纳米级光学超分辨成像技术研究及展望

荧光显微成像技术能够将细胞生理活动可视化,是现代生命科学研究的重要手段。超分辨成像技术的出现将研究推进到亚细胞结构层次,而具有纳米级分辨率的单分子定位成像技术成为了研究细胞器、大分子复合物空间分布及相互作用的有力工具。继2014年超分辨成像技术获得诺贝尔化学奖后,《自然》(Nature)发布的2024年值得关注的七大技术中再次将纳米级分辨率光学成像技术作为热点进行介绍,超高分辨率成像技术是重要的前沿研究领域。本文首先简要介绍了荧光显微成像技术的发展历史、荧光显微镜的基础概念、超分辨成像技术的基本概况,之后着重介绍了单分子超分辨成像技术的研究进展,并在最后对该技术的发展及应用做了展望。

体外受精分娩儿童的神经行为发育指标研究

收集体外受精(in vitro fertilization, IVF)与自然受孕分娩儿童脐血和外周血,提取血清,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)水平,并进行自闭症儿童行为量表(autism behavior checklist, ABC)评分,彩色多普勒超声对妊娠11周及21周的胎盘厚度进行测量,了解体外受精及自然受孕儿童神经行为发育的差异。结果显示,体外受精分娩儿童血清BDNF水平低于自然受孕儿童(P<0.01),ABC量表评分高于自然受孕儿童(P<0.05),孕21周胎盘厚度增厚(P<0.05)。这提示体外受精可能会影响胎盘发育,并导致儿童神经行为的改变。

纳米分辨率光学显微成像

光学显微镜发明于17世纪,几百年来其分辨率一直受到光学衍射的限制。进入21世纪,多种超分辨成像技术打破了衍射极限的限制,带来了一场新的显微成像技术革命。其中,基于单分子定位的纳米分辨率光学成像技术近几年更是不断取得突破,达到接近分子尺度的分辨率。文章将简要介绍光学显微镜发展历程及超分辨成像技术基本原理,并着重介绍新型纳米分辨率显微成像技术及应用前景。

胎盘植入患者的大量输血策略

胎盘植入的发生率随着剖宫产率的增加呈平行增长趋势。胎盘植入是造成严重产后出血的主要因素之一，据报道，胎盘植入尤其是胎盘位于子宫前壁瘢痕部位的患者平均出血量为3000～5000ml，其中约有90％需要输血，有40％的患者输血超过10u红细胞悬液。输血是严重产后出血中降低孕产妇死亡率的重要手段。本文主要对胎盘植入患者大量输血的评估、准备和成分输血治疗进行介绍，以指导临床合理输血治疗，改善胎盘植入患者的预后。

马来酸麦角新碱预防剖宫产术产妇产后出血的多中心随机双盲对照临床研究

目的评价马来酸麦角新碱用于预防剖宫产术产妇产后出血的有效性和安全性。方法本研究采用多中心、随机、双盲、对照的临床研究设计,于2018年12月至2019年11月在全国16家医院开展,共纳入298例产妇,按1∶1比例随机分配分为试验组(马来酸麦角新碱注射液+缩宫素注射液)148例,对照组(缩宫素注射液)150例。比较两组产妇下列指标的差异:(1)主要指标:产后2 h总出血量;(2)次要指标:产后6、24 h出血量,胎盘滞留时间,产后出血的发生率,产后2、24 h额外使用促宫缩药物、止血药物或其他止血措施的比例,需要输血比例,因子宫复旧不良导致住院时间延长的比例;(3)安全性指标:恶心、呕吐、头晕等副反应,各给药时间点的血压。结果(1)试验组产妇产后2 h总出血量[(402±18)ml]少于对照组[(505±18)ml],两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)试验组产后6、24 h出血量少于对照组,分别比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。两组产后出血的发生率,产后2、24 h额外使用促宫缩药物、止血药物或其他止血措施的比例,需要输血比例,因子宫复旧不良导致住院时间延长的比例分别比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。(3)试验组2例(1.4%,2/148)产妇出现副反应,对照组有1例(0.7%,1/150)出现副反应,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。试验组产妇给药2.0 h及以内的收缩压高于对照组,给药1.5 h及以内的舒张压高于对照组,分别比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);但两组血压均在正常范围。结论剖宫产术中使用马来酸麦角新碱注射液可减少产后出血量,安全可行。

上皮细胞钠离子通道在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系

目的上皮细胞钠离子通道（ENaC）在子痫前期患者胎盘中的表达及其与子痫前期（PE）发病的关系。方法选择2009年3月至2011年3月在四川大学华西第二医院行剖宫产分娩的92例产妇的胎盘组织为研究对象,根据孕妇是否患有重度子痫前期,将其分别纳入重度PE组（n=48,重度PE患者）和对照组（n=44,正常妊娠者）。此外,选择于早孕期（孕龄为8~11孕周）因计划外妊娠等因素要求行人工终止妊娠孕妇的胎盘组织纳入早孕期组（n=36）。早孕期组的胎盘组织取自选择性负压吸引人工终止妊娠术者。重度PE组和对照组产妇行剖宫产分娩待胎盘娩出后,立即取胎盘母体面的中央绒毛区组织。3组受试者的住院时间等比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。体外实验在正常人滋养层细胞株HTR-8/Svneo上进行。采用免疫组化技术（SP法）检测ENaC在孕妇胎盘组织的定位。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法（qPCR）及Western blotting法检测胎盘组织ENaC mRNA及蛋白的表达水平。此外,观察雌、孕激素对滋养细胞HTR-8/SVneo ENaC表达的调节作用。再利用小干扰RNA（SiRNA/ENaC）干预ENaC的表达后,通过划痕实验及侵袭实验观察HTR-8/Svneo细胞迁移及侵袭能力的变化。本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,标本的采集过程均征得受试对象同意,并与受试对象签署临床研究知情同意书。结果 1重度PE组和正常妊娠组孕妇孕前体质指数（BMI）、孕期体重增加、基础收缩压、晚孕期收缩压、孕期收缩压增加、基础舒张压、晚孕期舒张压、孕期舒张压增加、新生儿出生体重等一般临床资料比较,差异均有统计学意义（t=2.586、2.16、2.139、15.817、13.078、4.896、16.600、11.119、8.456,P〈0.05）。2免疫组化法结果显示,ENaCα亚基主要表达于早孕期胎盘合体滋养细胞及绒毛滋养细胞的细胞膜上。3 qPCR结果表示：ENaC各亚基在不同妊娠时期的胎盘组织中均有表达,但其表达水平存在差异,其中ENaCα亚基主要在早孕期表达,而ENaCβ亚基主要在对照组表达。ENaCβ亚基在重度PE组的相对表达水平为0.48±0.17,显著低于ENaCβ亚基在正常妊娠组中的相对表达水平为0.89±0.20,并且差异有统计学意义（t=2.465,P〈0.05）。4雌激素（1μmol/L）、孕激素（5μmol/L）可下调ENaC mRNA在滋养细胞HTR-8/SVneo上的表达水平,孕激素（5μmol/L）可下调ENaC在蛋白水平的表达水平。5 ENaC蛋白水平的表达被ENaCα亚基特异性小干扰RNA（siRNA/ENaC）下调后,HTR-8/SVneo细胞的迁移及侵袭能力减弱。结论晚孕期胎盘组织中以ENaCβ亚基表达为主,重度PE患者ENaCβ亚基表达水平较正常妊娠者降低;下调ENaC的表达滋养层细胞侵袭与细胞迁移的能力减弱,推测ENaC可能通过影响滋养细胞的迁移及侵袭参与PE发病。