重组大肠杆菌产淀粉分支酶的发酵条件探索

淀粉分支酶可增加淀粉的α-1,6-糖苷键,从而改善淀粉的理化特性和生理功能。本文以可胞内表达Geobacillus thermoglucosidans淀粉分支酶的重组大肠杆菌BL21(DE3)(pET-20b(+)/be)为研究对象,首先研究了超声波提取胞内淀粉分支酶的条件,结果显示,当超声波输出功率为325W,总工作时间为15min,菌液OD600为1.4时,超声波破壁效果最佳。在此基础上,对重组大肠杆菌产淀粉分支酶的摇瓶发酵条件进行了探索,结果表明,最适发酵培养基为TB,初始pH为7.0,在25℃、IPTG浓度为0.01mmol/L下诱导培养12h,发酵所得菌体经超声后产生的淀粉分支酶总酶活最高为222.4U/mL。

亲爱的,再见

NO．1 午后两点。阳光混合在空气中氤氲着一种慵懒的气味。泡上一杯咖啡，揉揉在书海中挣扎得有些倦怠的双眼，无意间看到中考前你送我的卡片，这才突然地察觉——日子流逝得太快，亲爱的菲比呀，我们已有多久没见？

麦芽低聚糖生成酶在枯草芽孢杆菌中的分泌表达及其酶学性质研究

首先构建了来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)STB04的麦芽低聚糖生成酶(MFA酶)的枯草芽孢杆菌分泌表达系统,并对含表达载体的枯草芽孢杆菌WB600产重组酶的发酵条件进行了优化,发现以TB为发酵培养基、发酵温度为30℃时,有利于重组酶的分泌表达。其次,通过疏水和强阴离子交换色谱对重组酶进行了分离纯化,得到了电泳纯的酶。最后,对重组酶的酶学性质和产物合成进行了分析,结果显示:它在溶液中为单聚体,最适反应温度为45℃,且在该温度下半衰期为30 min;最适反应p H为6.5,且具有很好的p H稳定性;酶活力对金属离子存在一定依赖性并受Fe3+和Sn2+等重金属离子的显著抑制;重组MFA酶的动力学性质可以用米氏方程进行很好的描述,对麦芽糊精的水解速率最高;重组酶作用不同来源原淀粉及麦芽糊精的主要产物均为麦芽三糖、麦芽四糖和麦芽五糖,且以麦芽五糖为最高。

成长,让我再想一想

一直在想，成长究竟意味着什么？ 在春天看花开，在夏季看纯净的天空，踩过秋天枯黄的落叶，然后冬天飞扬的雪飘舞在我眼前。四季，在手指的罅隙里如水般流走，漾开一些小小的涟漪后便消失不见。