M蛋白干扰临床实验室检测项目的研究进展

M蛋白是一种特殊的免疫球蛋白,其存在可能影响一些临床血液检验项目的实验室检测结果。M蛋白的干扰存在于检验前、检验中和检验后,严重影响其他检测项目的准确性。在血清肌酐、尿酸、脂蛋白、总蛋白、胆红素、血糖、血磷、血红蛋白、糖化白蛋白检测中,高浓度的M蛋白可造成结果出现假性高值或假性低值;在25‐OH维生素D、促甲状腺素、C反应蛋白、万古霉素、庆大霉素、丙戊酸钠药物浓度的检测中,M蛋白的异常存在干扰了实际检测结果。针对以上问题,解决方案包括如检验前稀释血清或去除蛋白、检验中使用蛋白稳定剂或优化反应条件等。临床上,还可以发现隐匿性的M蛋白,能够在疾病发生前有效检出M蛋白,对于疾病的治疗和预后发展都将出现新的转机。

psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因质粒的构建及在真核细胞中的表达

目的:以psiCHECK-2质粒为骨架,构建带有远红外荧光蛋白mLumin和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)的双荧光蛋白报告基因质粒psiCHECK-2-eGFP-mLumin。方法:PCR扩增mLumin和eGFP基因片段,分别取代海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶插入psiCHECK-2质粒中,构建psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因重组质粒mLumin。通过测序验证插入序列,并将此质粒转入HEK293T细胞,分别用PCR和荧光显微镜鉴定eGFP和mLumin在细胞中的表达。结果:DNA测序结果证实连接在psiCHECK-2质粒上的eGFP和mLumin基因序列与基因库中的序列一致。将psiCHECK-2-eGFP-mLumin质粒转染HEK293T细胞,能成功表达eGFP和mLumin蛋白。结论:成功构建psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因质粒,且可在真核细胞中表达。

CD39^+和CD73^+调节性T细胞与原发性胆汁性胆管炎肝脏损伤的相关性研究

目的分析原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者腺苷代谢通路相关分子的变化及其与PBC炎性损伤的关系。方法连续选择2016年10月-2017年10月在太仓市第一人民医院和常熟市第二人民医院就诊的PBC患者49例和体检健康者36例。流式细胞术分析外周血腺苷代谢通路关键分子CD39和CD73在CD4+T细胞和Foxp3+调节性T细胞(Treg)中的表达情况,高效液相色谱串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)分析患者血清三磷酸腺苷(ATP)水平。分析以上指标的统计学差异及其与肝脏炎性损伤指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)和Mayo评分之间的相关性。结果 PBC组CD4+CD39+T细胞占CD4+T细胞比例[(5.28±1.92)%]较对照组[(11.01±3.19)%]显著降低(t=10.25,P<0.01),CD4+CD25+Foxp3+CD39+T细胞(CD39+Treg)在Foxp3+Treg中所占比例[(23.75±9.48)%]同样显著低于对照组[(54.68±5.18)%],差异有统计学意义(t=13.79,P<0.01)。PBC组和对照组CD4+CD73+T细胞在CD4+T细胞中的占比和CD4+CD25+Foxp3+CD73+T细胞在Foxp3+Treg中的占比差异无统计学意义(t值分别为2.235和1.083,P>0.05)。PBC组血清ATP水平[(200.28±79.41)μg/L]明显高于对照组[(89.20±33.76)μg/L],差异有统计学意义(t=8.367,P<0.01)。PBC组CD39+Treg占Treg比例与ATP、GGT和Mayo评分水平呈负相关关系(r值分别为-0.413、-0.378和-0.382,P值分别为0.003、0.007和0.007)。结论 CD39+Treg在PBC患者中比例显著降低,可能通过降低ATP的分解导致炎性损伤加剧。CD73+Treg在PBC患者中未见明显变化。

降钙素原、C反应蛋白在儿童血流感染诊断中价值的报告分析

分析探究儿童血流感染诊断中应用降钙素原、C反应蛋白的临床应用价值。方法 本次研究选取我院2019年1月-2020年5月期间收治的80例血流感染患儿作为研究对象,给予80例疑似血流感染患儿血培养检查以及降钙素原、C反应蛋白诊断,并对比两种诊断方式的检出率。结果 降钙素原、C反应蛋白阳性检出率为68.75%,血液样本培养检查阳性检出率为8.75%,组间数值对比结果表示为存在明显差异P<0.05;对比阳性、阴性患儿降钙素原、C反应蛋白水平,组间数值对比差异显著,P<0.05;结论 在血流感染中采用降钙素原、C反应蛋白联合检验的方式具有较高的应用价值。

CFP10/ESAT6融合蛋白-ELISPOT在肺结核病中的诊断价值

目的探讨CFP10/ESAT6融合蛋白-酶联免疫斑点试验(ELISPOT)和结核菌素试验(PPD试验)在肺结核病中的诊断价值。方法应用ELISPOT和PPD试验检测30例结核患者、54例非结核患者和37例健康者,比较两者的诊断价值。结果国产试剂盒CFP10/ESAT6融合蛋白-ELISPOT检测30例结核患者、54例非结核患者和37例健康者的阳性率分别为70.0%、18.5%和13.5%,PPD试验检测的阳性率分别为60.0%、29.6%和29.7%。在30例结核患者中ELISPOT和PPD试验的灵敏度分别为70.0%和60.0%。在54例非结核组和37个健康组中ELISPOT和PPD试验的特异性分别为83.5%和70.3%。结论国产试剂盒CFP10/ESAT6融合蛋白-ELISPOT在肺结核的诊断中具有高灵敏度和特异性。

次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型EL/4细胞系的建立

目的:建立稳定的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase,HG-PRT)缺陷型EL/4细胞系,为小鼠T细胞杂交瘤的制备奠定基础。方法:通过乙基甲磺酸(ethyl methanesulfonate,EMS)提高EL/4细胞的基础突变率,用8-氮杂鸟嘌呤(8-Azaguanine,8-AG)从5μg/ml到80μg/ml浓度逐渐筛选出对8-AG有稳定抗性的细胞株EL/4,并对其生物性状与基因表型进行鉴定。结果:通过筛选获得能够耐受高浓度(80μg/ml)8-AG的EL/4细胞,并能长期在20μg/ml 8-AG培养液中正常生长,但不能耐受次黄嘌呤-氨甲蝶呤-胸腺嘧啶(hypoxanthine-aminopterin-thymidine,HAT)培养基(3 d全部死亡),RT-PCR未能从该EL/4细胞中检测出HGPRT基因的表达,由此可见该EL/4细胞的HGPRT基因发生突变或者缺失。将该细胞经克隆后获得单克隆细胞株,并命名为突变的EL/4(mutant EL/4,mEL/4)。该细胞株能与磁珠分离的小鼠脾脏来源的CD4+T细胞在PEG作用下顺利进行融合。结论:成功建立了HGPRT缺陷型EL/4细胞系mEL/4,为制备T细胞杂交瘤奠定了基础。

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药基因分析

目的了解太仓市第一人民医院碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)对常用抗菌药物的敏感性及常见碳青霉烯类耐药基因的流行。方法收集2017年1-12月临床分离的全部CRE菌株,微量肉汤稀释法测定CRE对常用抗菌药物的敏感性;聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)特异性扩增blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM和blaOXA基因,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析,经BLAST比对确定耐药基因的基因型。结果共收集到54株CRE菌株,主要为肺炎克雷伯(57.4%,31/54)、阴沟肠杆菌(16.7%,9/54)、大肠埃希菌(14.8%,8/54)。药敏试验结果表明54株CRE菌株除了对多粘菌素、替加环素、阿米卡星的耐药率分别为0、3.7%、33.3%以外,对其他临床常用抗菌药物耐药率高达50.9%~100%;基因扩增结果表明57.4%(31/54)的菌株检出blaKPC基因;5.5%(3/54)的菌株检出blaNDM基因;其他基因未检出。结论CRE对多黏菌素和替加环素之外的大多数临床常用抗菌药物呈高度耐药;产KPC型碳青霉烯酶是CRE对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要耐药机制,基因型主要为blaKPC-2。

浅析国内土壤环境污染现状与防治措施

当前,我国社会经济的不断发展,使得环境问题变得更加突出,其中就包括土壤环境问题,土壤作为种植业的基础,其自身若是出现问题,就会对种植业的生产质量与效率造成不良影响,同时也会对人们的生活产生负面影响。因此,相关单位应该对土壤环境问题加以重视,并且要对当下的土壤环境污染现状进行全面的了解,针对具体情况,制定出合理有效的防治方案,引进先进的防治技术手段,实现对土壤环境污染问题的科学防治。

宫颈癌患者miR-92a与miR-224表达水平及其诊断价值

目的探究宫颈癌患者血清微小RNA-92a(miR-92a)与微小RNA-224(miR-224)表达水平及其诊断价值。方法选取2017-01-02-2021-12-02太仓市第一人民医院收治的宫颈癌患者104例作为研究组。患者年龄22~70岁,平均年龄(53.96±10.02)岁。病理类型:均为鳞状细胞癌。国际妇产科联盟临床分期:Ⅰ期20例,Ⅱ期56例,Ⅲ期28例。另选取100名健康体检者作为对照组。抽取空腹静脉血,检测2组血清中微小RNA-92a(miR-92a)、微小RNA-224(miR-224),对比2组miR-92a与miR-224表达水平及其诊断价值。收集并整理病理资料,以x±s表示计量资料,行t检验;以n(%)表示计数资料,行χ^(2)检验。结果研究组miR-92a、miR-224相对表达高于对照组,差异有统计学意义,P<0.05。miR-92a的表达对宫颈癌诊断的最佳截断点为5.25,灵敏度67.92%,特异度80.00%,AUC为0.687,95%CI为0.598~0.767;miR-92a的表达对宫颈癌诊断的最佳截断点为4.62,灵敏度64.15%,特异度77.78%,AUC为0.667,95%CI为0.578~0.749;联合对宫颈癌诊断灵敏度66.04%,特异度86.67%,AUC为0.740,95%CI为0.654~0.814。miR-92a及miR-224联合对宫颈癌诊断的AUC为0.825,单一诊断效能低于联合,P<0.05。结论宫颈癌患者miR-92a与miR-224表达水平较高,miR-92a与miR-224联合检测对宫颈癌具有较高的诊断效能。