HLA-B*5101与白塞病的相关性研究

目的 : 探讨HLA -B 5 10 1等位基因与白塞病之间的相关性。方法 : 应用微量淋巴细胞毒试验检测HLA -A和HLA -B抗原。应用PCR -SSP技术对HLA -B5 1等位基因 (HLA -B 5 10 1～HLA -B 5 10 7)进行分析。 2 0名白塞病患者符合国际白塞病委员会分类诊断标准 ,同时以 30例正常人作对照组。结果 : 在白塞病患者中 ,HLA -B5 1表型频率明显高于对照组 [患者为 6 0 % (12 2 0 ) ,对照组为 16 .7%(5 30 ) ],χ2 =10 .0 4 ,P <0 .0 0 1,校正P值 <0 .0 5 ,相对危险度为 8.98。没有发现其它HLA -A和HLA -B抗原与白塞病相关。在 12例HLA -B5 1阳性的患者中 ,均为等位基因HLA -B 5 10 1,5个HLA -B5 1阳性的对照亦均为等位基因HLA -B 5 10 1。结论 : 等位基因HLA -B 5 10

维持胚胎干细胞多能性的分子机制

胚胎干细胞(ES细胞)来源于早期发育的胚胎,具有分化为任何细胞类型的多能性,因此具有巨大的基础研究及潜在的应用前景。目前认为ES细胞主要通过一些外源性信号分子的作用及某些重要的内源性转录因子的表达共同起作用来达到其维持多能性的目的。外源性信号分子LIF、BMP4以及Wnt等介导的信号传导通路与内源性转录因子Oct4、Nanog、Sox2、FoxD3等共同起作用来抑制那些促进ES细胞分化的基因表达和激活那些有助于维持ES细胞多能性维持的基因表达,进而形成一个相互调控和依存的基因调控网络共同维持ES细胞的多能性。

类风湿关节炎患者血浆置换治疗前后微量元素铜的变化

应用原子吸收分光光度法，对15例类风湿关节炎（RA）患者血浆置换前后微量元素铜的变化进行了测定。结果表明，血浆置换后患者的血铜水平显著下降，提示血浆置换治疗RA存在铜元素的机制。

核酶在肿瘤基因治疗中应用的研究进展

核酶是一类具有催化活性的小分子RNA ,它能够特异性的与靶RNA分子结合后进行切割 ,从而能抑制目的基因的表达。设计合适的核酶分子能够阻断癌基因的异常表达 ,逆转肿瘤细胞MDR ,促进肿瘤细胞凋亡 ,有望成为肿瘤基因治疗的有效手段之一。

HDV核酶对乙型肝炎病毒抑制作用的研究

目的研究HDV核酶在细胞内对乙型肝炎病毒(HBV)复制及其抗原表达的抑制作用。方法1)以HBV前基因组mRNA为靶基因,体外筛选出HDV核酶有效作用位点,构建HDV核酶并进行体外测活;2)分别选用tRNA-Val、U6和hCMV 3种真核启动子,重组构建HDV核酶真核表达载体ptVHRz、pSURz和pcDHRz,分别用3种载体转染HepG2.2.15细胞;3)用点杂交、ELISA和实时荧光定量PCR方法分别检测核酶在细胞内的表达及对HBV的抑制作用。结果在HBV C基因区筛选到一位点,所构建的HDV核酶在体外条件下对该位点能产生有效切割。3种核酶表达载体在细胞内均能高效表达,在转染48 h后,ptVHRz和pcDHRz对HBeAg的表达产生了明显的抑制作用,而对HBsAg没有抑制作用。三者对HBV的复制均未产生明显影响。结论HDV核酶在细胞内对HBV抗原的表达能产生特异性抑制作用,但未能有效抑制HBV的复制,对其原因需进一步深入研究。

脱氧核酶的研究进展

具有RNA裂解活性的DNA分子称为脱氧核酶。它是经过体外选择技术经多次筛选获得的。脱氧核酶在切割与其互补的RNA底物分子时具有极高的特异性和切割效率 ,有望成为新的RNA灭活工具。

两种人胚胎干细胞体外诱导CD34^+造血前体细胞方法的比较

目的对比小鼠骨髓基质细胞系OP9共培养和二维单层诱导方法体外诱导人胚胎干细胞(hESCs)产生CD34+造血前体细胞的效率,为后续研究提供参考。方法采用hESCs与OP9共培养方法或用二维单层诱导方法诱导hESCs产生CD34+造血前体细胞,通过流式细胞仪检测分化效率,比较两种方法的效果。结果通过hESCs/OP9共培养方法,hESCs在分化第9日出现CD34+细胞,比例达(19.7±7.9)%;通过二维单层诱导方法,hESCs在分化第6日即出现CD34+细胞,比例仅为(5.8±1.8)%,两种方法分化效率比较差异具统计学意义(P<0.05)。结论 hESCs/OP9共培养方法和二维单层诱导方法均可将hESCs诱导为造血前体细胞,相对于二维单层诱导方法,hESCs/OP9共培养方法尽管需要更长的时间,但其分化效率更高,更有利于后续研究。

食管癌患者肿瘤组织中硒含量的调查测定

应用2，3-二氨基萘荧光测定法对36例食管癌患者癌组织与癌旁组织及血清中硒的含量进行了测定。结果表明，癌组织中硒含量平均为1．325±0．81μg／g干重，癌旁组织为0．893±0．68μg／g干重，两者差异显著（P＜0．05）；血清中硒含量为0.6033±0．0520μmol／L，对照组20例献血员血清为0．8034±0．0650μmol／L，亦有显著性差异（P＜0．05）。提示硒在抗肿瘤的过程中有一定作用。

体外诱导人类诱导性多能干细胞分化为造血干/祖细胞的研究

本研究探讨体外诱导人诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)分化为造血干/祖细胞的能力。在体外用小鼠骨髓基质细胞OP9与人类iPSC共培养的方法,将iPSC诱导分化为造血干/祖细胞;用流式细胞术检测造血干/祖细胞表面标志物的表达水平;用实时定量PCR检测分化过程中iPSC及造血干/祖细胞的相关基因mRNA表达水平的变化;用免疫磁珠法分离CD34+造血干/祖细胞并进行半固体集落形成实验检测细胞的集落形成能力。结果表明,iPSC与OP9细胞共培养诱导造血分化的第4天即可观察到iPSC形态变化;流式细胞术检测显示,分化得到的细胞表达已知的造血干/祖细胞相关表面标志物CD34和CD43分子。在体外分化过程中多能性的标志基因Oct4的表达逐渐下降,造血相关转录因子Gata-2的表达逐渐升高,而Runx-1的表达量则呈波浪式变化,CD34表达量逐渐升高。集落培养14 d能够得到红系集落(CFU-E),粒系集落(CFU-G),巨核系集落(CFU-M),粒-巨核系集落(CFU-GM)和混合系集落(CFU-GEMM)。结论:iPSC细胞能够在体外通过与OP9细胞共培养分化为造血干/祖细胞。

丁型肝炎病毒核酶反式切割HBV mRNA片段的实验研究

目的 探讨反式作用丁型肝炎病毒 (HDV)核酶体外切割乙型肝炎病毒 (HBV)mRNA片段的可行性。方法 将化学合成的核酶cDNA克隆到含有T7启动子的载体PGEM 4Z中。利用体外转录技术转录出核酶及底物 ,研究其体外切割活性。利用E H作图法进行核酶的酶促动力学研究。结果 在体外实验中显示两酶均能成功的将底物切割 ,37℃温浴 90min的切割百分率为 5 0 %和5 1%。利用E H作图法进行的酶促动力学研究中求得Rc1、Rc2的Km值分别为 0 6 1μmol L、0 5 8μmol L,Kcat值分别为 :0 6 4·min 1 、0 6 0·min 1 。结论 反式作用HDV核酶对非HDV底物 HBVmRNA片段的成功切割为寻找新的HBV的反义抑制手段开辟了途径。

Deoxyribozymes的研究进展

具有 RNA裂解活性的 DNA分子称为脱氧核酶。它是经过体外选择技术经多次筛选获得的。脱氧核酶在切割与其互补的 RNA底物分子时具有极高的特异性和切割效率 ,有望成为新的

肿瘤干细胞之研究

干细胞是具有多能性的细胞，能够无限制的自我更新并具有分化成不同的成熟组织类型的多能性。人体中存在着三种干细胞，即胚胎干细胞、生殖干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞是由受精卵经过五至六次分裂后发育而来，它在胚胎发育过程中逐渐失去多能性，最终分化成为组成各种器官的细胞系，胚胎干细胞是具有全能性的干细胞。生殖干细胞产生精子和卵子，是人类繁衍后代的源泉。不同于胚胎干细胞和生殖干细胞，成体干细胞的多能性大打折扣，这种细胞的分化功能被局限在只能分化成具有某种功能或某几种功能的体细胞上。

人类白细胞抗原-B51与Behet病葡萄膜炎的相关性研究

目的 探讨人类白细胞抗原 (HL A) - B5 1与 Behcet ) 病葡萄膜炎间的相关性。 方法 应用微量淋巴细胞毒试验 ,对 2 7例 Behcet ) 病患者和 30例健康人的 HL A- A和 HL A- B抗原进行研究。应用聚合酶链式反应 -序列特异性引物 (PCR- SSP)技术测定 HL A- B5 1抗原阳性的 Behcet ) 病患者和对照组人群中的HL A- B5 1等位基因 (HL A- B* 5 10 1- B* 5 10 7)。 结果 Behcet ) 病患者和对照组 HL A- B5 1的阳性频率分别为 6 3%和 16 .7% [χ2 =12 .9,P<0 .0 0 1,Pc<0 .0 5 ,相对危险度 (RR) =8.5 ]。在 Behcet ) 病患者中 ,葡萄膜炎的患病率为 4 0 .7% (11/ 2 7) ;72 .7% (8/ 11) Behcet ) 病葡萄膜炎中存在 HL A- B5 1(均为 HL A- B* 5 10 1)。HL A- B5 1和 HL A- B* 5 10 1与 Behcet ) 病葡萄膜炎存在弱相关性 ,但均未见统计学差异 (分别为 RR=2 .0 7,χ2 =0 .75 9,P >0 .2 5 ;RR =2 .6 7,χ2 =1.395 ,P >0 .10 )。 结论 提示 HL A- B5 1(HL A- B* 5 10 1)是Behcet ) 病的易感基因 。

见微知著——微核糖核酸对细胞命运的显著调控

重编程和分化、转分化在再生医学的应用中有巨大的潜能。在这些细胞命运转变中,微核糖核酸(microRNA,miRNA)或者微核糖核酸簇通过基因转录后调控发挥了重要作用。该文将从细胞miRNA表达谱与细胞谱系决定,miRNA与胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)多能性调控,miRNA与重编程、分化、转分化等方面综述领域内的最新进展,并结合该实验室在miR-302-367簇与重编程及神经干细胞转分化方面的研究工作展开对miRNA参与细胞命运调控的讨论。