTA协同实验阴性,仅检出KPC-2型基因,未检出IMP、VIM、NDM-1、OXA-48型碳青霉烯酶基因。结论临床分离出的这株产KPC-2型碳青霉烯酶的雷氏普罗威登斯菌,警示我国需对产碳青霉烯酶的少见细菌进行严密监测,并采取感染控制措施以阻断耐药基因在细菌之间传播。

β溶血表型摩根摩根菌的鉴定及系统发育树构建

目的对β溶血表型摩根摩根菌进行准确的鉴定和系统发育分析。方法常规方法分离培养菌株;先后采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定仪、机制辅助激光解析离子-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)、16S rDNA测序3种方法对菌株进行鉴定并验证其结果的正确性;基于16S rDNA的同源性分析和系统发育树构建;并对溶血基因的检测。结果采用16S rDNA序列同源性分析结合构建系统发育树分析,鉴定菌株(标本编号:U1901)与摩根摩根菌摩根亚种NBRC 3848形成一个分支,同源性和可信度均达99.99%,同时验证了MALDI-TOF-MS的鉴定结果比VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定仪准确及时。检测出新表型摩根摩根菌(β溶血表型)。结论16S rDNA序列同源性分析与系统发育树构建相结合,准确鉴定出新型表型的摩根摩根菌(β溶血表型)。MALDI-TOF-MS在病原微生物检测和鉴定中具有快速、准确等优点,可为临床治疗提供快速的诊断依据。

感染性疾病联合检测降钙素原和Hs-C反应蛋白的临床意义

目的探讨感染性疾病中血清降钙素原(PCT)和Hs-C反应蛋白(CRP)的变化及其临床意义。方法选取2011年1月至2011年12月在我院住院的96例患者,空腹抽取所有患者静脉血3ml,3000r/min离心分离血清备用,检测所有标本的血清PCT和CRP的浓度水平,结合细菌培养结果和临床诊断,分析血清降钙素原(PCT)和c反应蛋白(CRP)的浓度水平,在细菌感染组与病毒感染组进行分析比较。结果感染组与病毒组血清PCT和CRP浓度比较差异均具有统计学意义(P【0.001)。但PCT的差异性高于CRP。结论当患者细菌感染时,PCT和CRP均具有诊断意义,PCT比CRP具有更高的特异性,所以在感染性疾病PCT和CRP联合检测有更高的临床意义。

2013-2016年抗菌药物使用频度对肺炎克雷伯菌耐药率影响分析

目的了解医院近几年抗菌药物使用情况及对超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)阴性肺炎克雷伯菌和阳性肺炎克雷伯菌耐药的影响,为临床合理使用抗菌药物,降低细菌耐药率提供指导依据。方法统计该院2013-2016年常用抗菌药物使用频度和强度及同期分离的肺炎克雷伯菌耐药情况进行回顾性调查分析。结果医院抗菌素使用强度(AUD)从2013-2015年逐年上升,从23.16至44.44,上升了47.88%。2016年有所下降为42.76,下降3.78%。肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药率不断上升,特别是对碳青霉烯类抗菌素耐药率呈上升趋势。抗菌药物使用频度(DDDS)分析,ESBLS阴性肺炎克雷伯菌耐药率与美洛培南使用频度呈高度相关性,有显著统计学意义(r=0.992,P=0.008),与左氧氟沙星高度相关(r=0.899),与庆大霉素、头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南和头孢哌酮/舒巴坦有一定相关性。ESBLS阳性克雷伯菌耐药率与头孢他啶和亚胺培南使用频度呈高度的相关性(r=0.965,P=0.035)和(r=0.907,P=0.048),与左氧氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦和氨曲南有一定相关性。结论抗菌药物使用强度和频度与细菌耐药率有一定的相关性,必须加强抗菌药物管理,合理使用抗菌药物,才能更好地降低细菌耐药率和耐药细菌的产生。

耐亚胺培南多重耐药鲍曼不动杆菌中β-内酰胺酶基因的研究探讨

目的探讨多重耐药鲍曼不动杆菌中的β-内酰胺酶基因。方法收集该院住院患者中分离出的鲍曼不动杆菌72株,其中观察组为36株多重耐药鲍曼不动杆菌,对照组为非多重耐药鲍曼不动杆菌36株。对所有菌种进行鉴定及确认后采用纸片扩散法对菌株进行药敏试验。采用聚合酶链反应(PCR)法对β-内酰胺酶进行相关耐药基因检测。计算其药敏率及β-内酰胺酶阳性基因测序。结果通过对两组菌株的耐药谱进行比较,在对所有药物的观察中,观察组耐药率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);通过两组菌株阳性基因比较,观察组各项基因阳性率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论鲍曼不动杆菌产β-内酰胺酶是其产生耐药的主要机制,对其基因的调控是改善鲍曼不动杆菌耐药的根本方法,可有效提高其治愈率,改善患者预后。

DC细胞功能对乙肝疫苗免疫效果的影响

[目的]探讨DC细胞功能对乙肝疫苗免疫效果的影响。[方法]选取医院接收的实施常规乙肝疫苗接种方案后免疫无/弱应答者50例,其中将抗-HBs S/C值<10 mIU/mL者按照20μg重组乙肝疫苗接种,抗-HBs仍为无/弱免疫应答标准者共有30例,记为实验组;另选取实施常规乙肝疫苗接种方案的50例免疫中/强应答者记为对照组。以流式细胞仪测定2组DC细胞表面标志及吞噬功能;以酶联免疫吸附试验(ELISA)测定2组血清IL-12、TNF-α水平。[结果]实验组DC细胞表面标志物及吞噬功能检测结果中,CD1a、HLA-DR、CD80、CD83、CD86均明显低于对照组(P<0.05);实验组血清IL-12、TNF-α水平均低于对照组(P<0.05)。[结论]乙肝疫苗接种后无/弱应答再次接种仍无/弱应答者DC细胞表面标志物水平表达偏低,吞噬功能较弱,接种后血清IL-12、TNF-α水平也较低。