氢质子磁共振波谱活体检测结肠癌耐药性及其分子标志物的探索

目的探索氢质子磁共振波谱(1H-magnetic resonance spectroscopy,1H-MRS)活体评价人类结肠癌耐药性及可能分子标志物。材料与方法 8只耐药与8只不耐药人类结肠癌SW480荷瘤裸鼠于肿瘤最大径大于1.5 cm后,分别行1H-MRS检查后,过度麻醉处死荷瘤鼠,切下肿瘤,检测肿瘤的坏死(HE染色)及P-gp、MRP1、PKC、γ-GCSh、γ-GCSl、GSHS、GST蛋白表达(Western blot)。结果耐药组人类结肠癌SW480裸鼠模型Cho峰、Lac峰、Glx1峰、Lip及Ins峰/Cr峰面积较不耐药组人类结肠癌SW480/5-FU裸鼠模型增加,差异有统计学意义(P<0.05)。在HE切片上,组耐药组与不耐药组均见少许坏死,两组组织坏死面积差别无显著性,不耐药组组织间隙较耐药组增大。耐药组PKC、P-gp、MRP1、γ-GCSh、γ-GCSl、GSHS、GST蛋白表达显著高于不耐药组(P<0.05)。Cho峰、Lac峰、Glx1峰、Lip及Ins峰/Cr峰面积与肿瘤耐药相关蛋白表达有明显相关性。结论 Cho峰、Lac峰、Glx1峰及Ins峰/Cr峰面积比有可能作为活体监测结肠癌SW480耐药性的分子标志物。

^(1)H-MRS活体检测结肠癌谷氨酸代谢物改变与耐药性关系及病理生理基础研究

目的:运用^(1)H-MRS活体检测人类结肠癌组织谷氨酸代谢物的水平,探索活体评价结肠癌耐药性的可能。方法:采用大剂量冲击法诱导建立对5-FU耐药的结肠癌SW480耐药株(SW480/5-FU)。建立SW480组与SW480/5-FU组荷瘤鼠。检测肿瘤组织的蛋白激酶C、P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白1、γ-谷氨酸合成酶重链、γ-谷氨酸合成酶轻链、谷胱甘肽合成酶、谷胱甘肽S转移酶-π蛋白表达(Western Blot),坏死(HE染色),耐药性(MTT法)。结果:^(1)H-MRS活体检测SW480/5-FU组肿瘤组织Cho峰、Lac峰、Glx1峰、Glx2峰面积较SW480组增加(P<0.05)。在HE切片上,两组肿瘤组织坏死程度无明显差别(P>0.05)。SW480/5-FU组肿瘤蛋白激酶C、P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白1、γ-谷氨酸合成酶重链、γ-谷氨酸合成酶轻链、谷胱甘肽合成酶、谷胱甘肽S转移酶-π表达均明显高于SW480组(P<0.05)。1H-MRS检测肿瘤代谢物Cho峰面积与P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白1、γ-谷氨酸合成酶重链、γ-谷氨酸合成酶轻链表达呈正相关;Lac峰面积与P-糖蛋白、γ-谷氨酸合成酶重链表达呈正相关;Glx1峰面积与多药耐药相关蛋白1、谷胱甘肽S转移酶-π表达呈正相关;Glx2峰面积与多药耐药相关蛋白1、γ-谷氨酸合成酶重链、γ-谷氨酸合成酶轻链、谷胱甘肽合成酶表达呈正相关。结论:^(1)H-MRS可通过检测代谢物Glx1峰面积、Glx2峰面积的升高,反映谷胱甘肽生物学合成过程的增加,是肿瘤耐药形成的原因之一;肿瘤的膜代谢活跃、肿瘤酸化对谷胱甘肽生物学合成过程有促进或协同作用。