喜树胚轴细胞悬浮培养的优化和喜树碱的积累

目的优化喜树胚轴细胞悬浮培养体系生产喜树碱.方法将由喜树种子下胚轴诱导的愈伤组织进行悬浮培养,研究了基本培养基、激素和培养条件对培养物生长的影响,测定了培养细胞生长和喜树碱积累的动态变化.结果悬浮培养细胞在MS培养基中细胞生长良好,细胞分散性和喜树碱积累优于在其他培养基中.最佳激素组合为2,4-D 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,细胞继代周期以12 d左右为宜,悬浮细胞适合在22～26℃,120 r/min下生长.悬浮培养细胞在第4～20天为对数生长期,细胞倍增时间为t(d)=3.92 d-1,细胞干重至第20天达到最大,为27.44 g/L.在细胞对数生长期内,喜树碱积累与细胞生长呈线形正相关性,第20天喜树碱质量分数达到最大值9.319×10-5,喜树碱产量为2.56 mg/L.结论 MS基本培养基适合喜树胚轴细胞悬浮培养,细胞生长前20天内,培养体系中喜树碱积累与细胞生长呈正线形相关性.

真菌诱导子和抗褐变剂对喜树悬浮细胞生长及喜树碱生物合成的影响

研究真菌诱导子和抗褐变剂对喜树悬浮培养细胞生长和喜树碱合成的影响。试验通过在喜树悬浮培养细胞的不同时期,加入不同浓度的真菌诱导子或抗褐变剂的方法,研究其对细胞生长和喜树碱合成的影响。结果表明,米根霉提取物作为真菌诱导子,对喜树碱的生物合成最有效。植酸作为抗褐变剂,对细胞生长和喜树碱的生物合成最有效。在15天加入终浓度2g/L的植酸,再在18天加入终浓度30mg/L的米根霉诱导子处理,细胞干重在24天时达到最大值26.9g/L,是对照细胞干重最大值的1.2倍;喜树碱总产量在26天时达到最大值34.2mg/L,是对照总产量最大值的9.0倍。对照的细胞干重和喜树碱总产量在20天时达到最大值。喜树细胞悬浮培养中,添加真菌诱导子和抗褐变剂是提高喜树碱产量的有效方法之一。

蛇根草属植物资源与喜树碱及类似物的生产

随着市场需求的不断扩大,持续提取抗癌药物喜树碱及类似物已成为当务之急。在蛇根草属植物中发现喜树碱及其类似物,是获取该类物质重要的替代途径。对蛇根草属植物的主要用途、生物学特征以及主要活性次生代谢产物进行了介绍,论述了运用生物技术从蛇根草属植物中产生喜树碱及其类似物的研究,并对该类植物资源的开发利用进行了展望。

黑曲霉真菌诱导子对喜树培养细胞喜树碱积累的影响

以黑曲霉提取物作为真菌诱导子,研究其对提高喜树悬浮培养细胞的生长和喜树碱产量的影响。结果表明:终浓度40 mg/L的诱导子在细胞培养的第14天加入,细胞干重在第26天达到最大量31.5 g/L,是未处理的细胞干重的1.2倍;喜树碱产量在第29天达到最大值13.6mg/L,是对照产量的6.0倍,没有受到诱导处理的细胞干重和喜树碱产量都在第20天达到最大值。与真菌诱导子刺激提高细胞生长和喜树碱生物合成相对应的是,诱导刺激的培养细胞表现出较高的细胞活力,培养基中糖类的消耗量也随之增加。

电刺激对红豆杉悬浮培养细胞产紫杉醇的影响

以红豆杉悬浮培养细胞为材料产紫杉醇,在细胞生长的不同时期分别用脉冲电刺激及微交流电刺激处理。结果表明,两种电刺激均不同程度促进了红豆杉悬浮培养细胞的生长、紫杉醇的产生,其中脉冲电刺激效果优于微交流电刺激。最佳作用时间是在红豆杉细胞生长的衰亡期,微交流电刺激的紫杉醇含量较对照提高3倍多,脉冲电刺激的紫杉醇含量约为对照的7~9倍,最高达到12.24 mg.L-1。脉冲电刺激可有效提高紫杉醇的胞外释放率,达对照的4~5倍。

极具潜力的重组药用蛋白的毛状根表达系统研究

对植物表达系统产生重组药用蛋白进行了简单的介绍,重点论述了利用发根农杆菌诱导的毛状根培养系统表达重组药用蛋白的研究及应用情况。

喜树内生真菌的研究进展

介绍了喜树内生真菌的生物活性代谢产物,对其内生真菌的生物多样性及其与寄主植物的关系进行了综述,并对喜树内生真菌的研究方向进行了展望。

假柴龙树属植物资源的开发利用与喜树碱及类似物的生产综述

对假柴龙树属植物的生物学特征及产生的主要喜树碱类物质进行了介绍,着重论述了利用臭味假柴龙树产生喜树碱及类似物的研究,并就假柴龙树属植物资源的利用和开发作进一步的展望。

稀土元素铈对提高细胞培养喜树碱产量的研究

在喜树悬浮培养细胞中,三价稀土铈(Ce3+)的诱导刺激能显著促进喜树碱的生物合成。在细胞培养的第10天加入0.1mM的Ce3+,可使喜树碱产量达到最大值13.02mg/L,是没有受到刺激的6.39倍。与此相应的是,Ce3+刺激能显著提高培养细胞苯丙氨酸裂解酶的活性,增加细胞内丙二醛的含量。

胸段与腰段硬膜外阻滞对血氧饱和度的影响

硬膜外阻滞对呼吸功能的影响已有很多研究报道。本组应用503型脉博——血氧饱和度仪连续监测,观察60例患者硬膜外阻滞后血氧饱和度的变化以及辅助用药,吸氧后血氧饱和度的变化,探讨胸段与腰段硬膜外阻滞对血氧饱和度的影响。现将结果报道如下。1资料和方法本组60例,男24例,女36例。年龄16～64岁。

不同麻醉方法在腹腔镜胆囊切除术中的效果分析

腹腔镜胆囊切除术是临床上常用的一种手术方法，我们观察不同的麻醉方法围诱导期、术中、拔管前后循环功能的改变，拔管时间与苏醒时间及术中、术终知晓情况，以探讨腹腔镜胆囊切除术的理想麻醉方法，现将结果报告如下。

腭裂修复术发生低氧血症的原因分析

腭裂是临床上较常见的一种先天畸形，治疗均采用手术修复，修复大多在3岁以后进行，麻醉手术过程中低氧血症的发生率高，原因也很杂，现将分析结果报告如下：

红豆杉细胞继代培养防褐变措施的研究

本研究针对红豆杉组织培养中经常遇到的褐变问题 ,主要从继代培养的各个方面进行研究 ,力求最大限度地避免或减轻褐变。结果表明 ,较低的pH值 ,液体悬浮培养 ,较低浓度的无机盐 ,适宜浓度的金属离子可以减轻褐变 ,同时 。

红豆杉抗苯丙氨酸细胞系的筛选及悬浮培养特性

通过胁迫筛选法筛选红豆杉抗 苯丙氨酸细胞变异系 ,并比较了该细胞系与同步培养的原型细胞系悬浮培养的几项生理指标。结果表明 ,抗苯丙氨酸细胞系的紫杉醇含量显著高于原型细胞系的 3～ 5倍 ,并且抗性细胞系的生长速率、细胞活性、pH值。

壳聚糖诱导子促进喜树培养细胞喜树碱积累的研究

[目的]探讨壳聚糖诱导子对喜树悬浮培养细胞喜树碱积累的影响。[方法]在壳聚糖诱导的喜树悬浮培养体系中,测定培养细胞的干重、喜树碱的产量、过氧化氢和丙二醛的含量。[结果]在喜树悬浮培养细胞第20天加入最终浓度80mg/L的壳聚糖诱导子刺激36h后,喜树碱的总产量达到15.21mg/L,是未作处理的喜树碱总产量最大值(在细胞培养的第20天达到)的6.18倍。同时,受到诱导的培养细胞内过氧化氢和丙二醛的含量都急剧增加。[结论]壳聚糖诱导子的刺激能显著地促进喜树悬浮培养细胞喜树碱的生物合成。

帕瑞昔布钠超前镇痛对高龄患者罗哌卡因术后镇痛的影响

目的观察帕瑞昔布钠超前镇痛对罗哌卡因术后镇痛的影响。方法择ASAⅠ～Ⅱ级择期前列腺电切术的病人100例,体重55～85 kg,年龄60～80岁,随机分成4组,每组25例。Ⅰ组罗哌卡因浓度为0.10%;Ⅱ组罗哌卡因浓度为0.15%;Ⅲ组罗哌卡因浓度为0.20%;Ⅳ组罗哌卡因浓度为0.15%。在硬膜外穿刺前,前3组静注帕瑞昔布钠40 mg,第4组静注等剂量的生理盐水。记录术后2、4、8、12和24 h视觉模拟评分(VAS)、改良的Bromage评级及不良反应。结果 VAS和Bromage评分中:术后4、8、12 hⅠ、Ⅳ组与Ⅱ、Ⅲ组相比P<0.05;恶心Ⅲ组与Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组比较,P<0.05;术后镇痛Ⅰ、Ⅳ组与其他组相比P<0.05;下地活动时间,各时间点各组间相比P>0.05。结论静注帕瑞昔布钠超前镇痛下对0.15%罗哌卡因术后镇痛的效果确切,不良反应发生率低,有利于患者的术后恢复活动。

海因酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展

D-对羟基苯甘氨酸(D-HPG)主要用于合成β-内酰胺类半合成抗生素,是国内最紧缺的医药中间体之一。微生物酶法是目前获得光学纯D-HPG的重要途径,微生物中起催化作用的主要是D-海因酶和N-氨甲酰水解酶。文章综述了产酶微生物的来源,酶的理化性质,以及培养条件的优化、基因工程、酶的固定化技术生产D-HPG的研究进展。

Cu^(2+)诱导刺激对喜树悬浮培养细胞喜树碱生物合成的影响

[目的]探讨Cu2+作为诱导子对喜树悬浮培养细胞喜树碱积累的影响。[方法]在喜树悬浮培养细胞中,细胞生长的不同阶段,添加不同终浓度的Cu2+,诱导刺激喜树碱的生物合成。[结果]0.5μmol/L终浓度的Cu2+在第8天添加对细胞的生长最有利,而40.0μmol/L终浓度的Cu2+在第18天添加对喜树碱生物合成最有利。在第8天添加0.5μmol/L终浓度的Cu2+后再在第18天添加40.0μmol/L终浓度的Cu2+,可以使喜树碱的产量在第24天达到71.9mg/L,是未经处理的7.9倍。[结论]Cu2+诱导刺激可以显著提高喜树悬浮培养细胞喜树碱的产量。