鸡球虫重组蛋白rEnApiAP2对鸡免疫保护效果的观察

将毒害艾美耳球虫重组蛋白rEnApiAP2单独免疫(单免)或分别与柔嫩艾美耳球虫重组蛋白rEtGAM56或rEtGAM59联合免疫(联免)雏鸡,同时设rEtGAM56单免、rEtGAM59单免、未免疫攻虫和空白组为对照,分别攻毒害艾美耳球虫或柔嫩艾美耳球虫,以成活率、排出血便数、平均增重、相对增重率、病变记分、卵囊减少率、抗球虫指数(ACI)和血清抗体水平为指标,评价rEnApiAP2单免及与rEtGAM联免的免疫保护效果。结果显示:各试验组的成活率均为100%;与未免疫攻虫组比较,各免疫组鸡排血便堆数减少、平均增重增加。在rEnApiAP2单免组间,低剂量组的相对增重率(82.36%)、卵囊减少率(73.88%)和抗球虫指数(155.26)均为最高,平均病变记分最低(1.71)。攻毒害艾美耳球虫后,联免组的ACI值均大于相应的单免组,其中rEnApiAP2与rEtGAM56联免组的ACI值(169.83)最高。攻柔嫩艾美耳球虫后,rEnApiAP2单免组的ACI值(128.37)低于rEtGAM56、rEtGAM59单免组(130.12、151.88),rEnApiAP2与rEtGAM59联免组的ACI值(141.62)接近于rEtGAM59单免组,rEnApiAP2与rEtGAM56联免组的ACI值(115.46)小于rEtGAM56单免组。各免疫组血清抗体水平均显著高于空白对照组(P<0.05)。rEnApiAP2对毒害艾美耳球虫具有一定的免疫保护效果,与rEtGAM联免可提高对毒害艾美耳球虫的免疫保护力。本研究结果为鸡球虫病重组亚单位疫苗研制奠定了基础。

武平盘菜百香果复合果蔬汁饮料的研制

为提升武平农产品开发利用效率,以武平盘菜、百香果为原料,研究不同配方对复合果蔬汁口感、色泽、稳定性的影响,通过单因素试验,确定正交试验中盘菜汁用量3水平为20%、25%、30%;百香果汁用量3水平为15%、20%、25%;白砂糖用量3水平为6%、7%、8%。通过正交试验,确定复合饮料最佳配方为盘菜汁25%、百香果汁15%、白砂糖8%、稳定剂CMC与E415配比7∶3,研制的盘菜百香果复合果蔬汁饮料酸甜适中、香味浓郁、口感顺滑、性质稳定。

龙岩市武平盘菜百香果复合果蔬汁饮料开发前景分析

武平盘菜是武平县特产,其具有加工手段单一、不易储藏等特点使得盘菜销售难,农民收益低微。为丰富盘菜加工手段,拓宽其销售路径,推动形成盘菜加工产业链,提升农产品附加属性值,增加农民收益。通过宏观分析饮料市场的特点,结合武平县实际情况,对武平盘菜百香果复合果蔬汁饮料开发前景作了探讨,并提出相关建议,旨在为加快实现乡村振兴提供思路。

新型冠状病毒E蛋白B细胞表位的预测及鉴定

目的利用生物信息学方法预测SARS-CoV-2 E蛋白B细胞表位,并利用小鼠多抗血清、人新型冠状病毒阳性血清等进行验证,以明确SARS-CoV-2 E蛋白的优势B细胞表位。方法使用SOPMA、Expasy、SWISS-MODEL及IEDB数据库和BepiPred-2.0等软件预测SARS-CoV-2 E蛋白的结构及B细胞表位;通过大肠杆菌系统表达并纯化GST标签重组表位蛋白片段,以Western blotting和间接ELISA方法检测表位蛋白与小鼠和人SARS-CoV-2 E蛋白阳性多抗血清的反应性,以初步鉴定SARS-CoV-2 E蛋白的B细胞表位。结果表位预测结果显示,E蛋白含有线性B细胞表位Ser6-Val14和Tyr57-Pro71,构象表位涉及的氨基酸序列为Glu8-Val14、Leu39-Tyr59、Ser60-Leu65;表达并纯化含有预测表位的E蛋白片段E1(Ser6-Val14表位)、E3(Tyr57-Pro71)以及阴性对照片段E2(不含表位序列),Western blotting和间接ELISA结果均显示抗E蛋白小鼠多抗和人新型冠状病毒阳性血清只与E1、E3蛋白片段呈阳性反应而与E2蛋白片段均为阴性反应,显示E蛋白线性B细胞表位预测正确。结论本研究成功预测并初步鉴定出SARS-CoV-2 E蛋白2个线性B细胞表位,为新型冠状病毒疫苗制备和免疫应答特性分析等提供参考。

鸡白细胞介素-2原核表达及其活性鉴定

试验旨在获得具有生物活性的鸡白细胞介素-2(ChIL-2)重组蛋白。试验以克隆获得的ChIL-2基因为模板,分别构建原核重组表达菌BL21(pCold-ChIL-2)和BL21(pGEX-6P-1-ChIL-2),进行诱导表达和纯化;通过BrdU ELISA法检测重组蛋白诱导鸡脾脏淋巴细胞的增殖情况,评估其生物活性;以rHis-ChIL-2免疫小鼠制备多克隆抗体。结果显示:成功构建了原核重组表达菌BL21(pCold-ChIL-2)、BL21(pGEX-6P-1-ChIL-2);经表达纯化后分别获得纯度较高的rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2蛋白,大小分别为14 ku和39.4 ku;rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2蛋白分别能够促进脾脏淋巴细胞显著或极显著增殖(P<0.01或P<0.001),均具有良好的生物活性;以纯化的rHis-ChIL-2免疫小鼠制备的多克隆抗体效价为5.12×105,可识别rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2,与真核表达的ChIL-2蛋白反应。结果表明,原核表达的重组蛋白ChIL-2具有良好的生物活性,采用其制备的多克隆抗体可识别真核表达的ChIL-2蛋白,为后期ChIL-2的检测奠定基础。

猪γ干扰素单克隆抗体的制备与特性研究

为了制备高特异性的抗猪γ干扰素(IFN-γ)抗体,试验采用原核表达的携带His标签的重组猪IFN-γ(PoIFN-γ)蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备杂交瘤细胞;并以携带GST标签的重组蛋白PoIFN-γ(GST-PoIFN-γ)为包被抗原,通过间接ELISA方法筛选稳定分泌抗体的单克隆细胞株;而后通过间接ELISA方法、单克隆抗体亚型鉴定试剂盒、SDS-PAGE分析、Western-blot鉴定和间接免疫荧光方法对获得的单克隆抗体的腹水效价、亚型、反应特异性等生物学特性进行鉴定。结果表明:经筛选后共获得7株能稳定分泌PoIFN-γ的单克隆抗体细胞株;7株单克隆抗体的腹水效价在1∶2048000~1∶16384000之间,均为IgG1亚型,均能与原核表达及真核表达的PoIFN-γ蛋白发生特异性反应且反应性良好。说明试验成功制备了可特异性识别PoIFN-γ的单克隆抗体。

鸡白痢沙门氏菌耐药性的监测研究

采用WHO推荐的Kirby Bauer法对我国部分地区 196 2～ 1999年间 34 6株鸡白痢沙门氏菌进行了药物敏感性测定。结果表明 ,在近 40年时间里 ,鸡白痢沙门氏菌对氨苄青霉素、壮观霉素、复方磺胺、磺胺异恶唑、甲氧苄胺嘧啶、羧苄青霉素、四环素、链霉素、青霉素的耐药率显著增强 (P <0 0 1)。菌株的多重耐药率明显增加。 6 0年代以二耐菌株为主 (37 0 % ) ,70年代以四耐、五耐菌株居多 (6 0 5 % ) ,80年代五耐、六耐、七耐菌株占大多数(80 2 % ) ,90年代仅七耐以上菌株就达 83 7%。不同年代菌株显示出不尽相同的耐药谱 ,且呈现出不断增宽的趋势。通过流行病学调查发现 ,6 0年代至 90年代 ,鸡白痢沙门氏菌对青霉素、链霉素、磺胺类药物、四环素、卡那霉素、氯霉素、庆大霉素等药物的耐药性大多呈现出显著增强的变化趋势 ,这充分说明细菌耐药性的形成和发展与抗菌药物长期反复使用有着极为密切的关系。研究对于指导临诊合理用药及控制疾病流行具有重要的现实意义。

多种综合评价方法联合评价医疗质量的探讨

医疗质量是医院管理工作的重点，科学客观地评价医疗质量是提高医院管理水平和做出正确管理决策的关键环节。医院是一个多功能、多层次、结构复杂的大系统，其医疗质量必然需要多个指标组成指标体系来进行评价，而这种评价则必须借助于综合评价方法。目前，常用的医疗质量综合评价方法主要有Topsis法、综合指数法、功效系数法、秩和比法等。

携带新城疫病毒DNA疫苗的鼠伤寒沙门氏菌及其安全性与免疫效力

根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RTPCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5F基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1F。将pVAX1F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1F)。重组菌以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,细菌对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重。将SL7207(pVAX1F)分别以108CFU和109CFU的剂量3次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,抗体检测结果显示,在三免后1周,SL7207(pVAX1F)109CFU剂量组的血清抗体效价与空载体组之间存在显著性差异(p<0.05)。重组菌两个剂量组在首免后2周开始出现粘膜抗体,并于二免后2周和3周达到较高水平。免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1F)109CFU剂量组的保护率为77.27%,与空载体组之间存在显著性差异(p<0.05)。

鸡沙门氏菌弱毒冻干苗的研制

由减毒鸡沙门氏菌 97A疫苗株作为制苗用菌种 ,经普通琼脂培养、冷冻真空干燥等工艺生产鸡沙门氏菌弱毒疫苗 4批 ,每批疫苗分别以免疫剂量接种 6日龄AA肉鸡 ,免疫第 14天时 ,用强毒株Sg9和Sp4攻击 ,免疫组死亡保护率均达 90 %以上。试验结果表明 。

稳定携带新城疫病毒DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及其免疫原性

采用PCR技术从重组质粒pVAX1-F中扩增出新城疫病毒JS5株的融合蛋白(F)基因,将其克隆入真核表达质粒pmcDNA3.1+中,获得重组表达质粒pmcDNA3.1-F。通过电穿孔转化法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pmcDNA3.1-F)。体内、体外试验结果表明,重组质粒pmcDNA3.1-F在沙门氏菌中的稳定性显著高于pcDNA3.1-F。将重组菌SL7207(pmcDNA3.1-F)和SL7207(pcDNA3.1-F)分别以1×109CFU剂量两次口服免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可产生针对新城疫病毒F蛋白的血清抗体和黏膜抗体。重组菌以5×109CFU剂量两次口服免疫4日龄SPF鸡,免疫鸡产生的针对新城疫病毒F蛋白的血清抗体和小肠黏膜抗体效价水平与空载体组之间存在显著性差异(P<0.05)。免疫保护试验结果显示,SL7207(pmcDNA3.1-F)和SL7207(pcDNA3.1-F)免疫组的免疫保护率均与空载体组之间存在显著性差异(P<0.05),且SL7207(pmcDNA3.1-F)免疫组的保护率较SL7207(pcDNA3.1-F)免疫组提高了20.0%,说明稳定携带新城疫病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌具有良好的免疫原性和免疫保护性。

鸡白痢沙门氏菌耐药性的变化趋势

对１９６２ ～１９９８ 年间分离保存的３２５ 株鸡白痢沙门氏菌进行了药物敏感性测定。结果表明， 随着时间的推移， 菌株对１６ 种抗菌药物的耐药性呈现不同程度的上升趋势， 其中对氨苄青霉素， 复方磺胺， 甲氧苄胺嘧啶，链霉素， 四环素， 壮观霉素的耐药率明显上升。菌株多重耐药性的上升趋势显著， ６０ 年代菌株几乎没有多重耐药性， ７０ 年代以四耐、五耐菌株居多， ８０ 年代则以五耐、六耐、七耐菌株占绝大多数， 而９０ 年代七耐以上菌株的比率却近９０ ％ 。菌株耐药谱迅速增宽， 并对常用抗生素广谱耐药。因此， 建立鸡白痢沙门氏菌耐药性监测体系， 并积极寻求消除耐药质粒的方法， 是当前防治鸡白痢急待解决的课题之一。

减毒鸡沙门氏菌97A疫苗株安全性和免疫效力试验

本试验将减毒鸡沙门氏菌 97A疫苗株分别以不同剂量经口服和肌肉注射接种 10日龄 AA肉鸡 ,结果表明 ,97A对10日龄雏鸡有良好安全性。将 97A分别以 10 8、5× 10 8、10 9个细菌的免疫剂量口服接种 10日龄 AA肉鸡 ,抗体检测结果显示 ,所有试验组鸡在第 7天均能检测到抗体 ,第 14天抗体水平均有不同程度的提高。于接种后 14天 ,用强毒鸡沙门氏菌 Sg9按口服或肌肉注射的方式攻击 ,免疫试验组均有很高的保护率 (≥ 80 % ) ,其中 5× 10 8个细菌免疫剂量保护率最高 (10 0 % ) ,而对照组鸡 10 0 %死亡。试验结果表明 ,97A是一株安全性好 ,免疫保护力高的口服疫苗用菌株。

携带新城疫病毒F基因DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性

根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计1对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源NDV分离株JS5F基因(约1700bp),测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F。pVAX1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接免疫荧光试验检测出F基因在COS-7细胞中的表达产物。将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)。重组菌以109CFU/只的剂量2次免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对NDVF蛋白的血清抗体和小肠粘膜抗体应答,SL7207(pVAX1-F)免疫组抗体水平显著高于SL7207(pVAX1)组(P<0.05)。将SL7207(pVAX1-F)以109CFU/只剂量口服免疫1日龄雏鸡,免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)免疫组对鸡具有良好的保护率(77.27%),与空白对照组和SL7207(pVAX1)空载体组之间存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能成功释放所携带的质粒,并能刺激机体产生免疫应答,可对NDV强毒攻击提供良好的免疫保护作用,提示该疫苗候选株对新城疫的控制有重要应用前景。

广州市蚊幼虫自然种群孳生状况的研究

目的 了解广州市城区蚊虫自然种群幼虫的孳生地类型及种群分布特点。方法 用现场抽样调查方法对市内 9个城区分别以东西南北中五个方位对各类有可能孳生蚊虫的场所进行抽样 ,记录各类孳生场所的检查数及阳性数。结果 全市各类蚊孳生地共检查 193 3 0处 ,阳性 15 46处 ,阳性率 8.0 0 % ,以洼地 ( 2 5 .69% )、地下室 ( 2 3 .70 % )、防空洞 ( 16.79% )阳性率较高 ;建筑工地、小型积水、市政排水设施 3类孳生场所占总检查处数的 82 .45 % ,占总阳性处数的79.43 % ;各类型孳生地在各城区的分布比例及孳生阳性情况有所不同 ;除二次供水、市政排水设施和防空洞外 ,中心城区与边缘城区蚊孳生阳性率无明显差别。结论 广州市的蚊虫孳生地具有种类多样性 ,分布不均匀 ,在城区不同区域各有所侧重的特点。建筑工地、小型积水和市政排水设施是广州市城区主要蚊虫孳生地。小型积水是广州市白纹伊蚊重要孳生场所 ,致倦库蚊主要孳生场所是建筑工地、市政排水设施等。在蚊虫孳生地处理上 ,各区应根据实际情况采取相应措施。

鸡沙门氏菌弱毒苗与微生态制剂联合应用的效果

将鸡沙门氏菌弱毒苗分别与 2种不同的微生态制剂配合对 AA肉鸡实施免疫。结果表明 ,弱毒苗单独应用组、联合应用 1组和 2组的免疫保护效率分别为 75 %、90 %和 90 % ,均与攻毒对照组 (40 % )存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ;攻毒 2 0 d后所有存活鸡细菌分离结果显示 ,上述 3个试验组细菌分离率分别为 5 3.5 %、5 5 %和 5 .5 % ,也均与攻毒对照组 (75 % )存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。由此认为 ,该弱毒苗与上述微生态制剂联合应用的效果明显 ,具有较好的应用前景。

福州市居民对社区卫生服务的满意度与反应性评价

目的了解福州市居民对社区卫生服务的满意度与反应性。方法采用概率抽样与非概率抽样相结合方法,对福州市28家社区卫生服务中心辖区居民进行入户问卷调查。纳入本研究的调查对象为曾经利用过社区卫生服务且问卷有效的居民,共706人。结果居民对社区卫生服务的总体满意度较高,技术水平、治疗效果和服务态度对满意度影响较大;在反应性方面还有较大的提升空间,特别是卫生服务的可及性、交流和人格尊严等方面。结论福州市居民对社区卫生服务有较高的满意度,应采取综合措施来提高居民的反应性,以增强机构的竞争能力。

广州市鼠类及其体表蚤类的调查

目的了解广州市鼠类及其体表蚤类的种群构成及分布。方法笼夜法。在广州市12个区(县)中,每区(县)设多个捕鼠点,捕获鼠经鉴定后采集其体表蚤类,计算鼠带蚤率和蚤指数。结果共捕获鼠形动物2 987只,总密度为14.31%。啮齿目动物2 792只,分1科3属8种,其中褐家鼠占67.46%,黄胸鼠占14.30%;食虫目动物195只,为臭1科1属1种。捡获蚤501匹,鼠染蚤率为14.25%,总蚤指数为0.65。鼠体表蚤类经鉴定分3属3种,印鼠客蚤占98.60%。结论广州市主要鼠种是褐家鼠,主要蚤种是印鼠客蚤,未发现人间及鼠间鼠疫。