姜黄素与肠道微生物间相互作用研究进展

姜黄素是近年来研究较为深入的植物源活性成分之一,具有抗炎、抗氧化、抗应激、抗肿瘤、抗病毒和降血糖血脂等多种药理学功能。目前,一系列研究数据表明,姜黄素可通过调节肠道菌群改善肠道屏障功能。此外,姜黄素还可经肠道菌群直接代谢或由宿主-肠道菌群相互作用产生生物活性代谢产物,从而进一步增强姜黄素对动物肠道健康的保护作用。姜黄素与肠道菌群之间的双向调节作用表明姜黄素在维持宿主肠道健康以及预防或治疗多种疾病方面具有巨大的应用潜力。本文综述了姜黄素与肠道菌群之间的相互作用及其在畜禽生产中的应用等最新研究进展,从而为将姜黄素作为一种新型饲料添加剂、以及潜在的“替抗”物质应用于畜禽生产中提供参考,有益于推动畜牧养殖业的健康发展。

姜黄素在畜禽养殖中的应用研究进展

姜黄素(CUR)是从姜科姜黄属草本植物根茎中提取出的一种天然橙黄色多酚类化合物,也是姜黄发挥药理学功能最主要的活性成分。CUR因具有多种生物学功能及较好的应用前景,目前已引起国内外学者的广泛关注。本文综述了CUR的理化性质、生物学功能,尤其是调控肠道健康方面的研究进展及其在畜禽养殖中的应用研究进展,以期为进一步将CUR作为新型饲料添加剂在畜禽生产中的应用提供理论参考,从而推动畜禽养殖的健康发展。

PBL教学法在动物生理学理论教学中的实施与效果

该研究基于动物生理学教学中存在的一些实际问题,探讨了问题导向教学法(PBL)在动物生理学课程理论教学中的实施与效果,认为PBL教学法在该课程理论教学中的实施不仅有助于改善教学效果,提升课堂教学质量,同时对动物医学类拔尖创新人才的培养也有一定的参考价值。

免疫荧光染色质量影响因素分析

免疫荧光技术是标记免疫技术中应用最为广泛的一项技术,具有特异性强、灵敏度高、速度快和便于观察等特点。影响免疫荧光染色质量的因素多种多样,从荧光染料、抗体、样品前处理、染色过程等几个重要的方面入手,就如何提高免疫荧光染色质量,以获得一张高分辨率的图片做了详细的介绍。该研究有利于提高免疫荧光染色质量,为生命科学研究提供了有力帮助。

研究性教学在《动物生理学》课程理论教学中的实施与效果

本文针对教学中存在的一些实际问题,探讨了研究型教学在动物生理学课程理论教学中的实施与效果,为改善教学效果,提升课堂教学质量以及动物医学类拔尖创新人才的培养提供参考。

对上海市少体校教练员领导行为的研究

本论文是以上海市少体校的教练员、运动员为研究对象,采用文献资料、调查访问、访谈、逻辑分析、数理统计等研究方法,以体育行为学、组织行为学为理论基础并结合国内外相关研究成果,从行为科学的角度,对上海市少体校的教练员领导行为的状况进行调查研究。

基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗帕金森病的研究进展

帕金森病进展缓慢,以神经退化为特征,主要病因是选择性中脑黑质多巴胺能神经元的丧失和纹状体多巴胺含量的显著减少。传统疗法有药物治疗和外科治疗,而近来较理想是基因治疗和干细胞移植治疗,包括胚胎干细胞、神经干细胞和间充质干细胞等。骨髓间充质干细胞作为体内一种多功能干细胞,具有成为基因治疗靶细胞的显著优势,并已被普遍用于人类疾病的研究。然而,对帕金森病进行基因治疗的目的基因选择具有多样性。因此,本文主要针对近十年基因治疗帕金森病的目的基因的选择相关研究进展作一综述。

动物肠道菌群的早期定植及其对机体健康的影响

动物肠道菌群的结构和功能已逐渐成为研究热点。动物肠道菌群的定植发生在动物出生过程和出生后早期,日龄、出生方式、益生菌和抗生素的使用、饮食等因素都会对肠道菌群的早期定植产生一定影响。此外,动物肠道菌群的早期定植可能影响机体健康与疾病的发生和发展,甚至影响到成年后的健康状况。本文综述了影响动物肠道菌群早期定植的因素、肠道菌群对机体健康的影响,为了解动物肠道菌群的定植过程、菌群与宿主的相互作用以及这一过程的长期影响提供参考。

禽类案例教学在《兽医外科学与手术学》全英文教学中的实践

为提高学生的学习主动性和思维活跃性,扬州大学兽医学院《兽医外科学与手术学》全英文授课引入了案例教学法。案例教学法是指由教师提供典型案例并提出问题,组织学生查阅学习资料并进行分析讨论,从而培养其独立思考、分析和解决问题的能力。以禽类手术为例的案例教学在《兽医外科学与手术学》全英文授课中的开展,需要教师做好如下工作:①与时俱进,及时更新典型案例;②充分利用多媒体技术,精心准备案例材料;③提高自身的临床和教学水平,积极吸取国内外先进的专业知识、教学资源和教学经验;④结合实际课时需要和教学特点,合理安排传统教学和案例教学。对2017级和2018级的43名学生进行匿名问卷调研教学效果表明,案例教学法有利于学生学习能力、思维能力和英语文献阅读能力的提升,同时对兽医外科的兴趣显著增加。

TNF-α-siRNA联合骨髓间充质干细胞对大鼠类风湿关节炎治疗效果的研究

抑制患者体内肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达可作为治疗类风湿关节炎(RA)的重要途径。以鸡Ⅱ型胶原法诱导的RA模型大鼠为研究对象,探讨TNF-α-siRNA联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗RA的效果及其作用机制。RA大鼠随机分为PBS组(模型对照)、甲氨蝶呤组(阳性药物对照)、BMSCs移植组、TNF-α-siRNA注射组和TNF-α-siRNA+BMSCs移植治疗组共5个组。结果表明:与PBS组模型大鼠相比,4个治疗组大鼠的生长速度均极显著提高,而血清中TNF-α、IL-1β水平、足趾肿胀值及强迫游泳不动时间均极显著降低。进一步研究表明,与PBS组模型大鼠相比,基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)表达水平在4个治疗组均极显著提高,而基质金属蛋白酶9 (MMP-9)的表达水平均极显著降低;TNF-α-siRNA+BMSCs联合治疗效果显著优于其他治疗组。这一研究说明,TNF-α-siRNA+BMSCs联合治疗可能通过抑制RA关节处MMP-9的表达而发挥作用,从而为基因干扰联合干细胞移植治疗RA提供了重要的试验依据。

类风湿性关节炎大鼠模型的构建及免疫相关基因mRNA表达的研究

为了比较类风湿性关节炎大鼠模型建模效果,并探究免疫相关基因mRNA的表达,本研究分别采用胶原(CIA)和完全弗氏佐剂(AA)两次皮内注射方法制备大鼠模型,对照组(C组)注射等体积生理盐水,以足趾肿胀值判断成模情况。在造模后不同时间点,采用ELISA试剂盒测定血清中细胞因子IL-1β的含量,运用RT-PCR方法检测脾组织中免疫相关基因PD-1、TGF-β1和Foxp3 mRNA的表达。结果显示,AA组和CIA组大鼠足趾肿胀值均显著增大(CIA>AA>对照组),血清IL-1β浓度在第2周与第4周显著升高(CIA>AA>对照组),脾组织中PD-1、TGF-β1和Foxp3 mRNA表达显著降低(CIA<AA<对照组)。以上结果表明,CIA和AA注射均可成功制备RA模型,且CIA模型较AA模型成模效果更好,IL-1β在RA发病中起着至关重要的作用。

帕金森病模型大鼠脑内CDNF表达变化

为了探讨帕金森病(PD)发病过程中大脑多巴胺能神经营养因子(CDNF)表达的变化,以大鼠为模型,研究了帕金森病CDNF及相关基因的表达变化,从而为基因治疗帕金森病提供理论依据。实验采用单侧黑质内单点注射6-羟多巴胺的方法制备帕金森病大鼠模型;运用免疫组织化学、Western blot及Q-PCR方法检测CDNF和多巴胺合成限速酶—酪氨酸羟化酶(TH)在模型大鼠黑质中表达的变化。研究结果发现,PD模型大鼠脑黑质区CDNF和TH阳性细胞数明显减少;进一步研究表明,与正常大鼠相比,模型大鼠CDNF m RNA表达水平虽未见显著改变(P>0.05),但CDNF及TH蛋白表达极显著降低(P<0.01)。提示帕金森病的发病可能与黑质中CDNF和TH表达量降低,进而抑制多巴胺合成有关。

Myostatin通过ERK1/2-PPAR-γ通路抑制猪皮下脂肪前体细胞成脂分化的研究

旨在探讨细胞外信号调节激酶1/2-过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(ERK1/2-PPAR-γ)信号通路在肌肉生长抑制素(MSTN)抑制猪皮下脂肪前体细胞(PSPAs)成脂分化中的作用。PSPAs在诱导分化培养液(DIM)处理同时,随机分3组:对照组(0 ng/mL MSTN)、100 ng/mL MSTN组(100 ng/mL MSTN)以及ERK1/2特异性抑制剂PD98059和100 ng/mL MSTN联合组(PD98059+100 ng/mL MSTN)。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖活力,油红O染色法及甘油三酯(TG)定量分析成脂分化,使用荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、CCAAT/增强子结合蛋白-α(C/EBP-α)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、细胞外信号调节激酶(ERK)及其磷酸化ERK(p-ERK)表达。结果表明:细胞增殖活力在3组间无显著性差异(P>0.05)。与对照组相比,100 ng/mL MSTN处理48 h后细胞内脂滴沉积量、油红O阳性细胞数及TG含量均显著降低(P<0.05),PPAR-γ、C/EBP-α、FAS和ACC的mRNA表达量均显著下降(P<0.05),p-ERK/ERK比值显著增加(P<0.05);与100 ng/mL MSTN组相比,PD98059+100 ng/mL MSTN组p-ERK/ERK比值显著降低(P<0.05),而PPAR-γ、C/EBP-α、FAS和ACC的表达均显著升高(P<0.05),与此同时,细胞内脂滴沉积量、油红O阳性细胞数及TG含量均显著升高(P<0.05)。综上,ERK1/2-PPAR-γ信号通路可能介导了MSTN对PSPAs成脂分化的调控,结果为将MSTN作为抑制猪皮下脂肪沉积的分子靶点提供了新的理论依据。

外泌体ncRNAs在脂肪细胞成脂及相关代谢疾病中作用的研究进展

外泌体是一种几乎所有细胞均可分泌的、直径在30~200 nm的微小囊泡,具有脂质双层膜结构,内含多种生物活性分子(蛋白质、脂质和RNAs等),可对生理和病理状态下多种生物学过程发挥重要调控作用。外泌体非编码RNA(ncRNAs)在脂肪组织与机体其他组织信息交流过程中发挥关键作用。本文针对外泌体的生物合成与功能、脂肪相关组织外泌体携带的ncRNAs(miRNA、lncRNA和circRNA等)在脂肪细胞成脂分化中的调控作用以及脂肪源性外泌体携带的ncRNAs与胰岛素抵抗间的关系等几个方面进行了阐述,为揭示外泌体携带的ncRNAs在脂肪组织与机体相关组织互作中的作用,进而为阐明肥胖及相关代谢性疾病的病因以及筛选新的治疗靶点提供参考依据。

骨髓间充质干细胞移植对帕金森病模型大鼠纹状体多巴胺水平的影响

旨在探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对帕金森病(PD)模型大鼠纹状体内多巴胺(DA)水平的影响。选取正常大鼠(N组),造模后4周、8周PD大鼠(M4、M8组),BMSCs移植治疗4周、8周后PD大鼠(T4、T8组)纹状体匀浆液,以高效液相色谱(HPLC)法检测各组纹状体内DA的含量。结果表明,N组大鼠纹状体内DA的含量为(15.56±2.16)μg/g;M4和M8组大鼠损毁侧脑纹状体内DA含量为(10.67±1.54)μg/g和(10.50±2.32)μg/g,均显著低于N组(P<0.05);T4和T8组大鼠损毁侧纹状体内DA含量为(12.70±2.91)μg/g和(13.71±2.42)μg/g,均显著高于M4和M8组(P<0.05)。T8组DA含量显著高于T4组(P<0.05),表现出随细胞移植时间的延长DA水平逐渐恢复的规律。说明BMSCs移植提高了PD模型大鼠脑纹状体内DA的含量,提示移植的外源BMSCs可能通过分化为DA能神经元或促进其功能恢复,增加DA的分泌,进而改善PD模型的症状。

白细胞介素-1βsiRNA联合骨髓间充质干细胞对大鼠类风湿性关节炎治疗效果的研究

本研究探讨了白细胞介素(interleukin,IL)-1β在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)发病中的作用,并评估IL-1β-siRNA联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗RA的效果。首先建立Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)大鼠模型,然后将成功建立的模型大鼠随机分为3组,分别注射PBS,IL-1β-siRNA以及IL-1β-siRNA联合BMSCs,注射1、2、3、4周后分别检测大鼠形态学、行为学、组织病理学和免疫学的变化情况,综合评估IL-1β-siRNA联合BMSCs治疗RA的效果。结果显示,与正常对照组大鼠相比,CIA模型组大鼠体重增长、强迫游泳挣扎时间以及脾脏组织中转化生长因子-β(TGF-β1)和叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA表达均显著降低,并呈现典型的关节炎症状,而足趾肿胀值、强迫游泳不动时间及血清中IL-1β水平均显著升高,表明RA大鼠模型构建成功,且IL-1β可能与RA的发病密切相关。在治疗试验中,与PBS注射组大鼠相比,IL-1β-siRNA以及IL-1β-siRNA联合BMSCs协同注射均可以显著提高大鼠体重增长、强迫游泳挣扎时间及脾脏组织中TGF-β1和Foxp3 mRNA表达水平,并显著降低足趾肿胀值、强迫游泳不动时间和血清IL-1β水平,并且IL-1β-siRNA联合BMSCs协同治疗效果显著优于IL-1β-siRNA单独治疗组。本研究结果说明Ⅱ型胶原蛋白可成功诱导大鼠RA模型,IL-1β可能在RA的发病中起重要作用,IL-1β-siRNA联合BMSCs协同治疗可以增强RA的治疗效果,从而为基因联合细胞治疗RA提供了理论基础。

BMSCs移植治疗对PD模型大鼠脑纹状体内AADC表达的影响及其机制研究

为了探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗对PD模型大鼠脑纹状体内芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)表达的影响及其可能机制,试验分别提取正常大鼠(N组)、PD模型大鼠(M组)和BMSCs移植治疗大鼠(T组)脑纹状体的总RNA、总蛋白和miRNA,采用RT-PCR和Western-blot方法检测移植治疗前后AADC的mRNA和蛋白表达以及靶向AADC 3'-UTR的miRNA的表达。结果表明:与N组正常大鼠相比,大鼠脑纹状体内AADC mRNA的表达在BMSCs移植治疗前后(M组和T组)均不存在显著差异,但是与mRNA表达不一致的是AADC蛋白表达在M组极显著下降(P<0.01),T组极显著回升(P<0.01)。靶向AADC的miR-3065-5p、miR-7a-1-3p、miR-31a-5p表达在M组极显著上升(P<0.01),但在T组表达极显著下降(P<0.01)。说明BMSCs移植治疗能够增加脑纹状体内AADC蛋白的表达,并且该过程可能受到下调miRNA的转录后调控。

肌肉生长抑制素(MSTN)对猪脂肪细胞脂解的影响及其机制

为探讨肌肉生长抑制素(MSTN)对猪前体脂肪细胞脂解的调控作用及其分子机制,本研究以原代培养的猪前体脂肪细胞为研究对象,在诱导分化的同时,分别进行0(对照组)、25、50和100 ng/mL MSTN重组蛋白处理。结果显示,与对照组相比,25、50、100 ng/mL MSTN处理48 h后,猪脂肪细胞内甘油三酯(TG)沉积量下降,且显著增加了细胞上清中甘油和游离脂肪酸的释放量,呈浓度依赖性抑制。进一步研究表明,与对照组相比,100 ng/mL MSTN处理显著抑制了脂滴包被蛋白(Perilipin)和脂肪分化相关蛋白(ADRP)的mRNA及蛋白表达,并显著促进了脂肪分解的2种关键限速酶激素敏感性脂肪酶(HSL)和脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)的mRNA及蛋白表达。综上可知,MSTN主要通过抑制Perilipin和ADRP的表达,降低其对脂滴的保护作用,增加HSL和ATGL接触脂滴的机会,促进了HSL和ATGL对猪脂肪细胞内TG的脂解作用,从而减少了TG的沉积量。研究结果为确认MSTN作为改善猪肉品质的分子靶点提供了理论支撑。

姜黄素对猪脂肪间充质干细胞脂肪合成和分解相关基因mRNA表达的影响

为了探讨姜黄素对猪脂肪间充质干细胞脂肪合成和分解相关基因mRNA表达的影响,从断奶仔猪皮下脂肪分离得到间充质干细胞,增殖培养,诱导分化,并在分化的同时进行姜黄素处理。试验分对照组(诱导分化液+姜黄素溶解试剂DMSO)和处理组(诱导分化液+10μmol/L姜黄素),分化48 h后收集细胞,进行后续检测。结果表明:10μmol/L姜黄素处理能显著降低猪脂肪细胞甘油三酯的含量,而对细胞增殖能力没有明显影响。荧光定量PCR结果显示,脂肪分化过程中的两个重要转录因子过氧化物酶增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和CCAAT增强子结合蛋白-β(C/EBP-β),脂肪合成过程中两个关键酶脂肪酸合成酶(FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA表达在10μmol/L姜黄素处理组均显著下降,而脂肪分解基因激素敏感脂肪酶(HSL)和脂肪组织三酰甘油水解酶(ATGL)mRNA表达以及酶活在10μmol/L姜黄素处理组均显著升高。结果提示姜黄素降低猪脂肪间充质干细胞脂肪沉积,有可能是通过抑制脂肪合成和增强脂肪分解两个过程来实现的,为姜黄素作为减少猪脂肪沉积的饲料添加剂的应用提供了理论支持。

CDNF-BMSCs移植治疗帕金森病的试验研究

采用Lipo 2000试剂将重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CDNF(大脑多巴胺能神经营养因子)转染至骨髓间充质干细胞(BMSCs);确认构建CDNF-BMSCs成功后,以脑立体定位技术为帕金森病(PD)模型大鼠进行纹状体内CDNF-BMSCs移植治疗;在治疗后不同时间点检测试验动物的旋转行为;利用免疫组织化学、WB技术检测纹状体内CDNF及酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化,探讨CDNF-BMSCs移植治疗PD的效果。结果表明:细胞移植治疗2周后,CDNF-BMSCs组大鼠的行为学显著改善,纹状体内CDNF蛋白表达量极显著增加、TH蛋白表达量显著增加;同时,CDNF-BMSCs组动物脑纹状体内CDNF、TH阳性细胞数均随时间逐渐增多。这一研究为基因治疗PD等神经退行性疾病提供了试验依据。