顺铂联合5-氟尿嘧啶对肺癌A549细胞生长的影响

目的探讨顺铂和5-氟尿嘧啶(5-FU)在体外联合用药对人肺癌A549细胞的生长抑制和促凋亡作用。方法运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测顺铂和5-FU单独及共同作用48 h后对A549细胞生长的影响,每个药物浓度设6个复孔,实验重复3次,结果取平均值;并用流式细胞术检测两药合用对细胞周期和凋亡的影响。结果 MTT法结果显示顺铂和5-FU联合使用对A549细胞的生长抑制率高于两药单独使用(P<0.01);流式细胞仪检测可见两药合用后晚期凋亡明显增多,S期细胞增多(P<0.01)。结论在体外实验中,顺铂与5-FU联合使用能够更好地抑制肺癌A549细胞的增殖,并可改变细胞周期分布,促进细胞凋亡。

骨髓间充质干细胞参与A549肺腺癌的组织修复

背景:肿瘤被认为是一种特殊的不愈合创伤,骨髓间充质干细胞通过向肿瘤组织归巢和向间质成分分化,参与肿瘤间质重构,从而改变肿瘤微环境,影响肿瘤的生长和转移。目的:在A549肺癌荷瘤小鼠模型上证实骨髓间充质干细胞参与其损伤修复,探讨骨髓间充质干细胞参与肿瘤组织修复的机制。方法:体外分离、培养人骨髓间充质干细胞,使用流式细胞术鉴定,制造A549肺癌荷瘤小鼠模型。实验组采用瘤周注射人骨髓间充质干细胞,对照组注射等量PBS,对比观察动物生活情况,肿瘤生长大小。4周后取材,苏木精-伊红染色对比观察肿瘤组织,Masson染色对比胶原纤维含量,RT-PCR检测两组α平滑肌收缩蛋白的表达,免疫组织化学检测两组成纤维细胞特异蛋白、成纤维细胞活化蛋白的表达情况,反映两组肿瘤组织的间质纤维的程度。免疫组织化学方法对比两组中血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、白细胞介素6、肌糖蛋白C的表达高低。结果与结论:骨髓间充质干细胞促进荷瘤小鼠肿瘤的生长,实验组肿瘤组织生长速度明显快于对照组(P<0.05)。RT-PCR检测α平滑肌收缩蛋白的表达:与对照组比较,实验组α平滑肌收缩蛋白mRNA的表达水平显著升高。免疫组织化学方法检测实验组肿瘤组织中TAFs标志物:成纤维细胞特异蛋白、成纤维细胞活化蛋白的表达,IHC检测血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、白细胞介素6、肌糖蛋白C的表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。说明骨髓间充质干细胞在肿瘤微环境中向成纤维细胞方向分化,参与肿瘤间质的形成和构建,分泌血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、白细胞介素6、肌糖蛋白C等促进肿瘤的生长修复。

全骨髓贴壁改良法分离培养人骨髓间充质干细胞及标记鉴定

目的对比、探求分离培养人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)的方法,探讨hMSCs鉴定和标记的方法,为进一步的实验研究打下基础。方法采集成人健康志愿者骨髓5mL,全骨髓贴壁法、全骨髓贴壁改良法、密度梯度离心法分离纯化、培养和扩增,获得hMSCs,对比三种方法。"慢冻速融"的原则进行细胞冻存、复苏。流式细胞术检测hMSCs的表面标志。hMSCs经5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)标记,免疫细胞化学法测定并评估。结果 hMSCs运用三种方法均可获得,比较全骨髓贴壁改良培养法最为方便高效分离获取hMSC、体外扩增迅速。流式细胞仪检测结果显示:CD44阳性及CD71弱阳性,表达率分别为95.05%,78.86%;CD34、CD45阴性,表达率分别为3.40%,2.88%。Brdu最佳标记浓度和时间分别为10μmol/L和72 h。结论 hMSCs采取全骨髓贴壁改良法进行较好的纯化和扩增,Brdu标记可用于hMSCs的生长和分化的动态示踪观察。有望建立hMSCs库,为组织工程、细胞移植研究打好基础。

奥曲肽对西咪替丁抑制SGC-7901细胞的增效作用

目的探讨生长抑素类似物奥曲肽能否增强西咪替丁对人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制作用。方法将不同浓度奥曲肽和西咪替丁作用于人胃癌细胞SGC-7901,运用四氮唑盐法(MTT法)检测奥曲肽和西咪替丁单独及联合作用48h后对SGC-7901细胞生长的影响,每个药物浓度6个复孔,实验重复3次,结果取平均值,并用Isobologram分析评价药物联合应用的作用性质。结果 MTT法结果显示奥曲肽和西咪替丁对SGC-7901细胞的生长起抑制作用。奥曲肽在浓度1.3～166.7mg/L范围内,呈剂量依赖性;西咪替丁在浓度500～3000mg/L范围内,呈剂量依赖性。奥曲肽和西咪替丁共同作用后,对SGC-7901的抑制作用明显增高,较两药单独作用差异具有统计学意义(P<0.05),其IC50的效应点落在Isobologram图中的协同区域。结论在体外实验中,奥曲肽及西咪替丁能够抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,且两药联合后对SGC-7901细胞生长抑制作用增强,为协同作用。奥曲肽能增强西咪替丁对人胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用。

肺癌术后并发乳糜胸9例回顾分析

本研究对我院及郑州大学第一医院普胸外科2008年1月至2013年1月间1 136例肺癌手术后9例并发乳糜胸患者的临床资料回顾分析报告如下。1临床资料1.1一般资料：1 136例肺癌根治术患者术后并发乳糜胸9例发生率为0.79%。9例患者中男性5例,女性4例,年龄36~65岁。右肺上叶切除1例左肺上叶切除2例左全肺切除2例左肺下叶切除4例。

电视胸腔镜辅助腋下小切口治疗复发性气胸62例手术体会

目的探讨电视胸腔镜辅助腋下小切口手术治疗复发性气胸的临床效果。方法固顾性分析我院2007年1月—2012年1月收治的62例复发性气胸患者行电视胸腔镜辅助腋下小切口手术治疗的情况。结果 62例患者手术过程均顺利,术中无大出血,无中转开胸,手术时间为1 h^1.5 h,术后胸腔闭式引流管留置时间3 d^5 d,术后住院时间为5 d^10 d。本组62例患者均痊愈出院,术后随访6个月~24个月,均无复发。结论电视胸腔镜辅助腋下小切口手术治疗复发性气胸具有手术时间短、出血量少、并发症少、术后恢复快及住院时间短的优势,值得推广。

奥曲肽联合顺铂和5-氟尿嘧啶对人肺腺癌细胞株A549抑制的增效作用

目的探讨生长抑素类似物奥曲肽能否增强人肺腺癌细胞株A549对化疗药物的敏感性。方法将不同浓度奥曲肽、顺铂和5-氟尿嘧啶（5-Fu）作用于人肺腺癌细胞株A549，运用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测奥曲肽单独以及与顺铂和5-Fu联合作用后48h对A549细胞株生长的影响，每个药物浓度6个复孔，实验重复3次，结果取平均值，并用Isobologram分析评价药物联合应用的作用性质。结果MTr法结果显示，奥曲肽对A549细胞生长起抑制作用，在浓度1．3—166．7mg／L范围内，抑制率呈剂量依赖性；其与顺铂和5-Fu共同作用后，对A549细胞的抑制作用明显增高。3种药物联合作用比奥曲肽单用或顺铂、5-Fu两药联合作用差异均具有统计学意义（P〈0．05），其半数抑制浓度（IC50）的效应点落在Isobologram图中的协同区域。结论在体外实验中，奥曲肽能够抑制A549细胞增殖，且联合顺铂和5．Fu后对A549细胞生长抑制作用增强，为协同作用。奥曲肽能提高A549细胞对顺铂和5-Fu的敏感性。