黄连上清胶囊联合替硝唑对慢性牙周炎患者牙周症状及龈沟液炎症因子水平的影响

目的探讨黄连上清胶囊联合替硝唑对慢性牙周炎患者牙周症状及龈沟液炎症因子水平的影响。方法选取南京市溧水区口腔病防治院2021年6月至2023年6月收治的80例慢性牙周炎患者作为研究对象。按照随机数字表法将其分为对照组(n=40)与观察组(n=40)。对照组采用替硝唑片治疗,观察组采用黄连上清胶囊联合替硝唑治疗。比较两组治疗效果、牙周指标、龈沟液炎症因子水平[乳铁蛋白(LF)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]以及药物不良反应。结果观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前牙周指标和炎症因子水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗后牙周指标、炎症因子水平均低于本组治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组均未发生明显不良反应。结论黄连上清胶囊联合替硝唑治疗慢性牙周炎患者利于改善牙周症状,减轻炎症反应,且不会引起明显不良反应,临床应用安全可靠。

肾小球系膜细胞培养及鉴定

肾小球系膜细胞（GMC）具有多种功能，如分泌细胞基质，产生细胞因子，并具有吞噬清除大分子物质以及类似平滑肌纫胞的收缩功能，是肾小球中功能最活跃的一类细胞。因此GMC的体外培养是研究肾功能、肾小球疾病的发生发展必不可少的手段之一。本中心近年来成功地进行了大鼠、成人以及胎儿肾系膜细胞的培养，现总结如下。

人胚胎肾间质成纤维细胞培养及其鉴定

目的:探讨人胚胎肾脏成纤维细胞培养方法。方法:利用人胚胎肾脏肾髓质进行培养,然后通过细胞形态学、超微结 构、免疫细胞化学等方法进行分析鉴定。结果:培养的细胞为长梭形、单核,超微结构为典型的成纤维细胞,并表达成纤维细胞 表面抗原、波形蛋白、结蛋白,不表达角蛋白。结论:成功地培养出人胚胎肾间质成纤维细胞。

肾病综合征患儿外周血单个核细胞白细胞介素13的变化

目的 研究小儿原发性肾病综合征时白细胞介素 1 3(IL 1 3)的变化。方法 对 5 0例肾病综合征患儿和 30例正常健康儿童外周血单个核细胞进行分离、培养 ,并应用双抗体夹心ELISA法检测培养上清中由Th2细胞来源的细胞因子IL 1 3的水平。结果 (1 )原发性肾病综合征患儿急性期外周血单个核细胞培养上清中IL 1 3水平较缓解期和正常对照组显著升高 ,而缓解期降至正常水平。 (2 )肾炎性肾病患儿急性期IL 1 3水平显著高于单纯性肾病患儿。结论 IL 1 3在肾病综合征的发病机制中发挥着重要的作用。外周血单个核细胞培养上清中IL 1 3水平的变化可作为观察病情活动状态的一个免疫学指标。

急性肾小球肾炎和紫癜性肾炎患儿外周血单个核细胞IL-13变化的临床意义

目的 观察白细胞介素 13 (IL- 13 )在急性肾小球肾炎 (AGN)和紫癜性肾炎 (HSPN)患儿中的变化 ,并探讨其临床意义。方法 应用 EL ISA法检测 2 4例 AGN和 2 0例 HSPN患儿外周血单个核细胞 (PBMC)培养上清中 IL - 13的水平。结果 AGN急性期和 HSPN活动期 PBMC培养上清中 IL - 13水平显著高于恢复期和正常对照组 ,恢复期降至正常水平。结论 IL - 13在 AGN和 HSPN发病机制中发挥着一定的作用。 PBMC培养上清中 IL -

肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF-κB活化及其意义

目的:探讨肾毒血清性肾炎大鼠肾组织核因子-κB(NF-κB)活化及其意义。方法:肾毒血清肾炎应用免抗鼠肾小球基膜肾毒血清制备。应用凝胶电泳迁移率(EMSA)和Western blot检测肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF-κB活化及IκBα和IκBβ的降解;采用核酸酶保护法检测肾组织中IL-8表达,并分析其与NF-κB活化的关系。结果:模型组肾组织中IL-8表达显著高于正常对照组;肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF-κB活化显著增强,p65由胞质转移至胞核,胞质内IκBα和IκBβ降解明显增加;NF-κB活化与IL-8表达呈显著正相关。结论:NF-κB/IκB信号通路介导肾小球肾炎肾组织中IL-8表达。

芩连平胃汤加味对糜烂型口腔扁平苔藓脾胃湿热证的疗效及血清P物质和趋化素水平的影响

目的探讨芩连平胃汤加味治疗糜烂型口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)脾胃湿热证的疗效以及对血清P物质和趋化素水平的影响。方法筛选符合条件的糜烂型OLP脾胃湿热证病例共计76例,均来源于医院2018年1月—2021年12月接诊的患者,根据随机数字表法分为治疗组与对照组,每组38例。对照组患者进行常规治疗方案;治疗组于对照组基础上采取芩连平胃汤加味治疗。两组连续治疗4周。比较两组症状体征评分、脾胃湿热证单项症状评分、临床疗效以及血清P物质和趋化素水平。结果治疗4周后,两组症状与体征计分明显减少(P<0.01);治疗4周后,治疗组的症状与体征计分明显低于对照组(P<0.01);治疗4周后,两组脾胃湿热证单项症状评分明显减少(P<0.01);治疗4周后,治疗组的脾胃湿热证单项症状评分明显低于对照组(P<0.01);治疗4周后,治疗组的总有效率为97.37%(37/38),显著高于对照组的78.95%(30/38)(P<0.05);治疗4周后,两组血清P物质和趋化素水平明显下降(P<0.01);治疗4周后,治疗组血清P物质和趋化素水平明显低于对照组(P<0.01)。结论于常规措施的基础上,芩连平胃汤加味治疗糜烂型OLP脾胃湿热证的疗效更优,有利于患者症状、体征及中医证候的改善,以及抑制血清P物质和趋化素水平。

鞘氨醇激酶基因在3T3-L1脂肪细胞诱导分化中的表达水平

目的 探讨鞘氨醇激酶基因 (SPHK)在 3T3 L1脂肪细胞诱导分化中表达水平的变化。方法 采用细胞培养和RT PCR技术检测细胞分化不同阶段脂肪细胞中SPHK基因表达水平。结果 1.SPHK基因在 3T3 L1脂肪前体细胞诱导分化初期表达呈明显上调趋势 ;2 .随着脂肪前体细胞分化成熟 ,该基因表达水平明显低于诱导分化初期的基因表达水平。结论 SPHK基因可能参与脂肪细胞分化的调控过程 。

阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子-κB活化与肾小管间质损害的关系

目的 :探讨阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子 - κB(NF- κB)活化及其与蛋白尿、肾小管间质损害和趋化因子表达之间的关系。方法 :阿霉素肾病模型采用尾静脉注射阿霉素 (6 m g/kg)制备。应用免疫组化和图像分析系统观察肾皮质区小管间质损害程度、NF- κB活化及单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP- 1)表达。结果 :阿霉素肾病大鼠出现大量蛋白尿及明显的皮质区肾小管间质损害。肾皮质区 NF- κB活化及 MCP- 1表达显著增强 ,且与蛋白尿及肾小管间质损害程度显著相关。结论 :NF- κB活化介导了非免疫性慢性肾小球肾炎时皮质区肾小管间质损害及诱导趋化因子的产生。

IL-10抑制人肾系膜细胞环氧化酶-2及其介导的前列腺素E_2的释放

目的观察白细胞介素 - 10 (IL - 10 )对 IL - 1β诱导的人系膜细胞 (HMC)前列腺素 E2 (PGE2 )释放及环氧化酶 - 2(COX- 2 )基因和蛋白表达的影响。方法应用放射免疫测定法检测 HMC培养上清中 PGE2 ,应用 RT- PCR和 western blot检测 COX- 2 m RNA和蛋白水平。结果 1IL - 1β显著上调 PGE2 释放及 COX- 2基因和蛋白的表达 (P均 <0 .0 1) ;2 IL - 10对基础状态下 PGE2 释放及 COX- 2基因和蛋白表达无明显影响 (P>0 .0 5 ) ;3 IL - 10可呈剂量依赖性地下调 IL - 1β诱导的 PGE2 释放及 COX- 2 m RNA和蛋白表达 (P<0 .0 1)。结论 IL - 10抑制 IL - 1β诱导的 HMC PGE2 释放及 COX- 2表达 ,提示 :IL -

姜黄素对肾毒血清肾炎大鼠肾组织超微结构及细胞增殖的影响

目的 探讨姜黄素对实验性肾炎组织病理以及增殖细胞核抗原 (PCNA)的影响。方法雄性SD大鼠 72只随机分成 3组 ,正常对照组 :注射生理盐水 ;模型组 :尾静脉注射兔抗鼠肾毒血清0 5ml/d ,连用 2d ,腹腔注射二甲亚砜 0 5ml·kg 1·d 1;姜黄素组 :尾静脉注射兔抗鼠肾毒血清 0 5ml/d ,连用d ,同时腹腔注射姜黄素 5 0mg·kg 1·d 1。分别于第 3、7、14、2 8d处死大鼠 ,取肾组织分送常规病理、免疫组化及透射电子显微镜检查。结果 姜黄素组肾小球细胞数明显少于模型组 ;间质炎细胞浸润亦较模型组明显减少 ;14d后小管间质损伤指数也低于模型组。电镜显示 ,姜黄素可明显阻止肾小球上皮细胞足突融合以及基膜增厚 ,抑制系膜细胞、内皮细胞增殖 ,减少肾组织内炎细胞浸润 ,尤其是对间质单核样细胞浸润的减少作用更为明显 ;免疫组化也证实姜黄素应用 7d后即可降低PCNA表达。结论 姜黄素能明显改善肾炎时肾小球超微结构的改变 ,并抑制系膜细胞、内皮细胞增殖 ,减轻小管间质损伤及肾组织内炎性细胞的浸润。

姜黄素对肾小球系膜细胞增殖的影响及其意义

目的:观察姜黄素对体外培养的人肾小球系膜细胞(MC)增殖的影响。方法:采用不同浓度姜黄素处理体外培养的人肾小球系膜细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定系膜细胞活性(A值),并与地塞米松进行比较。结果:当姜黄素浓度≥6.25μmol/L时,系膜细胞增殖明显受到抑制,且表现为浓度依赖性;当姜黄素浓度≥50 μmol/L时,姜黄素抑制系膜细胞增殖的作用明显强于地塞米松(P<0.05)。结论:姜黄素能抑制体外培养的人肾小球系膜细胞增殖,且作用强于地塞米松。

胰岛素样生长因子-Ⅰ对人肾小管上皮细胞转分化及胶原合成的作用

目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)在人肾小管上皮细胞转分化及胶原合成中的作用。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞HK2分为2组(1)对照组;(2)IGF-Ⅰ组培养液中加入终浓度分别为25、50、100、200μg/L的IGF-Ⅰ。用倒置显微镜观察细胞形态变化,以RT-PCR检测HK2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原Ⅰα和胶原ⅢαmRNA表达的变化。ELISA方法检测培养上清中胶原Ⅰ的浓度。结果IGF-Ⅰ刺激使HK2细胞由椭圆形变为梭形。不同浓度的IGF-Ⅰ作用于HK2细胞48h后,α-SMA、胶原Ⅰα和胶原ⅢαmRNA水平显著升高(P<0.05);ELISA结果显示,100及200μg/LIGF-Ⅰ组中HK2细胞分泌的胶原Ⅰ显著增加(P<0.05)。结论IGF-Ⅰ在体外能够诱导人肾小管上皮细胞转分化,并促进其胶原的合成。

姜黄素对大鼠肾毒血清肾炎肾组织细胞外基质积聚的影响

目的 :观察姜黄素是否抑制肾炎大鼠肾组织Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)的积聚而对肾脏起保护作用。方法 :72只雄性SD大鼠随机分成 3组 ,每组 2 4只。对照组尾静脉及腹腔注射生理盐水作对照 ;模型组尾静脉注射肾毒血清0 .5ml/d ,连用 2d ,腹腔注射二甲亚砜 0 .5ml·kg-1·d-1;姜黄素组尾静脉注射肾毒血清 0 .5ml/d ,连用 2d ,同时腹腔注射姜黄素 5 0mg·kg-1·d-1。分别于第 3、7、14、2 8天各处死 6只大鼠 ,部分肾组织福尔马林固定、石蜡包埋后进行免疫组织化学染色。结果 :对照组大鼠肾小球基膜Ⅳ型胶原以及FN染色弱阳性。模型组大鼠肾小球Ⅳ型胶原和FN沉积的范围随着病程的进展逐渐增多 ,与相应时间对照组比较有显著差异 (P <0 .0 1)。姜黄素组肾小球Ⅳ型胶原和FN沉积的范围亦随时间的发展逐渐扩大 ,然而Ⅳ型胶原较同期模型组比较染色范围却明显缩小 (P <0 .0 1) ,而FN于 7d后才比模型组减少 (P <0 .0 1)。结论

外源性结缔组织生长因子对肾小管上皮细胞的转分化和胶原合成效应

目的大量研究表明内源性结缔组织生长因子(CTGF)在肾小管间质纤维化(TIF)进程中发挥了重要作用,为进一步阐明外源性CTGF的作用机制,该实验探讨了重组人结缔组织生长因子(rhCTGF)刺激对人肾小管上皮细胞(HK2)转分化和胶原合成的作用。方法rhCTGF 5 ng/mL刺激HK2细胞,用倒置显微镜观察细胞形态学变化,同时在刺激后0,3,6,12,24,48 h各点收集细胞,RT-PCR检测上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原Iα1(Col Iα1)和胶原IVα1(Col IVα1)mRNA表达变化。结果rhCTGF 5 ng/mL刺激使HK2细胞形态由椭圆形转为梭形,下调E-cadherin mRNA表达,上调-αSMA mRNA表达,但对Col Iα1和Col IVα1mRNA表达没有影响。结论外源性CTGF能导致HK2细胞转分化,但不能促进其胶原合成。

加速型肾小球硬化动物模型的建立

目的 建立一种病变稳定、制作周期短、重复性好、最接近人类肾小球硬化病理改变的动物模型。方法 在摘除一侧肾脏的基础上 ,通过两次尾静脉注射柔红霉素 ,定期观察血、尿及肾脏组织病理学改变。结果 模型组大鼠于用药后第 4周时 ,出现水肿、大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症 ,病理形态上开始出现典型的节段性肾小球硬化 ;第 9周时血清肌酐、尿素氮水平显著升高 (P<0 .0 5 ) ,80 %的肾小球出现节段性硬化。结论 此模型制作周期短 ,各项指标均符合肾小球硬化的病理及临床特征。

基质金属蛋白酶组织抑制剂1对细胞因子诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)对细胞因子IL-1β、TNF-α和干扰素γ(IFN-γ)诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用及其可能机制。方法实验分TIMP-1干预组、细胞因子刺激组和对照组。细胞因子刺激组应用细胞因子(IL-1β 10μg/L,TNF-α 50μg/L,IFN-γ 50μg/L)诱导大鼠胰岛瘤细胞株RINm5F细胞凋亡;TIMP-1干预组在细胞因子刺激前予以TIMP-1(50μg/L)预处理1 h;对照组采用无血清培养基同步培养。应用四甲基偶氮唑盐比色法和Caspase-3分光光度法检测各组细胞活力和Caspase-3活性,采用DNALadder进行凋亡鉴定。结果与对照组比较,细胞因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ联合刺激组细胞活力明显降低,并呈时间依赖性(Pa<0.05,0.001);TIMP-1干预组较细胞因子刺激组细胞活力上升约14%,Caspase-3活性下降约38%,二组比较差异有显著性意义(Pa<0.001)。DNA Ladder检测,细胞因子刺激组可见特征性的梯状条带,TIMP-1干预组梯状条带不明显,出现与对照组相似的2条基因组大分子条带。结论IL-1β、TNF-α和IFN-γ联合刺激可诱导RINm5F细胞凋亡,TIMP-1对细胞因子诱导的RINm5F细胞的凋亡有一定的保护作用,此作用可能与其抑制Caspase-3活性有关。

脂联素基因在3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化中表达水平变化的研究

目的:观察脂联素基因mRNA在3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化过程中表达水平的变化。方法:体外培养3T3-L1脂肪前体细胞,应用MIX、地塞米松、胰岛素诱导其分化,采用RT-PCR技术检测诱导分化不同时间(0～10天)脂肪细胞中脂联素基因mRNA的表达水平。结果:脂联素基因低表达于3T3-L1脂肪前体细胞中,并随脂肪前体细胞分化成熟,该基因表达水平呈逐渐上调趋势,除在诱导剂作用后第0天与第2天、第1～2天、第3～4天、第6天与第8～10天、第7～10天各时段内差异无显著性(P>0.05)外,其余各时段之间表达水平差异均有显著性(P<0.05)。结论:在3T3-L1脂肪前体细胞分化过程中脂联素基因表达逐渐上调,可能有利于脂肪细胞的分化成熟。

蟾蜍灵对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响

目的:探讨蟾蜍灵(bufalin)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)凋亡的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为对照组、LPS刺激组和蟾蜍灵干预组,应用台盼蓝拒染法检测蟾蜍灵对GMC的细胞毒性作用,应用透射电镜观察系膜细胞超微结构的变化,采用逆转录PCR检测Bax和Bcl-2基因mRNA的表达,Western blot法检测Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果:透射电镜观察蟾蜍灵干预组可见凋亡早期形态学改变。逆转录PCR和Western blot结果显示蟾蜍灵组较脂多糖组Bax表达增多,Bcl-2表达减少,差异均具有统计学意义(P<0.01),蟾蜍灵干预后,Bax较Bcl-2表达过量。结论:蟾蜍灵可能通过调节Bax和Bcl-2的相对表达量而诱导脂多糖作用后肾小球系膜细胞发生凋亡。

细胞凋亡与大鼠肾小球硬化关系的初步探讨

目的 通过实验性动物模型观察细胞凋亡与肾小球硬化发生发展的相关性。方法 用一侧肾切除加静脉注射柔红霉素的方法建立大鼠肾小球硬化模型 ,应用原位末端转移酶标记技术 (TUNEL)观察细胞凋亡的发生。结果 ①建立的大鼠肾小球硬化模型 ,其组织形态学特征类似于人类局灶性节段性肾小球硬化的发生发展 ,第 4周开始出现硬化病灶 ,第 8周肾小球大部分节段均成为硬化病灶。②TUNEL结果显示 ,对照组大鼠肾组织中仅存在极少的细胞凋亡现象 ;肾小球硬化模型的肾组织 2周组无显著的细胞凋亡现象 ;4周组开始出现小球细胞凋亡现象 ,与对照组比较差异有显著性 [(5 .4± 1.2 )vs (1.6± 0 .8) ](P <0 .0 1) ;6周至 8周组小球细胞凋亡达高峰 ,凋亡细胞数分别为 (8.6± 2 .8) ,(10 .1± 1.9) ,与对照组比较 [分别为 (1.8± 0 .8) ,(1.7± 0 .5 ) ],差异有显著性 (P <0 .0 1)。③ 4周～ 8周 (硬化初、中期 ) ,硬化肾小球中出现的凋亡细胞数与肾小球细胞总数呈明显负相关(r =- 0 .85 ,P <0 .0 1) ;8周 (硬化后期 )以后 ,硬化肾小球内出现的凋亡细胞数与肾小球细胞总数呈正相关 (r=0 .91,P <0 .0 1)。结论 细胞凋亡与大鼠肾小球硬化发生的范围及进展的时相密切相关 。